Розширення судин до фактора росту судинного ендотелію в матковій артерії вагітної щури
Анотація
Епідеміологічні дані свідчать, що дієта матері та склад тіла можуть бути ключовими факторами зв'язку між низькою вагою при народженні та серцево-судинними захворюваннями, гіпертонічною хворобою та інсулінонезалежним діабетом у дорослому житті (1–3). Ці популяційні дослідження суттєво підтримуються дослідженнями на тваринах. У щурів материнська дієта з низьким вмістом білка або загальне недоїдання під час вагітності асоціюється із зниженням маси тіла при народженні та підвищенням артеріального тиску або порушенням толерантності до глюкози у дорослих нащадків (4–9). Механізми, що лежать в основі цього ефекту, не відомі, але їх з’ясування буде важливим для майбутніх заходів у галузі охорони здоров’я, спрямованих на поліпшення харчування жінок репродуктивного віку.
Забезпечення поживними речовинами фетоплацентарної одиниці частково залежить від кровотоку матки. Кровотік матки збільшується під час нормальної вагітності через розширення судин (10) та ремоделювання судин, і було доведено, що він зменшується, коли вагітних щурів годують обмеженою дієтою (11).
VEGF - це специфічний мітоген (12), який сприяє розширенню судин і неоваскуляризації, і він був виявлений у тканинах плода, плаценті, а також у судинах дорослої людини (13, 14). Вазодилатація у відповідь на VEGF опосередковується продукуванням NO і PGI2 через стимуляцію ендотеліальних рецепторів flt-1 та Flk-1/KDR (15). Нещодавно у щурів повідомлялося, що рівень мРНК VEGF збільшується в тканині матки під час вагітності (16). У людей було показано, що концентрація VEGF у плазмі крові матері підвищується під час вагітності (17, 18).
Це дослідження було покликане дослідити гіпотезу, згідно з якою материнська дієта з низьким вмістом білка впливає на кровообіг матки під час вагітності через зміну реакції судинорозширювальних препаратів на VEGF. Також були проведені експерименти, щоб визначити, чи будь-який вплив на відповідь на VEGF залежав від зменшення вироблення NO або PGI2. Попередні дані показали, що індуковане VEGF вивільнення NO зменшується в маткових артеріях групи з низьким вмістом білка (Броулі, Ітох та Клоф, неопубліковане спостереження). Тому в цьому дослідженні ми зосередилися на вивченні ефекту інгібування синтази NO в ізольованих маткових артеріях шляхом видалення простациклінового компонента індукованої VEGF релаксації спочатку за допомогою INDO. Щоб визначити, чи були якісь ефекти обмежені на матковій артерії, реакція брижової артерії на VEGF також вивчалася у тих же тварин.
МЕТОДИ
Тварини та дієтичні протоколи.
Усі експерименти на тваринах проводились відповідно до Закону 1986 року про домашніх офісів Великобританії (про наукові процедури), і це дослідження було схвалено процесом етичного перегляду. Було вивчено двадцять одну незайману самку щурів Вістар (Харлан, Біцестор, Оксон, Великобританія). Щурів випадковим чином розподіляли на контрольні та низькобілкові групи. До вагітності їх годували стандартною лабораторною чау (CRMX, Special Diets Services, Кембридж, Великобританія). Годування синтетичними дієтами розпочали в день зачаття (d 0 гестації), що було підтверджено спостереженням пробок насінної рідини на підлозі шлюбної клітки. Десять щурів у контрольній групі отримували дієту, що містить 18 мас.% Казеїну, а 11 щурів - низькобілкову дієту, що містить 9 мас.% Казеїну. Усі дієти містили 5 г/кг метіоніну (5). Крім того, 0,5 г/кг сульфату магнію було включено для запобігання дефіциту магнію (таблиця 1). Усі щури мали вільний доступ до їжі та води, і їх поселяли індивідуально в клітинах у кімнаті з 12-годинним циклом світло/темрява і підтримували при 22 ° C. Тварин було вбито при вдиханні СО2 d 18 або 19 гестації. Для кожного посліду п’ять цуценят та їх плаценти відбирали навмання і зважували після розтину судин.
Визначення функції судин.
Всі криві доза-відповідь проводили з додаванням зростаючої концентрації з інтервалом у 2 хвилини, і 20 хв дозволялося між вимірами кожної кривої реакції. Всі ліки та хімічні речовини, крім VEGF, були отримані від Sigma Chemical Co. (Пул, Великобританія).
Аналіз даних.
Значення подані як середнє значення ± SEM. Напруження виражали у відсотках від максимального звуження до KPSS, щоб виправити будь-які незначні відмінності в діаметрі посудини. Розслаблення виражалося у відсотках від початкової напруги перед звуженням. Максимальні значення реакцій PE та KCl були розраховані за допомогою нелінійного регресійного аналізу найменших квадратів, а pEC50 (Prism 3.0, Graph Pad Software Inc., Сан-Дієго, Каліфорнія, США), якщо це доречно. Ці значення порівнював Манн-Уітні U тест (SPSS 9.0J, SPSS Inc., Чикаго, Іллінойс, США). Якщо розрахунок pEC50 був невідповідним, криві концентрація-відповідь порівнювали за допомогою двостороннього повторного вимірювання ANOVA (Prism 3.0, Graph Pad Software Inc.). Значення було прийнято на рівні стор
РЕЗУЛЬТАТИ
Дані про тварин
Маса тіла матері на 18 або 19 термін вагітності, швидкість збільшення маси тіла матері під час вагітності та кількість плодів не відрізнялися між групами казеїну від 18% до 9% (табл. 2). Середні показники ваги плода та плаценти від кожного окремого посліду не відрізнялись між двома групами (Таблиця 2).