Вплив добавок вітаміну С та Е на окислювальний стрес та токсичність печінки у щурів, яких годували

Су-Юнг Лі

Департамент харчування та харчування Коледжу біо-нано-наук, Університет Ханнам, 461-6 Jeonmin-dong, Yuseong-gu, Daejeon 305-811, Корея.

Шон-Янг Кім

Хесун Мін

Анотація

Вступ

Гострий або хронічний прийом етанолу збільшує активні форми кисню (АФК) у печінці та плазмі, як це було показано в дослідженнях на тваринах та в клінічних дослідженнях [1-3]. Патогенез алкогольного захворювання печінки включає несприятливий вплив метаболітів етанолу та окислювальний стрес [4]. Окислювальний стрес у тканинах відноситься до посиленого утворення АФК та / або виснаження антиоксидантів [5]. Тому ефективні стратегії посилення внутрішньоклітинного та позаклітинного антиоксидантного захисту в тканинах можуть допомогти захистити печінку від травм.

Антиоксиданти необхідні для запобігання клітинному пошкодженню, спричиненому вільними радикалами. Вітаміни E (VE) і C (VC) є природними антиоксидантами, які захищають від окисних пошкоджень вільними радикалами. VE є основним розчинним у ліпідах антиоксидантом у сироватці крові і транспортується як компонент ліпопротеїну. VE ефективно зменшує in vitro та in vivo сприйнятливість до перекисного окислення ліпідів [6,7]. VC, водорозчинний антиоксидант, очищує водні пероксильні радикали до того, як вони пошкоджують ліпіди [8].

Попередні дослідження показали, що алкогольне ураження печінки, спричинене етанолом, пов'язане зі змінами метаболізму метіоніну [21-23]. Хронічний прийом етанолу зменшує концентрацію фолієвої кислоти та печінки S-аденозилметионіну (SAM) [24] та підвищує рівень Hcy та печінкового S-аденозилгомоцистеїну (SAH) у тварин та людей [18,22,23]. Виснаження печінки SAM та зниження співвідношення SAM: SAH внаслідок хронічного впливу етанолу пов'язано з різним ступенем ураження печінки у тварин, таких як жирова печінка, запалення та фіброз [18,21,23].

Метою цього дослідження було вивчити, чи можна нейтралізувати окислювальний стрес та гепатотоксичність, спричинені етанолом, харчовими добавками ВК або ВЕ у щурів. Оскільки дієта з високим вмістом жиру також відіграє важливу роль у окисному стресі та патологічних печінкових змінах, щурів годували рідкою дієтою на 36% етанолу з відносно низьким вмістом жиру (10%) для вивчення печінкової токсичності через токсичність етанолу, а не для дієта з високим вмістом жиру. Мало досліджень вивчали вплив добавок VC або VE на аміотіоли плазми у щурів, хронічно оброблених етанолом. Таким чином, ми вимірювали активність аланін-трансамінази (ALT) та аспартат-трансамінази (AST), щоб оцінити гепатотоксичність та рівні GSH у плазмі, загальний антиоксидантний потенціал, що захоплює радикали (TRAP), кон'юговані дієни, амінотіоли та SAM в печінці для оцінки змін антиоксидантної здатності та окислювальний стрес.

Матеріали і методи

Матеріали

Були придбані L-гомоцистин, три-н-бутилфосфін, DL-метіонін, метміоглобін, 2,2'-азино-біс (3-етилбензотіазолін-6-сульфонова кислота) діамонієва сіль (ABTS), гепарин, циклогексан, SAM та SAH від Sigma (Сент-Луїс, Міссурі, США). Lactobacillus rhamnosus (ATCC 7469) був отриманий з американської колекції типових культур (Манассас, штат Вірджинія, США). Збіднене фолієвою кислотою середовище казеїну було отримано від лабораторії Difco (Детройт, Мічиган, США). 7-фтор-бензо-2-окса-1,3-діазол-4-сульфонат був отриманий від компанії Wako Chemicals (Осака, Японія). Всі хімічні речовини були найвищої чистоти, комерційно доступні.

Тварини та експериментальний протокол

П'ятитижневих самців щурів Вістар вагою 170-180 г отримували від компанії Orient Bio (Соннам, Корея) і спочатку годували чау-дієтою, поки вони не досягли маси тіла 200-220 г. Після 5-денної аклімації тварин випадковим чином розподілили до однієї з чотирьох груп по 8 щурів у кожній: (1) контрольна група (без етанолу); щурів годували рідкою дієтою, яка по суті була такою ж, як дієта, описана Лібером та ДеКарлі [25], за винятком зменшення загального вмісту ліпідів з 39,6 г/л до 10 г/л та додавання декстрин-мальтози для отримання енергії дефіцит. Частка енергії в контрольній рідкій дієті була такою: 76% вуглеводів, 10% жирів і 14% білків. Соєва олія використовувалася як джерело жиру в рідкій дієті. Етанол вводили в раціон поступово протягом 5 днів. (2) група Alc; пропорції енергії в режимах годування щурів, що годували етанолом, були такими: 36% етанолу, 40% вуглеводів, 10% жиру та 14% білка. (3) Група Alc + VC (40 мг VC/100 г маси тіла [ЧМ]): цих тварин годували етаноловою дієтою, що містить 2 г VC/L (4) Група Alc + VE (0,8 мг VE/100 г БВ): цих тварин годували етаноловою дієтою, що містить 40 мг ВЕ/л.