Поширені варіанти IL6, LEPR та PBEF1 пов’язані з ожирінням при діабеті індійських дітей
Анотація
Прояв хронічних метаболічних розладів, включаючи діабет 2 типу, серцево-судинні захворювання та метаболічний синдром, починається в ранньому віці, що відзначається швидким збільшенням ІМТ у дитинстві (1). Зростання поширеності ожиріння серед індійських дітей (2) свідчить про насувається кризу порушень обміну речовин, яка вже досягла масштабів епідемії в Індії. У цьому сценарії існує гостра необхідність визначити основні фактори, що впливають на схильність до дитячого ожиріння та пов’язують дитяче ожиріння та хронічні розлади у дорослих.
Дитяче ожиріння - це стан запалення, що видно з нерегульованих секретів адипокінів та запальних молекул при ожирінні (3). Окрім запальних властивостей, ці адипокіни та запальні молекули також відіграють важливу роль в енергетичному гомеостазі, обмінних процесах та регуляції жирових відкладень (3). Хоча збурення секреції адипокінів та запальних молекул при дитячому ожирінні добре задокументовані, досліджень, що вивчають внесок варіантів генів, що кодують їх, у сприйнятливість до дитячого ожиріння небагато. Тут ми розглянули 125 загальних варіантів з 21 гена, що кодують адипокіни та маркери запалення для асоціації із зайвою вагою/ожирінням, маркерами ожиріння та запаленням у міських дітей Індії.
ДИЗАЙН ДИЗАЙН І МЕТОДИ
У дослідженні брали участь 3168 дітей (у віці 11–17 років), у тому числі 2261 нормальної ваги (група ПН) та 907 дітей із надмірною вагою/ожирінням (група ОВ/ОВ), набрані в ході шкільних обстежень здоров’я з чотирьох різних зон Делі, як описано раніше (4). Суб'єкти класифікувались як нормальна вага та надмірна вага/ожиріння відповідно до вікових та статевих обмежень, наданих Cole et al. (5), в якому наводяться межі ІМТ для надмірної ваги та ожиріння за статтю для дітей у віці від 2 до 18 років, що відповідає точкам відсікання 25 і 30 кг/м 2 для дорослих. Попередній дозвіл шкільних органів, поінформована згода батьків/опікунів та усна згода самих учасників були отримані. Протокол дослідження був схвалений комітетами з етики інститутів-учасників, і дослідження проводилось відповідно до принципів Гельсінської декларації.
Антропометричні вимірювання, включаючи зріст, вагу, окружність талії (WC) та окружність стегон (HC), проводились із застосуванням стандартних методів. Розраховували ІМТ та співвідношення талії та стегна (WHR). Зразки крові відбирали у випробовуваних після нічного голодування. Рівні глюкози в плазмі та високочутливий С-реактивний білок вимірювали за допомогою Cobas Integra 400 Plus (Roche Diagnostic, Мангейм, Німеччина). Рівні інсуліну та С-пептиду оцінювали за допомогою Elecsys 2010 (Roche Diagnostics). Рівні лептину, резистину та адипонектину у плазмі крові вимірювали за допомогою комерційних наборів для імуноферментних аналізів (R&D Systems, Міннеаполіс, Міннесота). Антропометричні та клінічні характеристики суб'єктів наведені в таблиці 1.
Антропометричні та клінічні характеристики досліджуваних
Генотипування.
На стадії 1 ми генотипували 1325 дітей (862 північно-західних та 463 OW/OB дітей) для 125 однонуклеотидних поліморфізмів (SNP) з 21 гена, що кодують адипоцитокіни та запальні маркери (Додаткова таблиця 1), використовуючи аналіз Illumina GoldenGate (Illumina, San Diego, Каліфорнія). SNP були відібрані на основі їх розташування у функціонально важливих регіонах генів, попередніх звітів про асоціацію з метаболічними порушеннями, незначної частоти алелів> 0,05 та тегів SNP. Дані генотипування піддавали розгорнутому контролю якості, який включав оцінку достовірності генотипу> 0,25, коефіцієнт виклику SNP> 0,9, оцінку GenTrans> 0,6, оцінку розділення кластерів> 0,4, рівновага Харді-Вайнберга (P> 0,01 у північно-західному, OW/OB та всіх інших суб'єкти], а частота незначних алелів> 0,05. Контроль якості пройшов SNP (n = 83), частота дзвінків> 98% і коефіцієнт відповідності 99,97% на основі 5% повторень зразків. Наведено частоти генотипів для всіх SNP у додатковій таблиці 1.
На стадії 2 генотипування для реплікації чотирьох локусів (rs2069845 [IL6], rs1137100 [LEPR], rs3801266 [PBEF1] і rs7514452 [IL6R]) було проведено у 1843 дітей (1399 NW та 444 OW/OB дітей) за допомогою iPLEX (Sequenom, Сан-Дейго, Каліфорнія). Середній коефіцієнт успішності генотипування становив 93,5%, із послідовністю> 99,7% у генотипуванні на основі 5% дублікатів.
Статистичний аналіз.
Сукупний ефект асоційованих SNP визначали шляхом аналізу дозування алелів шляхом обчислення ефективних оцінок ризику (ERS), як передбачалося раніше (6). Суб'єкти класифікувались за різними групами за ERS (5–6), і коефіцієнти шансів (OR) розраховувались з урахуванням ERS −4). Варіанти IL6 (rs2069845 [P = 8,7 × 10 −4] та rs2069849 [P = 1,6 × 10 −3]) та несинонімічні варіанти LEPR (rs1137100 [K109R] [P = 1,4 × 10 −3], rs1137101 [Q223R] [P = 2,5 × 10 −3] та rs8179183 [K656N] [P = 2,6 × 10 −3]) були пов’язані з ризиком надмірної ваги/ожиріння. Серед варіантів IL6R було виявлено, що асоційовані rs7514452 та rs10752641 (P = 2,3 × 10 −3 та 0,03, відповідно). Аналіз асоціації шляхом розгляду ІМТ як безперервної ознаки дав подібні результати (додаткова таблиця 1).