Симпозиум перинатальної біології AspenSnowmass “Адаптація плода до дисфункції матері та плаценти
Предмети
24–27 серпня 2013 р., Snowmass, Оргкомітет Колорадо: Чарльз Дюсе, доктор філософії (співголова), Університет Лома Лінда Шон Лімесанд, доктор філософії (співголова), Арізонський університет Деніз Хеммінгс, доктор філософії, Університет Альберти Анна Гразул-Більська, доктор філософії, Університет штату Північна Дакота
Конференція перинатальної біології Аспен/Сноумас - це міждисциплінарна наукова зустріч, яка збирає клініцистів та науковців, відомих старших та молодших дослідників та аспірантів, щоб доповісти та обговорити свої висновки в атмосфері, що сприяє відвертому, але дружньому обміну. Загальною метою є розробка ефективних міждисциплінарних наукових взаємодій, що ведуть до продуктивних трансляційних перинатальних наукових досліджень у сферах програмування плодом захворювань дорослих, прееклампсії та ожиріння матері та діабету під час вагітності.
Заява про спонсорство
Видання цього додатку було спонсоровано Медичною школою Університету Ломи Лінди.
Плакат, сесія 1 - Плід, новонароджена дитина
1-1. ХРОНІЧНА ГІПЕРІНСУЛІНЕМІЯ ПРИГУЩАЄ ГЛЮКОЗНО-СТИМУЛОВАНУ ІНСУЛІНСКУЮ СЕКРЕТІЮ (GSIS), АЛЕ НЕ β-КЛІТИННА МАСА, В ПЛОДУ ОВАНУ
S Andrews 1, L Brown 2, S Thorn 2, M Davis 3, S Limesand 3, W Hay Jr. 2 і P Rozance 2
Кафедри 1 ОВ/Гіна та 2 педіатрії, Університет Колорадо, Аврора, Колорадо, США. 3 Школа тварин та порівняльних біомедичних наук, Університет Арізони, Тусон, Арізона, США
Внутрішньоутробне обмеження росту пов’язане зі зменшенням секреції інсуліну плода та маси β-клітин. Інсулін має аутокринні дії, що підсилюють секрецію інсуліну та ріст β-клітин, але це не було продемонстровано у нормально зростаючого плода. Ми перевірили гіпотезу про те, що хронічна фетальна гіперінсулінемія при еуглікемії збільшує GSIS та β-клітинну масу у плода овець. Одноплодні овечі плоди на 125,6 ± 0,5 доби вагітності (термін = 148) внутрішньовенно вводили інсулін (INS, HumulinR, n = 8) для отримання високих фізіологічних концентрацій інсуліну та глюкози для підтримки еуглікемії або сольового розчину (SAL, n = 9) для 6–10 днів. Вимірювали концентрацію рН артерій плоду, вміст кисню, глюкози, інсуліну, кортизолу та норадреналіну. В останній день вимірювали GSIS плода, використовуючи плоскохвильовий фетальний гіперглікемічний затискач. Підшлункову залозу фіксували для гістологічного аналізу. У чотирьох додаткових тварин INS вимірювали GSIS з одночасною фармакологічною адренергічною блокадою та без неї. Концентрації глюкози були подібними (18,21 ± 1,85 INS проти 20,21 ± 1,31 SAL, мг/дл). Вміст кисню був нижчим (2,53 ± 0,25 проти 3,60 ± 0,11 SAL, ммоль/л, p 1, L Brown 1, S Andrews 2, S Thorn 1, W Hay Jr. 1 і P Rozance 1
Кафедра 1 педіатрії та 2 курсів гінекології/гінекології, Університет Колорадо, Аврора, Колорадо, США
Інсулін необхідний для нормального росту плода. Однак хронічна експериментальна гіперінсулінемія плода не збільшує траєкторію росту за межі норми. Механізми, відповідальні за цей парадокс, невідомі. Сигнальний шлях mTOR є центральним для регулювання росту плода, синтезу білка і активується гострою стимуляцією інсуліну; роблячи це шляхом до навчання. Нашою метою було визначити, чи хронічна фетальна гіперінсулінемія активує шлях mTOR в скелетних м'язах овець плода. Плоди овець-одноплодів вводили безперервно внутрішньовенно інсулін та глюкозу для підтримання еуглікемічної гіперінсулінемії (INS n = 7) або фізіологічного розчину (SAL n = 8) протягом 7–9 днів. Вимірювали глюкозу плода, амінокислоти, інсулін, норадреналін, кортизол, IGF-1, рН, лактат, CO2 та O2. Біопсія м’яза задньої кінцівки біцепса стегна була отримана в умовах дослідження на 134 дні (термін 148 днів). Готували м’язові білки, вимірювали загальний і фосфорильований p70S6K, 4E-BP1, рибосомний білок S6 (rpS6) та актин за допомогою вестерн-блот. Концентрація інсуліну була на 150% вищою в групі INS порівняно з SAL (P 1,3, S Louey 1,2,3, PJ Stork 1,4, GD Giraud 1,2,3,5, KL Thornburg 1,2,3
