Харчові добавки з рисовими висівками, ферментованими Lentinus edodes, збільшують інтерферон-γ
Анотація
Передумови
Метою цього дослідження було дослідити гіпотезу, згідно з якою дієтичні добавки з рисними висівками, ферментованими Еденси Лентина (екзобіополімер рисових висівок, RBEP), речовина, яка, як відомо, містить арабіноксилан, підсилює активність клітин природних кілерів (NK) і модулює вироблення цитокінів у здорових дорослих.
Методи
Це дослідження було розроблене у рандомізованому, подвійному сліпому, плацебо-контрольованому та паралельно-груповому форматі. Вісімдесят здорових учасників з рівнем лейкоцитів 4000-8000 клітин/мкл було випадковим чином призначено приймати шість капсул на день або 3 г RBEP, або 3 г плацебо протягом 8 тижнів. Троє учасників групи плацебо були виключені після ініціювання протоколу; серйозних побічних ефектів від добавок RBEP не повідомлялося. Активність NK-клітин одноядерних клітин периферичної крові вимірювали за допомогою наборів для аналізу нерадіоактивної цитотоксичності, а концентрації цитокінів у сироватці крові включали інтерферон (IFN) -γ, фактор некрозу пухлини (TNF) -α, інтерлейкін (IL) -2, IL-4, IL-10, а IL-12 вимірювали за допомогою набору для аналізу цитокінів Bio-Plex. Це дослідження було зареєстровано в Службі інформації про клінічні дослідження (KCT0000536).
Результати
Добавки RBEP значно збільшили вироблення IFN-γ порівняно з групою плацебо ( = 0,012). Однак добавки RBEP не впливали ні на активність NK-клітин, ні на рівень цитокінів, включаючи IL-2, IL-4, IL-10, IL-12 та TNF-α, порівняно з групою плацебо.
Висновки
Дані, отримані в цьому дослідженні, вказують на те, що добавки RBEP збільшують секрецію IFN-γ, не викликаючи значних несприятливих наслідків, і, отже, можуть бути корисними для здорових людей. Тому цей новий продукт, отриманий з рисових висівок, може бути потенційно корисним для включення у рецептуру твердої та рідкої їжі, призначеної для лікування та профілактики патологічних станів, пов'язаних з дефектом імунної відповіді.
Передумови
Рисові висівки, головний побічний продукт переробки рису, в даний час є недостатньо використаним ресурсом, хоча вони є прекрасним джерелом цінних біоактивних сполук, таких як харчові волокна, вітаміни та антиоксиданти [1]. Серед харчових волокон, що містяться у рисових висівках, арабіноксилан, пектин та β-глюкан є функціональними полісахаридами з властивостями модифікатора біологічної відповіді (BRM) [2]. Наприклад, було показано, що полісахариди з рисових висівок активують імунологічні клітини, які складають частину передньої лінії захисту організму від раку [3, 4]. Однак функціональність імунозміцнюючих BRM у рисових висівках обмежена, оскільки BRM розташовані в клітинній стінці, де вони комплексуються з геміцелюлозою [5].
Розроблено ферментативні процеси, що відокремлюють біологічно активні полісахариди від решти рисових висівок, завдяки чому ці полісахариди можуть бути використані як нові BRM [6, 7]. Рисові висівки, ферментовані Еденси Лентина (екзобіополімер рисових висівок, RBEP) - це харчова добавка, яку отримують взаємодією рисових висівок із вуглеводами, отриманими з грибів Шиітаке [8]. Крім того, було показано, що RBEP пригнічує ріст клітин меланоми шляхом посилення активності клітин природних кілерів (NK) у мишей [2] та активуючи клітини макрофагів як в природних умовах і в пробірці [5, 8]. Також повідомлялося, що різні продукти, отримані з рисових висівок та грибних культур, підвищують активність NK-клітин у пацієнтів з множинною мієломою [9], ракових мишей [10] та лімфоцитів [11, 12]. Зокрема, було показано, що харчові добавки з арабіноксиланом, полісахаридом, отриманим із рисових висівок, підвищують активність NK-клітин у пацієнтів з різними видами раку [13].
