Підвищений рівень інтерлейкіну 6 знижується в сироватці та підшкірній жировій тканині ожиріння
Жан-Філіп Бастер, Клод Жардель, Ерік Брукерт, Патрісія Блонді, Жаклін Капо, Мартін Лавіль, Губерт Відаль, Бернард Хайнке, Підвищений рівень інтерлейкіну 6 знижується в сироватці та підшкірній жировій тканині жінок з ожирінням після схуднення, Journal of Clinical Ендокринологія та метаболізм, том 85, випуск 9, 1 вересня 2000 р., Сторінки 3338–3342, https://doi.org/10.1210/jcem.85.9.6839
Анотація
У цьому дослідженні ми мали на меті: 1) порівняти сироваткові концентрації IL-6, TNFα та лептину у здорових худорлявих суб’єктів контролю та у пацієнтів із ожирінням із цукровим діабетом 2 типу та (без інсулінозалежного); і 2) для вимірювання рівнів цих цитокінів як у сироватці, так і в жировій тканині sc у 14 жінок із ожирінням до і після 3 тижнів дуже низькокалорійної дієти (VLCD).
Предмети та методи
Предмети
Дослідження 1. Двадцять дев'ять жінок-добровольців із Кавказу [8 худих недіабетиків (вік, 24–69 років; ІМТ, 18,4–23,2 кг/м 2), 14 недіабетиків із ожирінням (вік, 28–64 роки; ІМТ, 32,9–48,7 кг/м 2) та 7 жінок із цукровим діабетом 2 типу (вік 51–66 років; ІМТ, 29,0–39,6 кг/м 2)] були включені в це дослідження. Діабет 2 типу оцінювали за новими критеріями Американської діабетичної асоціації (17). Окрім ожиріння, усі недиабетні ожиріння мали хороше самопочуття та мали стабільну масу тіла щонайменше 12 місяців. Жоден не брав участі в будь-якій програмі вправ і не був надмірно сидячим. Всі ці суб'єкти брали участь у клінічних дослідженнях (18, 19), які були затверджені етичним комітетом або Лісичного хоспісу, або Assistance Publique-Hôpitaux de Paris, і які проводились відповідно до французького законодавства. Зразки крові брали вранці (між 0800 і 0900 год) після нічного голодування.
Дослідження 2. 14 жінок із ожирінням, які не страждають на цукровий діабет, брали участь у програмі VLCD протягом 21 дня. Споживання енергії було обмежене до 3,9 ± 0,1 МДж (941 ± 27 ккал)/добу з 45% вуглеводів, 20% жиру та 35% білків. Біопсії підшкірної жирової тканини черевної порожнини брали до та після 21 дня VLCD, після нічного голодування, з використанням методу черезшкірної міні-ліпосакції, описаного раніше (20). Дві біопсії були взяті з різних місць, на рівні пупка. Суб'єкти все ще споживали низькокалорійну дієту під час другої біопсії. Зразки жирової тканини негайно заморожували в рідкому азоті і зберігали при -80 ° С до аналізу білка. Усі випробувані дали свою письмову згоду після того, як були проінформовані про характер, мету та можливі ризики дослідження. Експериментальний протокол був схвалений етичним комітетом Assistance Publique-Hôpitaux de Paris і виконувався відповідно до французького законодавства (закон Хуріє).
