Розробка нової моделі ожиріння, спричиненого дієтою (DIO), використовуючи худих щурів Wistar
Йоріко Кімура
Лабораторія розведення тварин, TAKEDA RABICS, LTD., 2-17-85 Jusohonmachi, Yodogawa-ku, Osaka 532-8686, Японія
Ацусі Ямада
Лабораторія розведення тварин, TAKEDA RABICS, LTD., 2-17-85 Jusohonmachi, Yodogawa-ku, Osaka 532-8686, Японія
Йоко Такабаясі
Лабораторія розведення тварин, TAKEDA RABICS, LTD., 2-17-85 Jusohonmachi, Yodogawa-ku, Osaka 532-8686, Японія
Цунехіко Цубота
Лабораторія розведення тварин, TAKEDA RABICS, LTD., 2-17-85 Jusohonmachi, Yodogawa-ku, Osaka 532-8686, Японія
Ісао Касуга
Лабораторія розведення тварин, TAKEDA RABICS, LTD., 2-17-85 Jusohonmachi, Yodogawa-ku, Osaka 532-8686, Японія
Анотація
Вступ
Ожиріння стає все більш серйозною соціально-економічною проблемою охорони здоров'я не лише серед розвинених країн, а й серед країн, що зростають. З використанням генетично ожирених гризунів було проведено численні дослідження проблем здоров'я, спричинених ожирінням, таких як діабет, гіперліпідемія та гіпертонія [4, 8]. Окрім генетичних факторів, для розвитку ожиріння людини важливі також фактори навколишнього середовища [3, 13]. Зокрема, надмірне харчування протягом внутрішньоутробного та/або дитячого періодів впливає на обмінні процеси у дорослому віці [1, 3, 9]. Отже, ожиріння, спричинене дієтою (DIO), є хорошою моделлю ожиріння людини через надмірне споживання калорій, особливо у внутрішньоутробний та дитячий періоди.
Однією з двох цілей цього дослідження було встановлення нової моделі DIO з використанням нежирних (+/+ або +/−) щурів Wistar, годуючи дам дарами з високим вмістом жиру протягом останнього терміну вагітності та періоду лактації. Іншою метою було вивчити ефект харчування після відлучення від їжі незалежно від харчування матері, годуючи нащадками або дієту з високим вмістом жиру, або лабораторну дієту чау до 21-тижневого віку. В результаті були вироблені унікальні моделі DIO з різним ступенем ожиріння.
Матеріали і методи
Тварини та продукти харчування
Дизайн годівлі. CE-2: лабораторна дієта чау, D12451: дієта з високим вмістом жиру.
Дизайн годівлі
Вагітних щурів годували дієтою CE-2 ad libitum до 16 днів після виявлення вагінальної пробки, а потім розділили на 4 групи: Групи A і B годували CE-2 дієтою, а групи C і D - дієтою D12451 до відлучення у віці 4 тижнів (рис. 1). Під час відлучення середня маса тіла щенят однаково відповідала між групами A і B, а також групами C і D. Потім групи A і C годували дієтою CE-2, тоді як групи B і D годували дієтою D12451 до 21 року. тижневого віку (рис. 1).
Клінічні тести
Вагу тіла вимірювали щотижня до 21-тижневого віку. Пероральний тест на толерантність до глюкози (OGTT) проводили на тваринах, які голодували протягом ночі (19 год), вводячи перорально глюкозу (20% розчин глюкози, 1 г/5 мл/кг маси тіла). Приріст базових рівнів глюкози в плазмі крові при ОГТТ розраховували як загальну площу = (a + 2b + 3c + 2d) × 1/4 (мг/дл ∙ год), де a являє собою базальні рівні до навантаження глюкози та b, c, d - рівні через 30, 60 та 120 хв після навантаження глюкозою відповідно. Вимірювали рівень глюкози в крові за допомогою приладу ACCU-CHEK ® Aviva (Roche Diagnostics K.K., Токіо, Японія).
У віці 21 тижня зразки крові відбирали з хвостової вени в умовах годування та вимірювали наступні біохімічні параметри в плазмі. Глікогемоглобін (GHb) вимірювали за допомогою автоматизованого аналізатора HLC-723GHbG8 (Tosoh Corporation, Ямагучі, Японія), тоді як глюкоза в плазмі, загальний холестерин (TC), ліпопротеїни високої щільності (HDL) -холестерин (HDL-C), тригліцериди (TG) ), а неестерифіковані жирні кислоти (NEFA) вимірювали за допомогою автоматичного аналізатора 7600 (Hitachi High-Technologies Corporation, Токіо, Японія). Холестерин, що не є ЛПВЩ, розраховували шляхом віднімання ХС ЛПВЩ з ТС.
У віці 21 тижня щурів забивали під наркозом із ізофлураном. Потім зважували жирові тканини з 5 анатомічних положень (брижової, надниркової, периепідидимальної, підшкірної та коричневої жирових тканин).
Статистичні методи
Кожна цифра була показана як середнє значення ± SD. Статистичну значущість відмінностей між 4 групами аналізували за допомогою параметричного багаторазового порівняння з тестом Тукі, а значимість відмінностей виражали, як P Рисунок 2 показує криві зростання після відлучення віком від 4 до 21 тижнів у 4 групах. У віці 4 тижнів вага тіла щенят у групах C та D, у яких дам отримував дієту з високим вмістом жиру (D12451), була значно важчою, приблизно на 20 г, ніж у групах A і B, в яких дамб годували лабораторним раціоном (CE-2) (табл. 1). Швидкість росту була майже рівною між групами C і D, а також між групами A і B, до 9-тижневого віку (рис. 2). Після цього темпи зростання залежали від дієти в кожній групі. Темп росту поступово сповільнювався в групі С, але залишався швидким у групі В. У віці 21 тижня порядок груп за масою тіла становив D> B = C> A (Таблиця 1).