Механізми ниркового контролю гомеостазу калію при повному дефіциті альдостерону в Америці

Фізіологічні параметри мишей AS +/+ та AS -/-. Відповідь мишей AS +/+ (відкриті бруски) та AS -/- мишей (заповнені бруски) на 48-годинне годування контролем (0,8% K +), 2% K +, 3% K + та 5% K + дієти . Мишей утримують у метаболічних клітках для реєстрації споживання їжі (A), маси тіла (B), споживання води (C), об’єму сечі (D), плазми [K +] (E), плазми [Na +] (F), екскреція K + з сечею (G), екскреція Na + з сечею (H), співвідношення сечі за 24 години [K +]/[креатинін] (I) та сечі [Na +]/[креатинін] (J) із сечею. Зміни споживання їжі та маси тіла реєструються протягом усього 48-годинного періоду годування і виражаються як різниця (Δ) у їжі та масі тіла мишей за останні 48 годин до експерименту. Повідомляється про виведення сечової рідини та іонів за останні 24 години. Концентрацію іонів у крові вимірюють в кінці експерименту з годуванням. n = 5–7 мишей на групу. Значення - це середнє значення ± SEM. * P≤0,05; ** Р≤0,01; *** Р≤0,001.

механізми

Експресія та субклітинний розподіл ROMK у нирках мишей AS +/+ та AS -/-, яких утримували на 2% -ній дієті K + протягом 48 годин. (A) Виявлення повністю і незрілих глікозильованих каналів ROMK (смуги 55 кДа та приблизно 42 кДа відповідно) шляхом імуноблотингу з використанням загальних мембранних фракцій цілих гомогенатів нирок. Мембрана повторно досліджується на β-актин. n = 5 мишей на групу. (B) Виявлення каналів ROMK у DCT та CNT шляхом імунофлуоресценції на кріосекціях нирок. Канальці ідентифікуються шляхом визначення вмісту кальбіндину D28K (не показано), як описано в стислих методах. Брусок, приблизно 25 мкм.

Експресія та субклітинна локалізація субодиниць ENaC у нирках мишей AS +/+ та AS -/-, які утримувались на 2% -ній дієті K + протягом 48 годин. (A) Виявлення субодиниць α-ENaC, β-ENaC та γ-ENaC шляхом імуноблотингу із застосуванням загальних мембранних фракцій цілих гомогенатів нирок. Усі мембрани піддаються зондуванню на β-актин і дані нормалізуються щодо β-актину. Стовпчасті графіки представляють денситометричні дані. n = 5 мишей на групу. Значення - це середнє значення ± SEM. * P≤0,05. (B) Виявлення субодиниць α-ENaC, β-ENaC та γ-ENaC в УНТ та кортикальних CD за допомогою імунофлюоресценції на кріосекціях нирок. Канальці ідентифікуються шляхом визначення вмісту кальбіндину D28K (не показано), як описано в стислих методах. Брусок, приблизно 25 мкм.