Різниця у складі жирних кислот ізокалорійних дієт з високим вмістом жиру змінює метаболічну гнучкість у

Філіологія людини та тварин, Університет Вагенінгена, Вагенінген, Нідерланди

Афіліація фізіології людини та тварин, Університет Вагенінгена, Вагенінген, Нідерланди

Афілійований відділ біології жирових тканин Інституту фізіології Академії наук Чеської Республіки v.v.i., Прага, Чеська Республіка

Афіліація фізіології людини та тварин, Університет Вагенінгена, Вагенінген, Нідерланди

Лоес П. М. Дуйвенворд,
Еверт М. ван Шоорст,
Ганс М. Свортс,
Ондрей Куда,
Естер Стінберг,
Сандер Термеулен,
Ян Копецький,
Яап Кейер

Цифри

Анотація

Цитування: Duivenvoorde LPM, van Schothorst EM, Swarts HM, Kuda O, Steenbergh E, Termeulen S, et al. (2015) Різниця у складі жирних кислот ізокалорійних високожирних дієт змінює метаболічну гнучкість у самців мишей C57BL/6JOlaHsd. PLoS ONE 10 (6): e0128515. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0128515

Редактор: Марія Алемані, біологічний факультет, ІСПАНІЯ

Отримано: 10 листопада 2014 р .; Прийнято: 29 квітня 2015 р .; Опубліковано: 22 червня 2015 року

Наявність даних: Усі відповідні дані знаходяться в газеті та в допоміжних файлах.

Фінансування: Ця робота була підтримана Сьомою рамковою програмою Європейського Союзу FP7 2007-2013 згідно з грантовою угодою №. 244995 (проект BIOCLAIMS). Фінансисти не мали жодної ролі у розробці досліджень, зборі та аналізі даних, прийнятті рішення про публікацію чи підготовці рукопису.

Конкуруючі інтереси: Автори заявили, що не існує конкуруючих інтересів.

Вступ

Перша дієта (HFpu дієта) - це стандартизована ВЧ дієта, яка використовувалась у кількох попередніх дослідженнях [9, 26–28] і в основному містить жирні жири. Друга дієта (HFs дієта) ідентична дієті HFpu, за винятком жирової фракції, яка в основному містить насичені жирні кислоти з пальмової олії. Пальмова олія є домінуючою складовою частиною жиру у більшості експериментальних ВГ-дієт на гризунах і дедалі більше переважає в продуктах харчування людини. Хоча дієта HFpu містить набагато більше ПНЖК, співвідношення n-6 ФА до n-3 ФА залишалося однаковим між обома дієтами.

Гнучкість метаболізму вимірювали за допомогою одного інвазивного та двох неінвазивних тестів. Пероральний тест на толерантність до глюкози (OGTT) - це інвазивний тест, який контролює гомеостатичний кліренс глюкози у крові у відповідь на глюкозу. За двома неінвазивними проблемами спостерігали за допомогою непрямої калориметрії замість забору крові. Непрямі випробування на основі калориметрії підходять для оцінки гнучкості метаболізму, оскільки непряма калориметрія безпосередньо відображає ступінь та час переходу субстрату. Для цього дослідження ми використовували непряму калориметрію для моніторингу реакції на харчові проблеми, проблеми голодування та повторного годування, а також на екологічні проблеми, м’яке зниження доступності кисню (OxR: [O2] = 12% проти. 21% при нормоксії). Використання їжі як виклик буде спрямовано на ширший спектр процесів, ніж під час ОГТТ, і, отже, забезпечує більш широке відображення метаболічної чутливості. OxR змушує використовувати метаболічні шляхи, які полегшують адаптацію до зниженої доступності кисню і, отже, безпосередньо націлені на гнучкість. Вага тіла, ожиріння, стан печінки та жирової тканини, а також рівень циркулюючого гормону та адипокіну також контролювали протягом експерименту для оцінки стану метаболічного стану здоров’я.

Матеріали і методи

Тварини та експериментальні маніпуляції

Вміст макроелементів у ВЧ дієті відповідав вмісту макроелементів у ВВП дієті, яка є стандартизованою дієтою з високим вмістом жиру, яку ми також використовували в попередніх дослідженнях [26]. Дієти відрізняються лише кількістю та типом дієтичної олії, яка була додана для отримання двох ізокалорійних дієт з 40% енергії з жиру. Профіль жирних кислот використовуваних дієтичних масел був отриманий з Національної бази даних поживних речовин USDA для стандартних посилань [32].

Гістологія ВАТ та печінки та щільність мітохондрій

Мітохондріальну щільність в eWAT визначали як показник стану WAT. Співвідношення мітохондріальної ДНК до ядерної ДНК вимірювали за допомогою кількісної ПЛР у реальному часі (RT-qPCR), як було опубліковано [36], та з модифікаціями, як описано [10]. Коротко кажучи, загальну ДНК екстрагували з гомогенізованого eWAT шляхом розщеплення протеїназою К (Sigma-Aldrich, Сент-Луїс, США) у буфері для лізису (50 мМ Tris-HCL, рН 7,5, 0,5% (мас./Об.) SDS та 12,5 мМ EDTA, рН 8,0) та РНКази А (Sigma-Aldrich). Потім зразки центрифугували, після чого водну фазу змішували і екстрагували фенол-хлороформом-ізоамілалкоголем і двічі хлороформом. ДНК осаджували 96% (об./Об.) Етанолом та ацетатом натрію (3М, рН 5,2), промивали холодним 70% (об./Об.) Етанолом, сушили на повітрі та повторно суспендували в 10 мкл води без ДНКази РНКази. Якість і кількість ДНК у кожному зразку аналізували за допомогою Nanodrop (IsoGen Life Science, Маарссен, Нідерланди), і кожен зразок розбавляли до однакової концентрації ДНК 100 нг мкл -1 .