Лікування тамоксифеном викликає ранню печінкову резистентність до інсуліну SpringerLink
Вступ
Тамоксифен широко використовується як ефективне допоміжне лікування та профілактика естроген-позитивного раку молочної залози [1]. Тамоксифен зменшує споживання їжі, масу тіла та (принаймні короткочасно) жирової маси у гризунів. Незважаючи на зниження маси тіла у жінок із ожирінням, тамоксифен може збільшити частоту діабету [2]. Цей потенційний побічний ефект пояснюється зменшенням β-виживання та проліферація клітин, а також стеатоз печінки у гризунів [3]. Ми та інші нещодавно продемонстрували, що тамоксифен впливає на глюкозу, метаболізм ліпідів, тимчасові зміни складу тіла, які можуть відбуватися внаслідок індукованого тамоксифеном некрозу жирової тканини з подальшим набором адипоцитів de novo та перерозподілом жиру, включаючи накопичення жиру в печінці в довгостроковій перспективі [3, 4]. Дійсно, розвиток жирової печінки спостерігався вже через 3 місяці після початку лікування тамоксифеном у жінок з раком молочної залози [5]. Однак точні механізми потенційних діабетогенних ефектів тамоксифену досі не зовсім зрозумілі. Тому ми прагнули систематично з’ясувати розвиток пов’язаної з тамоксифеном гіперглікемії за допомогою гіперінсулінемічно-еуглікемічних затискачів.
Методи
Експерименти на тваринах
Усі дослідження на тваринах були схвалені місцевою владою землі Саксонія, Німеччина, за рекомендацією відповідальної місцевої комісії з розгляду етики тварин (Landesdirektion Leipzig, TVV21/12, T03/13, Німеччина). Дванадцятитижнева самка мишей C57BL/6NTac ( = 8) були розміщені у 12-годинному циклі світло/темно з водою та їжею (стандартна чау, Sniff Spezialdiäten, Соест, Німеччина) за бажанням. Тварин розводили і утримували в лабораторіях тварин при Лейпцизькому університеті. Тамоксифен (Tam, Sigma-Aldrich, Тауфкірхен, Німеччина, № T5648) розчиняли в тригліцеридному маслі (Fagron, Barsbüttel, Німеччина, №770282) і вводили внутрішньочеревно по 1 мг на день протягом п’яти днів поспіль. Елементи контролю вводили лише з розчинником. Після 24 днів лікування Там катетери імплантували в ліву яремну вену. Гіперінсулінемічно-евглікемічні затискачі проводили у чотирьох самок мишей кожної експериментальної групи, як описано [3]. Коротше кажучи, гіперінсулінемічно-евглікемічний затискач проводився безперервною інфузією людського інсуліну зі швидкістю 20 мО/кг/хв для зниження рівня глюкози в плазмі у фізіологічному діапазоні (
5 ммоль/л). Концентрацію глюкози в крові підтримували, регулюючи швидкість інфузії 20% розчину глюкози. Стабільний стан визначали як постійний рівень глюкози протягом 20 хв при стабільній швидкості інфузії глюкози (ГІР), яка досягалася протягом 120–240 хв. Стабільний стан підтримували протягом 45 хв, а зразки крові (10 мкл) відбирали на початковому рівні, кожні 5 хв і кожні 10 хв під час стійкого стану. Всі інфузії застосовували за допомогою мікродіалізних насосів (TSE Systems, Честерфілд, Міссурі, США). Вироблення печінкової глюкози (HPG, мг × кг -1 × хв -1) розраховували як різницю між швидкістю появи глюкози та швидкістю інфузії глюкози. Відразу після затискача мишей вбивали при вивиху шийки матки і печінку, підшкірний (SC), епігонадальний (EPI) та міжлопатковий коричневий жир витягували та зважували.
Перед проведенням затискачів значення глюкози в крові визначали за зразками цільної венозної крові за допомогою автоматизованого аналізатора (COBAS 8000, Roche Diagnostics, Мангейм, Німеччина). Концентрації інсуліну в сироватці крові вимірювали методом ІФА, використовуючи мишачі стандарти відповідно до рекомендацій виробника (Insulin ELISA; CrystalChem. Inc, Downers Grove, IL). У другій підмножині тварин ( = 6 на групу лікування), сироваткові концентрації тригліцеридів (TG), вільних жирних кислот (FFA), загального холестерину (Chol) та аспартатамінотрансферази (AST) аналізували за допомогою модульного аналізатора COBAS 8000 (Roche Diagnostics, Мангейм, Німеччина).