Аналітичні методи
Зразки венозної крові брали між 0800 і 0900 год, після нічного голодування, до і в кінці дієтичного періоду, і зберігали при -80 С перед аналізом імуноаналізів. Глюкозу в крові визначали ферментативно (гексокіназа) за допомогою багатопараметричного аналізатора (Hitachi 911; Roche Molecular Biochemicals, Meylan, Франція). Концентрацію інсуліну в сироватці крові вимірювали за допомогою комерційних наборів RIA (Bi-Insulin IRMA; ERIA-Pasteur, Париж, Франція). Рівні лептину, TNFα та IL-6 у сироватці крові визначали за допомогою імуноферментного аналізу (Quantikine leptin; Quantikine High Sensitivity TNFα and Quantikine IL-6; R&D Systems, Oxford, UK). Чутливість цих аналізів становила 7,8 пг/мл, 0,18 пг/мл та 0,70 пг/мл для лептину, TNFα та IL-6 відповідно. Ті самі набори імуноферментних аналізів використовували для визначення вмісту імунореактивного лептину, TNFα та IL-6 у зразках жирової тканини після гомогенізації 200 мг замороженої тканини в 400 мкл буфера (pH 7,4), що містить 10 ммоль/Трис-HCl, 250 ммоль/л сахарози та суміш інгібіторів протеази (Complete; Roche Molecular Biochemicals). C-реактивний білок (CRP) оцінювали за допомогою імуно-нефелометрії на нефелометрі Берінга 2 (Dade-Behring, La Défense, Франція). Чутливість аналізу становила 0,18 мг/л. Оцінку інсулінорезистентності в стані натще [індекс інсулінорезистентності натще (FIRI)] розраховували на основі рівня глюкози та інсуліну в плазмі натще (FIRI = глюкоза натще × інсулін натще/25) (21). Аналіз складу тіла за допомогою подвійної рентгенівської абсорбціометрії проводили лише у недиабетних жінок із ожирінням, використовуючи QDR 1000 від Hologic, Inc. (Waltham, MA).
Презентація результатів
Усі результати представлені як середнє значення ± se. Для порівняння значень до та після дієти використовували непараметричний тест рангової суми Уїлкоксона для парних даних. Відмінності між групами визначали за допомогою одностороннього аналізу ANOVA та тесту Крускала-Уолліса, за яким слідував захищений Фішером найменш значущий тест на парні відмінності. Значимість кореляцій досліджували за допомогою непараметричного тесту рангової кореляції Спірмена. Був проведений багаторазовий регресійний аналіз для неперервної змінної IL-6. Поріг значущості був встановлений на рівні Р = 0,05.
Результати
У всіх недіабетичних та діабетичних жінок із ожирінням було характерне ожиріння андроїдів (співвідношення талії та стегон> 0,90 та ІМТ> 30 кг/м 2). Як і очікувалось, у жінок з діабетом 2 типу глікемія натще була вищою. Як вказують значення FIRI, жінки, які не страждають на цукровий діабет та страждають на цукровий діабет, були резистентними до інсуліну, тоді як сухі контролі не були, а пацієнти з діабетом були найбільш стійкими до інсуліну. Рівень цитокінів IL-6, TNFα, лептину та СРБ у сироватці крові був значно вищим у діабетиків та недіабетиків із ожирінням, ніж у здорових худих пацієнтів (табл. 1).
Клінічні та метаболічні характеристики суб'єктів (n = 29)
| Вік (рік) | 42 ± 5 а | 45 ± 4 а | 58 ± 2 |
| ІМТ (кг/м 2) | 20,6 ± 0,6 | 39,5 ± 1,1 b | 36,6 ± 1,0 b |
| Співвідношення талія/стегна | 0,77 ± 0,01 | 0,96 ± 0,02 b | 0,98 ± 0,03 б |
| Глюкоза (ммоль/л) | 5,3 ± 0,2 c | 5,3 ± 0,2 c | 11,1 ± 1,5 |
| Інсулін (пмоль/л) | 42 ± 6 | 84 ± 12 д | 90 ± 18 д |
| FIRI (ммоль × мО × L −2) | 1,39 ± 0,18 | 3,04 ± 0,37 e f | 6,14 ± 1,16 b |
| Лептин (нг/мл) | 9,5 ± 1,7 | 54,9 ± 4,5 б f | 33,0 ± 5,6 д |
| IL-6 (пг/мл) | 0,39 ± 0,06 | 2,78 ± 0,30 б | 3,58 ± 0,51 б |
| TNFα (пг/мл) | 0,74 ± 0,09 | 1,48 ± 0,15 b | 1,08 ± 0,12 |
| СРБ (мг/л) | 1,2 ± 0,3 | 6,3 ± 1,1 д | 5,8 ± 1,1 д |