Перманганат калію - огляд тем ScienceDirect
Перманганат калію призводить до вилучення цитоплазматичних компонентів, що є однією з причин того, чому мембрани виглядають так чітко (Bradbury and Meek, 1960).
Пов’язані терміни:
- Амоній
- Меткатінон
- Марганець
- Токсична травма
- Білок
- Амілоїд
- Окислювач
- Токсичність
- Мієлома
Завантажити у форматі PDF
Про цю сторінку
Електронна мікроскопія модельних систем
Хеліо Роке, Клод Антоні, у Методах у клітинній біології, 2010
4 Постфіксація
Перманганат калію (Luft, 1956) широко застосовувався як постфіксатор у дослідженнях S. pombe. Він зберігає ліпідний мембранний шар, який, як видається, сильно контрастує на електронних мікрофотографіях. Перманганат калію призводить до вилучення цитоплазматичних компонентів, що є однією з причин того, чому мембрани виглядають так чітко (Bradbury and Meek, 1960). Перманганат калію зазвичай використовують у дріжджах, що діляться, у концентраціях 1–3% у водному розчині. OsO4, інший поширений постфіксатор, здебільшого використовується як мембранний стабілізатор (Hayat, 1981). Він швидко перехресно реагує з ліпідами та, певною мірою, з білками (Griffiths, 1993; Wright, 2000). Зазвичай OsO4 використовується у водному розчині або в какодилатному буфері в концентраціях від 0,01% до 2,5%.
Центрифугують клітини при 6000 об/хв протягом 5 хв і відкидають супернатант. Промити 4-5 разів, ресуспендуючи в 10 мл води і знову центрифугувати. Обережно видаліть супернатант, щоб уникнути втрати клітинної гранули. Під час центрифугування приготуйте постфіксаційний розчин: 2% перманганату калію у водному розчині (10 мл на зразок).
Після останнього промивання видаліть супернатант і разом із залишковою водою перенесіть осад клітини в скляну трубку з круглим дном. Додайте 2 мл 2% перманганату калію і залиште при кімнатній температурі на 5 хв.
Гранулюйте клітини при 6000 об/хв, 5 хв.
Замініть розчин 6 мл 2% перманганату калію та інкубуйте протягом 45–60 хв при кімнатній температурі.
Гранулюйте клітини і видаліть закріплювач. Ретельно мийте, наповнивши пробірку дистильованою водою і видаливши воду. Акуратно перемістіть гранулу лабораторною зубочисткою і дайте їй осісти, перш ніж витягувати воду. Повторюйте, поки не буде видно фіолетового кольору.
Знезараження води
Перманганат калію
Перманганат калію є сильним окислювачем з деякими дезінфікуючими властивостями. Він широко застосовувався до гіпохлоритів як дезінфікуючий засіб для питної води. У деяких частинах світу вона все ще використовується в невеликих масштабах для цієї мети, а також для миття фруктів та овочів. Найчастіше використовується як 1-5% розчин для дезінфекції і часто продається у вигляді пакетів по 1 г для додавання в 1 л води. При таких концентраціях розчини мають насичений рожевий або фіолетовий колір і можуть забарвлювати поверхні. Хоча бактеріальну інактивацію можна досягти за помірних концентрацій та часу контакту, її не можна рекомендувати для польового використання, оскільки кількісні дані відсутні для вірусів чи кіст найпростіших.
Окислення
3.8.4.2.3 Неоднорідні окислення перманганату
Перманганат калію, адсорбований або на діоксиді кремнію, або на оксиді алюмінію, також може бути використаний для розщеплення подвійних зв'язків у м'яких умовах та при хороших урожаях. В одній процедурі алкен, розчинений у бензолі, пропускають через колонку, упаковану KMnO4, на підкладці з силікагелем. 162 Реакція відбувається швидко при кімнатній температурі і однаково ефективно для розщеплення всіх типів подвійних зв'язків, навіть тих, які інертні до інших традиційних методів. 162
Таблиця 10. Фазовий перенос допоміжних окислень перманганату.
| KMnO4, Aliquat 336, бензол/H2O/крижана оцтова кислота | 80 | 155 |
| KMnO4 (s), дициклогексано-18-коронка-6, бензол | 86 | 157 |
| KMnO4, алікват 336, бензол/H2O/AcOH | 83 | 155 |
| KMnO4, адоген 464, CH2Cl2/H2SO4/AcOH/H2O | 81 | 154 |
| KMnO4, алікват 336, бензол/H2O/AcOH | 90 | 155 |
| KMnO4, адоген 464, CH2Cl2/H2SO4/AcOH/H2O | 84 | 154 |
| KMnO4, адоген 464, CH2Cl2/H2SO4/AcOH/H2O | 88 | 158 |
| KMnO4, 18-коронка-6 | 102 | |
| KMnO4, адоген 464, CH2Cl2/H2SO4/AcOH/H2O | > 70 | 159 |
| KMnO4, адоген 464, CH2Cl2/H2SO4/AcOH/H2O | 96 | 154 |
| KMnO4, коронний ефір, бензол | 97 | 160 |
| KMnO4, коронний ефір, бензол | ∼100 | 160 |
| KMnO4, MeO (CH2CH2O) nMe/CH2Cl2/AcOH/H2O | 82 | 161 |
| KMnO4, коронний ефір, бензол | 90 | 160 |
Також було встановлено, що не потрібно упаковувати окислювач у колонку. 163 Алкен, розчинений у дихлорметані, можна розщепити, додавши його в колбу, що містить KMnO4 та силікагель, змішані механічно. Після струшування або перемішування суміші протягом відповідного часу продукт можна виділити фільтруванням та випаровуванням розчинника. Глинозем також можна використовувати однаково добре, як і тверду опору. 163 Додаткові приклади наведені в таблиці 11 .
ДНК та аспекти молекулярної біології
7.04.4.2 Перманганат калію
Перманганат калію (KMnO 4) також націлений на подвійний зв’язок тиміну 5,6, утворюючи діол тиміну (Рівняння (4)
), хоча інші бази також можуть бути змінені. 159 Оскільки взаємодії укладання основ, наявні в B-ДНК, заважають доступності головного мішеня, KMnO4 є зондом для непарних тимінів 160,161 та інші змінені структури ДНК. 38 162 163 164 Наприклад, цей реагент був використаний для демонстрації утворення одноланцюгової ДНК в межах комплексу μ ДНК – білок під час транспонування μ, 165 існування ліворуких структур, прилеглих до області генетичного контролю, 166 і прийняття незвичної структури теломерною структурою в умовах надгелічного стресу та низького рН. 167 Гіперреактивність KMnO4 щодо пуринів в одній ланцюжку триланцюгової ДНК, утвореної білком RecA, також дозволила з'ясувати структуру нового триланцюгового проміжного продукту, що утворюється під час гомологічної рекомбінації. 168 KMnO4 також використовувався для кількісної оцінки Z-ДНК in vivo 39 і як реакція Т для послідовності Максама – Гілберта. 169