EClinpath холестерину

Холестерин - найпоширеніший стероїд в організмі. Це важливий попередник ефірів холестерину, жовчних кислот та стероїдних гормонів. Він отримується з дієтичних джерел і синтезується in vivo з ацетил-КоА в печінці (основне місце) та інших тканинах (кишечник, наднирники та репродуктивні органи). Вимірювання холестерину може вказувати на печінкову функцію, шлунково-кишкові захворювання та порушення обміну речовин.

eclinpath

Фізіологія

Холестерин зустрічається в крові у складі всіх ліпопротеїдів, але фракції ліпопротеїдів низької щільності (ЛПНЩ) і ліпопротеїдів високої щільності (ЛПВЩ) мають найвищі концентрації. ЛНП утворюються з ліпопротеїдів дуже низької щільності (ЛПНЩ) за допомогою ендотеліальної ліпопротеїнової ліпази. Вони відповідають за транспортування холестерину до периферичних тканин шляхом зв’язування з рецепторами ЛПНЩ у цих тканинах, наприклад наднирники, яєчник і яєчка. ЛПВЩ синтезуються в печінці та шлунково-кишковому тракті і транспортують холестерин з тканин до печінки (так званий “зворотний” транспорт холестерину, який, як вважають, мінімальний у собак через відсутність деяких ферментів трансферази). Потрапляючи в печінку, холестерин може вбудовуватися в ЛПНЩ, синтезуватися в жовчні кислоти, етерифікуватися до довголанцюгових жирних кислот або виводитися з жовчю. Жовч - основний шлях виведення холестерину.

Зауважте, що видима ліпемія у зразку крові, як правило, зумовлена ​​підвищенням рівня тригліцеридів, а не підвищенням рівня холестерину.

Методологія

Для кількісної оцінки концентрації холестерину в крові використовуються різноманітні автоматизовані ферментативні аналізи. Більшість аналізів, що застосовуються для визначення концентрації холестерину, є колориметричними, тоді як інші використовують зондуючі електроди O2 для кількісного визначення рівня холестерину. Метод холестерину CHOD-PAP відповідає стандартам для вимірювання концентрації холестерину в сироватці або плазмі крові, встановлених Національним інститутом охорони здоров'я (NIH), і є методом, що використовується в Корнельському університеті.

Тип реакції

Процедура, що використовується в Корнельському університеті

  • Метод холестерину CHOD-PAP: На першому етапі цієї триступеневої реакції фермент холестерину естераза гідролізує ефіри холестерину з утворенням вільних жирних кислот та холестерину. На наступному етапі холестериноксидаза каталізує окислення холестерину до холест-4-ен-3-он. Під каталітичною дією пероксидази пероксид водню, утворений у попередній реакції, окислює хромофор 4-амінофеназон у присутності фенолу до сполуки червоного барвника 4- (п-бензохінон-моноїміно) -феназон. Зміна інтенсивності кольору при 500-550 нм вимірюється фотометрично і прямо пропорційна концентрації холестерину в зразку.