1 Центр досліджень серця, 2 Кафедра фізіології та фармакології, 3 Інститут серцево-судинної системи Найта, 4 Інститут Волума, Орегонський університет охорони здоров’я та науки, Портленд, OR, США, 5 Медичний центр у справах ветеранів Портленду, Портленд, штат Орегон, США
Дозрівання кардіоміоцитів плода передбачає перехід від проліферуючого до термінально диференційованого непроліферуючого стану. Кардіоміоцити плоду овець починають процес дозрівання через 100 днів терміну вагітності (dGA), такий що в термін (145dGA)
60% кардіоміоцитів стають двоядерними. Підвищення рівня гормону щитовидної залози (Т3) в короткостроковій перспективі пригнічує проліферацію та стимулює дозрівання міоцитів, протидіючи стимулюванню проліферації інсуліноподібним фактором росту-1 (IGF-1). Однак ступінь зміни внутрішньоклітинних схем передачі сигналів із дозріванням міоцитів під впливом цих гормонів невідома. Ми припустили, що T3 та IGF-1 можуть активувати позаклітинні регуляторні кінази (ERK) та сигнальні білки AKT аналогічно між 100 і 135dGA. Кардіоміоцити ферментативно виділяли з неінструментованих контрольних фетальних овець (n = 11/вік, овен Ovis; змішана західна порода) при 102 ± 3dGA і 135 ± 1dGA. Проліферація шляхом поглинання BrdU (10 мкМ) проводилась у присутності Т3 (0,37, 1,5 нМ), IGF-1 (1 мкг/мл) та інгібіторів шляху (U0126 10 мкМ, LY294002 10 мкМ, рапаміцину 10 нМ). Вестерн-блот та імуногістохімія використовувались для визначення фосфорилювання ERK, AKT та p70S6K. IGF-1 стимулював проліферацію в обох віках; додавання Т3 пригнічує мітотичну активність майже до базальних рівнів (
50% зниження на 100dGA та
Зменшення на 75% в 135dGA; p 1, JS Haring 1, RP Aitken 2, JS Milne 2, DJ Carr 2,3, AL David 3, JM Wallace 2 і JS Caton 1
1 Центр харчування та вагітності, Департамент наук про тварин, Університет штату Північна Дакота, Фарго; 2 Інститут харчування та здоров’я Роветта, Університет Абердіна, Шотландія, Великобританія; 3 Група пренатальної клітинної та генної терапії, Інститут жіночого здоров’я UCL
1-9. ВІТАМІН D АТЕНТУЄ ТРАВМУ ЛЕГКОГО ТА ПОЛІПШЮЄ ВИЖИВАННЯ У НЕВОРОЖЕНИХ ЩУРІВ ПІСЛЯ АНТЕНАТАЛЬНОГО ВПЛИВУ ЕНДОТОКСИНУ
Е. М. Манделл, Г. Дж. Зеедорф, Дж. Гіен, С. Х. Абман
Педіатричний центр серцевих легенів, Департамент педіатрії, Університет Колорадо, Медичний факультет, Аврора, Колорадо
Хоріоамніоніт сприяє патогенезу БЛД. Вітамін D (Vit D) має імуномодулюючі та протизапальні властивості, але чи може Vit D покращити виживання новонароджених, зберегти ріст судин та альвеол легенів та запобігти пошкодженню ендотелію після впливу антенатального запалення. Це дослідження було розроблене для того, щоб визначити, чи може лікування Vit D покращити виживання та зберегти ріст легенів після антенатального впливу ендотоксину (ETX). Фетальних щурів піддавали впливу ETX (10 мкг), ETX + Vit D (1 нг/мл) або фізіологічного розчину за допомогою інтраамніотичної ін'єкції (IA) і доставляли через два дні. Новонароджені цуценята, що зазнали впливу ІА ETX, отримували щоденні ін’єкції Vit D або фізіологічного розчину протягом 2 тижнів. Для оцінки розвитку легенів оцінювали кількість променевих альвеолярних клітин (RAC) через 14 днів. Ендотеліальні клітини легеневої артерії плода овець (PAEC) оцінювали на предмет росту та формування труб після обробки Vit D (100-400 нМ) або ETX (1 нг/мл) + Vit D. Ріст клітин альвеолярного типу II (AT II), оброблених Vit D (100 нм) або ETX (10 нг/мл) + Vit D оцінювали. Пренатальне лікування Vit D покращило виживання щенят щурів, які зазнали впливу ІА ETX, порівняно з експозицією лише ЕТХ (100% проти 60%; p 1, JS Caton 1, PP Borowicz 1, KA Vonnahme 1, CO Lemley 1 та AJ Conley 2
1 Центр харчування та вагітності, відділ наук про тварин, Університет штату Північна Дакота, Фарго; 2 Відділ охорони здоров'я та розмноження населення Каліфорнійського університету в Девісі