Білок 4, що зв’язує ретинол, при цукровому діабеті ожиріння людини
Анотація
ДИЗАЙН ДИЗАЙН І МЕТОДИ
Клінічне дослідження.
Організаційна комісія з огляду затвердила всі дослідження (поперечні перерізи, втрата ваги, мікродіаліз та адіпогенез in vitro), і всі суб’єкти дали попередню письмову інформовану згоду. З раніше описаної (10) популяції кавказьких жінок у менопаузі, ми порівнювали худих жінок із надмірною вагою та жінок із ожирінням у менопаузі в поперечному дослідженні. У дослідженні щодо схуднення 30 кавказьких жінок у менопаузі розпочали дієтичний протокол зниження ваги і їм порадили зменшити споживання енергії на 600 ккал/день, як описано раніше (11). Сімнадцять жінок досягли мети зниження ваги на 5% через 13 тижнів і були включені в аналіз експресії генів жирової тканини та RBP4 у сироватці крові. В обох дослідженнях жоден учасник не страждав на цукровий діабет, не мав захворювань нирок або печінки, застійної серцевої недостатності або ішемічної хвороби серця. Замісна гормональна терапія була припинена за 4 тижні до, а всі інші ліки - за 1 тиждень до досліджень. Учасники не змінювали свою масу тіла на> 1 кг за 3 місяці до початку дослідження. Антропометричні вимірювання та зразки крові були отримані о 9:00 ранку після нічного голодування. Підшкірну жирову клітковину періумбіліка отримували за допомогою голкової біопсії, як описано раніше (10,11).
Дослідження мікродіалізу.
Дослідження адіпогенезу in vitro.
Підшкірну жирову клітковину молочної залози отримували у здорових жінок (ІМТ 25–30 кг/м 2, у віці 35–58 років) за допомогою операції зменшення грудей для виділення жирових клітин людини. Стромаскулярні клітини та зрілі адипоцити виділяли шляхом перетравлення колагенази та культивували протягом ночі в сироватці, що містить середовище, як описано раніше (13). Загальну РНК виділяли із парних зразків стромаваскулярних клітин та зрілих адипоцитів від кожного донора через 1 додаткову добу культивування у безсироваткових умовах для порівняння експресії гена RBP4. Адипогенез у стромаскулярних клітинах був викликаний коктейлем інсуліну, ізобутилметилксантину, кортизолу та трийодтироніну, як описано раніше (13). Секрецію RBP4 у культуральному середовищі порівнювали між стромаваскулярними клітинами та диференційованими адипоцитами на 12 день після індукції адипогенезу.