Вплив вибору середовища та піногасника на виробництво та якість моноклональних антитіл з використанням високого рівня
Сай Рашміка Велугула-Йеллела
1 Управління з контролю за продуктами та ліками США, Центр оцінки та досліджень лікарських засобів, Управління якості продукції, Управління біотехнологічних продуктів, Відділ огляду та досліджень біотехнологій II, Срібне джерело, доктор медичних наук,
Абаша Вільямс
1 Управління з контролю за продуктами та ліками США, Центр оцінки та досліджень лікарських засобів, Управління якості продукції, Управління біотехнологічних продуктів, Відділ огляду та досліджень біотехнологій II, Срібне джерело, доктор медичних наук,
3 Поточна адреса: VPPL/VRC/NIAID/NIH, Гейтерсбург, доктор медичних наук,
Микола Трунфіо
1 Управління з контролю за продуктами та ліками США, Центр оцінки та досліджень лікарських засобів, Управління якості продукції, Управління біотехнологічних продуктів, Відділ огляду та досліджень біотехнологій II, Срібне джерело, доктор медичних наук,
2 кафедра хімічного машинобудування, Університет штату Массачусетс, Лоуелл, Массачусетс,
Chih ‐ Jung Hsu
1 Управління з контролю за продуктами та ліками США, Центр оцінки та досліджень лікарських засобів, Управління якості продукції, Управління біотехнологічних продуктів, Відділ огляду та досліджень біотехнологій II, Срібне джерело, доктор медичних наук,
Бретань Чавес
1 Управління з контролю за продуктами та ліками США, Центр оцінки та досліджень лікарських засобів, Управління якості продукції, Управління біотехнологічних продуктів, Відділ огляду та досліджень біотехнологій II, Срібне джерело, доктор медичних наук,
Сонгкю Юн
2 кафедра хімічного машинобудування, Університет штату Массачусетс, Лоуелл, Массачусетс,
Кір Агарабі
1 Управління з контролю за продуктами та ліками США, Центр оцінки та досліджень лікарських засобів, Управління якості продукції, Управління біотехнологічних продуктів, Відділ огляду та досліджень біотехнологій II, Срібне джерело, доктор медичних наук,
Пов’язані дані
Анотація
Вступ
Моноклональні антитіла (mAb) є важливим класом лікарських препаратів, отриманих з біотехнологій, із затвердженими показаннями до лікування, починаючи від аутоімунних захворювань, ускладнень після трансплантації, артриту та лікування різних видів раку.1 Майже 70% усіх процесів виробництва рекомбінантних білків використовують клітини яєчників китайського хом'яка (CHO) через їх здатність виробляти білки зі схожими посттрансляційними модифікаціями до вродженого людського білка, легко адаптуються до середовищ, що не містять сироватки крові, і продемонстрували надійність як безпечні господарі2.
Через витрати та складності, пов’язані з комерційним виробництвом mAbs, існує великий попит на ефективну та економічну доставку стабільно високоякісної лікарської речовини. Хоча комерційний вихід моноклональних антитіл може регулярно давати від 5 до 6 г/л, клітинами CHO можна генетично маніпулювати для подальшого підвищення продуктивності.3 Збільшення вироблення білка пояснюється оптимізацією біопроцесу за рахунок розвитку середовища, умов культури клітин та посилені стратегії годування. Склад середовища є одним з найважливіших факторів у виробництві mAb, оскільки збалансований запас мікроелементів, таких як вітаміни, амінокислоти та мікроелементи, необхідні для підтримки правильного росту клітин та отримання високоякісного білка. 4, 5, 6
Крім того, важливим фактором, який може вплинути на процес біореактора, є вибір хімічних протипінних агентів або “піногасників”. Надмірне піноутворення може призвести до пошкодження білків внаслідок розриву бульбашок, втрати контролю над стерильністю системи від виходу піни та пов'язаного з тиском пошкодження обладнання внаслідок блокування вихідних фільтрів. частинки, олія або суміш цих компонентів.7 Гідрофобні тверді частинки можуть руйнувати піну через механізм зневоднення мосту, при якому гідрофобність частинки спричиняє перфорації на поверхнях піни, що призводить до її розриву. 10 Піноутворювачі на масляній основі аналогічним чином порушують піни через механізм зневоднення мосту, а також механізм розтягування мостів, при якому масло утворює містки в пінопластовій ламелі, що розтягується і призводить до розриву піни.