Гальмуючий вплив японських рослинних препаратів Шо-сайко-то і Джузен-тайхо-то на безалкогольний

Афілійований відділ патології Медичної школи університету Тейкьо, Токіо, Японія

Йошіхіса Такахасі,
Юрі Соєдзіма,
Аріса Кумагай,
Масато Ватанабе,
Хіросі Уодзакі,
Тошіо Фукусато

Цифри

Анотація

Цитування: Takahashi Y, Soejima Y, Kumagai A, Watanabe M, Uozaki H, Fukusato T (2014) Інгібуючий вплив японських рослинних препаратів Sho-saiko-to та Juzen-taiho-to на неалкогольний стеатогепатит у мишей. PLoS ONE 9 (1): e87279. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0087279

Редактор: Калпана Гошаль, Університет штату Огайо, Сполучені Штати Америки

Отримано: 23 липня 2013 р .; Прийнято: 19 грудня 2013 р .; Опубліковано: 22 січня 2014 року

Фінансування: Ця робота була підтримана Японським товариством сприяння науці (JSPS) для надання грантів на наукові дослідження Номер гранту 23790753 (URL: http://www.jsps.go.jp/j-grantsinaid/). Фінансист не брав участі у розробці досліджень, зборі та аналізі даних, прийнятті рішення про публікацію чи підготовці рукопису.

Конкуруючі інтереси: Автори заявили, що не існує конкуруючих інтересів.

Вступ

Безалкогольна жирова хвороба печінки (НАЖХП) - це стан, при якому надлишковий жир накопичується в печінці пацієнта, який в анамнезі не зловживав алкоголем. НАЖХП класифікується на 2 категорії: простий стеатоз, при якому спостерігається лише стеатоз, та неалкогольний стеатогепатит (НАСГ), у яких, крім стеатозу, спостерігається часточне запалення та пошкодження клітин печінки. NASH є прогресуючим захворюванням і може перерости в цироз печінки або гепатоцелюлярну карциному [1], [2]. NAFLD/NASH, який розглядається як печінковий прояв метаболічного синдрому [3], [4], зростає у всьому світі разом із збільшенням поширеності ожиріння, і в той же час є найпоширенішим хронічним захворюванням печінки.

Гіпотези про два удари [5] чи багаторазові дії [6], як правило, відстоюються як механізми, що лежать в основі патогенезу НАЖХП/НАСГ. Вважається, що накопичення жиру в печінці необхідне для виникнення НАЖХП, і подальші хіти, такі як окислювальний стрес, збільшення запальних цитокінів або зменшення протизапальних цитокінів, необхідні для розвитку прогресуючої хвороби NASH. Моделі на тваринах корисні для з'ясування патогенезу та для розробки нових методів лікування НАСГ. Хоча було запропоновано кілька генетичних та харчових моделей тварин НАЖХП/НАСГ, ці моделі не відтворюють повний спектр характеристик НАФЛД/НАСГ людини [7]. Тому комбінація 2 або більше факторів іноді застосовується як модель комбінації.

Втрата ваги шляхом зміни способу життя є основним методом лікування НАЖХП. Однак слід розробити медикаментозну терапію НАЖХП, оскільки пацієнтам із ожирінням часто важко підтримувати здоровий спосіб життя. Японські рослинні ліки (JHM) (ліки Кампо) широко використовуються в Японії, і понад 80% японських лікарів регулярно призначають ці ліки [8]. Оскільки вважається, що JHM мають антиоксидантну та протизапальну дію [9] - [11], вони можуть бути ефективними при лікуванні NASH. Однак на сьогоднішній день лише 2 дослідження вивчали вплив JHM на НАЖХП (тобто 1 базове дослідження на шо-сайко-то (TJ-9), кейші-букурьо-ган (TJ-25) та орен-гедоку- до (TJ-15) [12] та 1 ретроспективне клінічне дослідження на TJ-25 [13]). Однак патолого-молекулярний аналіз тканин печінки не завершений.

У цьому дослідженні для вивчення впливу 4 JHM [TJ-9, inchin-ko-to (TJ-135), juzen-taiho-to (TJ-48) і TJ-25] на NASH ми використали комбінована модель, в якій db/db мишей годували дієтою з дефіцитом метіоніну та холіну (MCD). Крім того, для визначення механізму, що лежить в основі дії JHM, ми дослідили рівні експресії різних генів цитокінів та рецепторів, а також рівні маркера окисного стресу в печінці. Ми спостерігали, що TJ-9 та TJ-48 інгібують ураження печінки на тваринній моделі, хоча механізми не були до кінця з’ясовані.

Матеріали і методи

Заява про етику

Це дослідження було проведено у суворій відповідності з рекомендаціями Керівництва з догляду та використання лабораторних тварин Національних інститутів охорони здоров’я. Протокол був схвалений Комітетом з етики Університету Тейкьо (11-015). Усі тварини отримували гуманний догляд, і всі зусилля докладались до мінімізації страждань.

Препарати

TJ-9, TJ-135, TJ-48 та TJ-25 були люб'язно подаровані Tsumura & Co. (Токіо, Японія). Ці ліки містять сирі екстракти трав. Склад кожного лікарського засобу узагальнено у таблиці 1. Тривимірна високоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ) профілі цих лікарських засобів також були надані компанією Tsumura & Co. як додаткові дані продуктів.

Тварини та експериментальні протоколи

Тридцять шість 8-тижневих самців мишей BKS.Cg + Lepr db/+ Lepr db/J (db/db) були придбані у Charles River Laboratories Japan, Inc. (Йокогама, Японія). Після 1 тижня пристосування до навколишнього середовища мишей розділили на 6 груп (n = 6 для кожної групи): контрольні, MCD, TJ-9, TJ-135, TJ-48 та TJ-25. Мишей у контрольній групі годували контрольною дієтою (дієта CRF-1) (Oriental Yeast Co., Токіо, Японія) за бажанням. Мишей у групі MCD годували MCD дієтою (F2MCD) (Oriental Yeast Co.) за бажанням. Мишей у групах TJ-9, TJ-135, TJ-48 та TJ-25 годували дієтою MCD з додаванням 1,5% (мас./Мас.) TJ-9, TJ-135, TJ-48 та TJ- 25 відповідно ad libitum. Кожен JHM містив лише невелику кількість метіоніну та холіну, а вміст метіоніну та холіну в раціоні кожної групи JHM становив лише близько 1% порівняно з вмістом контрольної групи [14] - [16]. Таким чином, малоймовірно, що метіонін та холін, що містяться в кожному JHM, мали значний вплив на результати цього дослідження. Дієти зберігали в холодильнику при 4 ° C; контейнери з кормами для мишей поповнювали свіжою дієтою 3 рази на тиждень і реєстрували споживання їжі. Мишей утримували в Центрі лабораторних тварин Медичної школи університету Тейкьо при 25 ° C і вологості 45%.