Розробка фотозшиваючих реагентів для взаємодії протеїнкінази та субстрату - ScienceDirect

Додати до Менділі

Анотація

Визначення відповідних партнерів протеїнкінази – білковий субстрат залишається серйозною проблемою в масштабах усього геному. Описано конструкцію та синтез фотоактивованого нуклеотидного реагенту для зшивання протеїнкіназ з їх субстратами, в яких азидогрупа додана до γ-фосфорильних та пуринових фрагментів АТФ. За відсутності УФ сполуки цього класу діють як конкурентні інгібітори проти АТФ та неконкурентні інгібітори проти пептидного субстрату для білкової тирозинкінази Csk, що припускає, що вони можуть утворювати потрійний комплекс з кіназою та білковим субстратом. Експерименти in vitro з протеїнкіназами вказують, що біфункціональний реагент може викликати ковалентне зшивання білок-білок, яке залежить від УФ-опромінення. Про те, що відбувається значне зшивання кіназа-субстрат, свідчить той факт, що це зшивання конкурує через АТФ. Зшиті аддукти можуть бути легко розщеплені фосфодіестеразою, яка підтримує модель зшивання та забезпечує простий метод деконволюції зв'язаних білкових партнерів.

---