Клітини NK відіграють вирішальну роль у протираковій захисті господаря, і, отже, жорстко регулюються за допомогою різноманітних механізмів. Активація NK-клітин для знищення клітин-мішеней може безпосередньо і опосередковано модулюватися цитокінами, включаючи інтерферон (IFN), інтерлейкіни (ILs) та фактор некрозу пухлини (TNF) [14]. Попередні дослідження з продуктами, отриманими з рисових висівок та грибних культур, також продемонстрували підвищену концентрацію IFN-γ та TNF-α у пацієнтів з розсіяною мієломою [9], на додаток до мишей, що несуть карциному Ерліха [10]. Однак клінічних досліджень здорових людей досі не проводилось для вивчення впливу добавок RBEP на активність NK-клітин та концентрацію цитокінів. Отже, це рандомізоване, подвійне сліпе, контрольоване плацебо дослідження паралельних груп було покликане перевірити гіпотезу про те, що добавки RBEP посилюють активацію NK-клітин і модулюють вироблення цитокінів у здорових корейських людей.
Методи
Навчальні матеріали
RBEP та плацебо були приготовані корпорацією Erom (Sungnam, Корея) згідно з методом, про який повідомляли Yu et al. [8]. Коротко, Еденси Лентина був культивований у відповідному середовищі для росту з рисовими висівками, поки не спостерігався значний ріст міцелію. Далі, Еденди Лентина міцелії та нерозчинні компоненти рисових висівок видаляли центрифугуванням. За допомогою екстракції лугу та осадження етанолом полісахариди збирали з отриманих супернатантів, а потім ліофілізували. Уронову кислоту використовували як маркерну сполуку для RBEP. У таблиці 1 наведено хімічний склад RBEP. Плацебо містило 430,69 мг кукурудзяного крохмалю, 69,29 мг харчового барвника та 2,51 мг стеаринової кислоти. Щодня надавали шість капсул або 3 г RBEP, або плацебо.
Вивчати дизайн
Це дослідження було 8-тижневим рандомізованим, подвійним сліпим, плацебо-контрольованим та паралельним груповим клінічним дослідженням. Усі описані тут роботи були схвалені Радою з перегляду установ Університетської лікарні Ханьян (HYUH 2012-05-008). Це дослідження було проведено відповідно до Гельсінської декларації, і письмова інформована згода була отримана від усіх учасників. Це дослідження було зареєстровано в Службі інформації про клінічні дослідження (KCT0000536).
Всього в цьому дослідженні кожен пацієнт пройшов 1 скринінг та 3 візити. На початковому скринінгу учасники опитувались для збору даних соціодемографії, а історію хвороби отримували під час співбесіди та вимірювали кількість його лейкоцитів (WBC). Зріст вимірювали без взуття за допомогою стадіометра, а вага вимірювали, поки учасники носили легкий одяг без взуття, використовуючи Inbody 720 (Biospace Corporation, Сеул, Корея). Візити відбувались у такий час після первинного скринінгу: відвідування 1 (тиждень 0), 7–10 днів після скринінгу; відвідати 2, 4 тижні післякринінга; та відвідайте 3, 8 тижні післякринінг. Під час усіх відвідувань проводили вимірювання результатів та проводили оцінку безпеки. Зразки крові та сечі натще збирали і зберігали при -20 ° C до аналізу. На 4 та 8 тижнях відповідність контролювали шляхом підрахунку кількості капсул, що залишились.
Учасників попросили не приймати жодних оздоровчих продуктів, що містять ферментовані рисові висівки, і не змінювати звичний спосіб життя та харчування під час дослідження. Триденні дієтичні записи використовувались для моніторингу змін у дієтах на 0, 4 та 8 тижнях; ці записи були проаналізовані за допомогою CAN-pro 4.0 (Програма автоматизованого аналізу 4.0 для професіоналів, Корейське товариство харчування, Сеул, Корея).