Зміни в споживанні жиру з раціоном змінюють рівні плазми окисленого ліпопротеїну низької щільності та

Від кафедри внутрішньої медицини та біоцентру Оулу (M.-L.S., M.R., Y.A.K., S.H.), Університет Оулу, Оулу, Фінляндія; Національний інститут охорони здоров’я (G.A., A.A.), Mannerheimintie, Гельсінкі, Фінляндія; і кафедра медицини (J.L.W.) Каліфорнійського університету Сан-Дієго, Ла-Холла, Каліфорнія.

Ви переглядаєте останню версію цієї статті. Попередні версії:

Анотація

Завдання— Оцінити вплив дієтичних модифікацій на окислений ліпопротеїн низької щільності (ЛПНЩ).

Існує значний інтерес до фармакологічних засобів та антиоксидантів, які зменшують окислення ЛПНЩ in vitro 7–9 та зменшують атеросклероз на моделях тварин in vivo. 10 Дані про людей, в першу чергу про вітамін Е, невтішні, хоча причини цього нещодавно обговорювались. 11 Інтерес також був зосереджений на нефармакологічних засобах та антиоксидантах, таких як натуральні продукти харчування, та їх здатності впливати на окислення ЛПНЩ. 12,13 Дані про вплив цілісних дієт з високим споживанням фруктів та овочів на окислення ЛПНЩ обмежені та суперечливі. 14–16

У цьому дослідженні ми досліджували, як зміни в дієтичному споживанні жиру, овочів, ягід та фруктів впливали на рівень антиоксидантів та OxLDL у плазмі крові. Ми провели перехресне дієтичне втручання з двома дієтами, обидві з низьким вмістом жиру, але одна з овочами, а інша - з овочами, ягодами та фруктами, щоб з’ясувати, чи впливає велике споживання природних антиоксидантів на рівень плазми крові. OxLDL.

Методи

Предмети

Ми опитали та обстежили 86 жінок, серед яких було відібрано 37 здорових добровольців та завершено дослідження. Критеріями включення були: (1) індекс маси тіла (ІМТ) від 20 до 29 кг/м 2; (2) глюкоза в крові від 3,7 до 6,2 ммоль/л; (3) холестерин в плазмі

Фігура 1. Дизайн дослідження.

Дієти

Плазмові ліпіди та ліпопротеїни (а)

Загальну концентрацію триацилгліцерину та холестерину в плазмі крові визначали ферментативно за допомогою специфічного аналізатора клінічної хімії (набори Boehringer Mannheim, GmbH, Німеччина). Опадання плазми гепарину та марганцю хлоридом використовувалось для вимірювання холестерину ліпопротеїнів високої щільності (ЛПВЩ). 18 Концентрацію холестерину ЛПНЩ розраховували за формулою Фрідевальда. 19 Концентрації Lp (a) у плазмі крові визначали комерційним імуноферментним методом (Biopool Ltd) відповідно до інструкцій виробника.

Аутоантитіла до окисленого ЛПНЩ

Рівні аутоантитіл IgM та IgG, що зв’язуються з OxLDL міді (CuOx-LDL), визначали у зразках плазми методом ІФА на основі хемілюмінесценції. 20 CuOx-LDL генерували, як описано. 3 антигени додавали при 10 мкг/мл у PBS-EDTA (PBS з 0,27 ммоль/л EDTA, рН 7,5) та інкубували протягом ночі при 4 ° C. Зразки плазми розводили 1: 1000 для IgM і 1: 500 для IgG, і кількість зв’язаного імуноглобуліну визначали за допомогою лужної фосфатази, міченої козячим IgM проти людини (Sigma) або козячого IgG проти людини (Sigma), використовуючи Lumi-Phos 530 (Lumigen) як субстрат. Люмінесценцію визначали за допомогою люмінометра Віктора 2 (Wallac, PerkinElmer).

Чутлива CRP

Для вимірювання чутливої СРБ використовували два різних моноклональних антитіла до людської CRP миші (HyTest Ltd) та очищений CRP людини (HyTest Ltd). Коротко кажучи, антитіла до людського CRP покривали 2 мкг/мл у буфері PBS протягом ночі при 4 ° C. Зразки плазми розводили у співвідношенні 1: 2000, і кількість зв’язаного СРБ визначали за допомогою біотинільованих антитіл до СРБ людини. Комерційний контрольний зразок CRP (Roche) включався до кожного аналізу.

Окислений ЛПНЩ

Для вимірювання окисленого в плазмі ЛПНЩ використовували сендвіч-хемілюмінесцентний імуноаналіз із використанням добре охарактеризованого мишачого моноклонального антитіла EO6, яке специфічно зв'язується з окисленими фосфоліпідами. 20,21 Спочатку моноклональне анти-аполіпопротеїнове В-100 антитіло, MB47, висівали при 5 мкг/мл протягом ночі при 4 ° С. Зразки плазми розбавляли до 1:50 і вимірювали кількість окислених фосфоліпідних епітопів за допомогою біотинільованих антитіл EO6. В паралельних лунках кількість зв’язаного ЛПНЩ визначали за допомогою поліклональних біотинільованих анти-апоВ антитіл. Результати виражаються як кількість зв’язаного EO6, поділене на кількість зв’язаного в лунки анти-apoB, отримуючи відносну кількість окисленого фосфоліпіду, виявленого EO6/apoB-100 (OxLDL-EO6). Це вимірювання нормалізує вміст окисленого фосфоліпіду в частині apoB-100.