Ремоделювання спіральної артерії та інвазія трофобластів при гестозі та обмеженні росту плода

Від Інституту медичної генетики Медичного коледжу, ветеринарії та наук про життя Медичного факультету Університету Глазго, Глазго, Великобританія (F.L.); та Група з репродуктивної та судинної біології, Інститут клітинної медицини, Медична школа, Університет Ньюкасла, Ньюкасл-апон-Тайн, Великобританія (J.N.B., S.R.).

Ви переглядаєте останню версію цієї статті. Попередні версії:

Анотація

Прееклампсія, що визначається гіпертонією та протеїнурією, вражає від 3% до 7% вагітностей, є основним фактором, що сприяє захворюваності та смертності матерів та плодів2, і щорічно спричиняє 50 000 смертей у всьому світі. 3 Хоча прееклампсія часто асоціюється з обмеженням росту плода (FGR), FGR може виникати за відсутності материнських особливостей. Матері та діти вагітності, ускладненої прееклампсією, довгостроково збільшують ризик серцево-судинних захворювань та передчасної смерті. 4,5 Походження прееклампсії не зрозуміле, але тісно пов'язане з відмовою або частковою недостатністю ремоделювання спіральної артерії. 1 Спочатку вважалося специфічним для судин міометрія, також повідомлялося про 6 неоптимальних способів ремоделювання в децидуальних судинах. 7,8 Немодифіковані/частково модифіковані судини можуть подавати високі або періодичні імпульси потоку тиску, і тому пошкодження плаценти виникає в результаті гідростатичного стресу або внаслідок зміни подачі кисню. 9,10

Запропоновано 3-стадійну модель прееклампсії. 11 Перша стадія включає часткову недостатність імунної толерантності матері до антигенів, вираженої за допомогою батьківського ЕВТ. Це призводить до зменшення інвазії клітин ЕВТ плода та зменшення ремоделювання спіральних маткових артерій (стадія 2) і, врешті-решт, дисфункціональної матково-плацентарної циркуляції з окислювальним стресом та генерації факторів, що виділяються в материнський кровообіг (стадія 3).

Класичні гістологічні дослідження на плацентарному руслі при прееклампсії були отримані на основі спостережень на парафінових зрізах; інтерпретації були обмежені через відсутність антитіл для виявлення конкретних типів та структур клітин. Труднощі з отриманням біоптатів плацентарного ложа перешкоджали подальшим дослідженням. У цьому дослідженні ми використовували імуногістохімічні методи, застосовані до заморожених зрізів плацентарного русла, щоб виявити нові уявлення про невдалі фізіологічні зміни прееклампсії та ФГР, і вперше ми пов’язуємо ці зміни з клінічними параметрами матері та плоду.

Матеріали і методи

Предмети

Таблиця. Клінічні подробиці пацієнтів, набраних для відбору плацентарного ложа

Імуногістохімія

Серійні зрізи кожної біопсії (що містять один і той же посудину) були імуно забарвлені за допомогою техніки авідин-біотин-пероксидаза (комплект Vectastain Elite; Vector Laboratories, Великобританія) для цитокератину для ідентифікації EVT, для десміну для ідентифікації судинних та міометріальних м’язів та для von Фактор Віллебранда або CD31 (молекула адгезії клітин ендотеліальних клітин тромбоцитів) для ідентифікації ендотелію. Кожне моноклональне антитіло було оптимізовано перед використанням: LP34 цитокератини 5, 6, 18 (Novocastra, Великобританія) 1: 200; десмін (NCL-DES-DE-R-11) 1: 100 (Новокастра); та коефіцієнт фон Віллебранда (Дако, Великобританія) 1: 800 (детальніше див. Додаток до даних лише в Інтернеті). Імунозабарвлені зрізи цитокератину додатково фарбували методом періодичної кислоти – Шиффа для виявлення фібриноїду; після розвитку реакції DAB (3,3-діамінобензидину) зрізи інкубували протягом 5 хвилин в 1% періодичній кислоті (Sigma), промивали і накладали протягом 10 хвилин на реагент Шиффа (Sigma). Після подальшого промивання зрізи фарбували гематоксиліном Майєра протягом 30 секунд. Всього було використано 6 предметних стекол, включаючи пляму гематоксиліну та еозину.

Аналіз структурних змін у плацентарному руслі

Структурні зміни біоптатів плацентарного русла оцінювали на основі системи, описаної раніше. 18,19 секцій було забито двома спостерігачами (F.L. та J.N.B.), засліплених за особистістю секцій. Згода щодо оцінки всіх гістологічних ознак між двома спостерігачами була дуже високою (98%). Приклади оцінювання гістологічних категорій наведені в розділі Результати та в наших попередніх публікаціях. 20,21 Зрізи, що містять децидуальні або міометріальні судини, аналізували окремо.

Фігура 1. Приклади різних методів фарбування, що використовуються для ідентифікації клітин та клітинних структур у біоптатах плацентарного ложа. A, Судина міометрія прееклампсії, імунологічно забарвлена на десмін (оцінка = повністю збережена). Зірочка позначає міометрій. , Прееклампсія повністю зберегла посудину міометрія, імуно забарвлену на цитокератин (інтерстиціальний екстравілозний трофобласт [EVT] бал = 1 [вищий]; ендоваскулярний бал EVT = 2 [відсутній]). C., Прееклампсія повністю зберегла посудину міометрія, імуно забарвлену на цитокератин (інтерстиціальний бал EVT = 2 [норма]; периваскулярний бал EVT [позначений стрілкою] = 2 [норма]]). D, Нормальна вагітність, децидуальна судина, імуно забарвлена на десмін (показник середовища = повністю зруйнований; ендоваскулярний показник EVT = 1 [присутній, позначений стрілкою]). Е, Нормальна вагітність, децидуальна посудина, імуно забарвлена на фактор VIII, а паралельна секція, імунофарбована на цитокератин (F). Ендоваскулярний показник EVT = 1. Стрілка вказує на ендоваскулярну пробку EVT. G, Нормальна вагітність, децидуальна судина, імуно забарвлена десміном (показник середовища = дезорганізований, фібриноїдний бал

Зрушення ЗМІ

Малюнок 2 показує ступінь руйнування середовища у всіх спіральних артеріях. У нормальній групі 86% децидуальних судин мали відсутні/сильно дезорганізовані середовища, а у 14% - дезорганізовані. У прееклампсії 53% децидуальних судин виявляли відсутні/сильно дезорганізовані середовища, 23% - дезорганізацію, 12% - поділ, тоді як середовище зберігалося у 11%. У ФГР 75% суден широкого загалу мали відсутні/сильно дезорганізовані засоби масової інформації та 25% були дезорганізовані. При нормальній вагітності 88% судин міометрія мали відсутні/сильно дезорганізовані середовища, а 12% мали медіальне відділення. На противагу цьому, при прееклампсії лише 5% судин міометрія мали відсутні/сильно дезорганізовані середовища, 22% - дезорганізовані та 32% відокремлені середовища, тоді як у 41% середовища були повністю збереженими. У FGR 25% судин міометрія відсутні/сильно дезорганізовані, 33% дезорганізовані, 34% відокремлені та 8% збережених середовищ. У обох прееклампсіях менше було порушення медіа у спіральних артеріях міометрія (= 0,0001; АБО, 0,14; 95% ДІ, 0,05–0,33) та FGR (= 0,0001; АБО, 0,13; 95% ДІ, 0,05–0,32) порівняно з контролем. Не було різниці між прееклампсією та FGR (= 0,93; АБО, 0,9; 95% ДІ, 0,85–9,6).