Дієтичні добавки арахідонової кислоти збільшують вміст арахідонової кислоти в лапі, але це робить
Анотація
Передумови
Арахідонова кислота (ARA) - незамінна жирна кислота та головна складова біомембран. Він перетворюється в різні ліпідні медіатори, такі як простагландин Е2 (PGE2), який бере участь у розвитку ревматоїдного артриту (РА). Однак вплив дієтичної АРА на РА незрозумілий. Нашою метою було з'ясувати вплив дієтичної АРА на експериментальну модель артриту щурів.
Методи
Легких щурів годували трьома змістами дієти ARA (0,07%, 0,15% або 0,32% ARA у дієті (мас.)), Дієти докозагексаєнової кислоти (DHA) (0,32% DHA) або контрольної дієти. Через 4 тижні артрит викликався ін’єкцією повного ад’юванта Фрейнда в задню натоптиш. Ми спостерігали розвиток артриту ще протягом 4 тижнів та оцінювали ступінь тяжкості артриту, вміст жирних кислот та ліпідного медіатора в лапі та експресію генів, пов’язаних з утворенням ліпідного медіатора та запальними цитокінами. Також оцінювалось лікування індометацином.
Результати
Вміст ARA у фосфоліпідах у лапі значно підвищувався при дієтичному ARA залежно від дози. Дієтична ARA, а також DHA не впливали на тяжкість артриту (набряк лапи, оцінка артриту та ерозія кісток). Вміст PGE2 в лапі збільшувався внаслідок індукції артриту, але не змінювався дієтичним ARA. Дієтична ARA не впливала на вміст інших ліпідних медіаторів та експресію генів циклооксигенази (ЦОГ) -1, ЦОГ-2, ліпоксгеназ та запальних цитокінів. Індометацин пригнічував тяжкість артриту та вміст PGE2 в лапі.
Висновок
Ці результати свідчать про те, що дієтична ARA збільшує вміст ARA в лапі, але не впливає на тяжкість артриту та вміст PGE2 в лапі на моделі артриту щурів.
Вступ
Поліненасичені жирні кислоти (ПНЖК), такі як арахідонова кислота (ARA) та докозагексаєнова кислота (DHA), є природними поживними речовинами, присутніми в звичайних продуктах харчування (наприклад, яєчному жовтку, м'ясі та риб'ячому жирі) і є фізіологічно важливими складовими біомембран. ARA є жирною кислотою n-6 і перетворюється з лінолевої кислоти (LA) in vivo. ARA також виступає субстратом для різних медіаторів ліпідів, таких як простагландини (PG), лейкотрієни, ліпоксини (LX), ендоканабіноїди та епоксиеікозатетраноати [1–3]. Недавні дослідження продемонстрували, що здатність перетворення з LA в ARA знижується зі старінням [4], а дієтичні добавки ARA покращують когнітивну реакцію [5, 6] та серцево-судинну функцію [7, 8] у людей похилого віку та вікових щурів.
З'ясовано, що дієтична ARA впливає на вміст ARA у фосфоліпідах у людей та тварин [9–14]. Дослідження ex vivo з використанням клітин, приготованих від тварин, у яких маніпулювали споживанням жирних кислот, показало, що різні дієти впливали на вироблення ПГ та лейкотрієнів [15–18]. Ми повідомляли, що добавки ARA у здорових японських людей похилого віку підвищували ARA плазми, але не збільшували похідні ARA ліпідні медіатори або клінічні параметри, включаючи параметри запалення, такі як С-реактивний білок, інтерлейкін-6 (IL-6) та фактор некрозу пухлини - α (TNF-α) [12]. Нещодавно ми вивчали вплив дієтичної ARA на гостре запалення і повідомляли, що дієтична ARA збільшує вміст ARA та LXA4 в товстій кишці, але не впливає на тяжкість запалення або вміст PGE2 на моделі мишачого коліту [14].
Ревматоїдний артрит (РА) є одним з основних аутоімунних захворювань і пов’язаний із хронічним запаленням суглобів та кісток. Біологічні протиревматичні препарати, що модифікують захворювання, часто рекомендуються для терапії РА, що вказує на те, що запальні цитокіни є важливими молекулами в патології РА [19–21]. Нестероїдні протизапальні препарати (НПЗЗ) та інгібітори циклооксигенази (ЦОГ) вже не є препаратами першої лінії для РА, але до появи біологічної терапії ці засоби широко використовувались для РА, оскільки ліпідні медіатори, що виробляються з АРА за допомогою ЦОГ, такі як PGE2, беруть участь у розвитку РА [22, 23]. Отже, метаболізм ARA все ще важливий при лікуванні РА, але вплив дієтичного ARA на хронічне запалення, таке як РА, до кінця не вивчений.
У цьому дослідженні, щоб з’ясувати вплив дієтичної АРА на хронічне запалення та статус PGE2, ми оцінили ефекти АРА у різних дозах на тяжкість моделі ад'ювантного артриту (АІА) у щурів та визначили вміст АРА і ліпідні медіатори, отримані з ARA, і експресія генів, що відносяться до цих ліпідних медіаторів та запальних цитокінів.
Матеріали і методи
Тварини, дієти та експериментальний дизайн
Експерименти були схвалені Комітетом з догляду за тваринами та використання Suntory Holdings Ltd. (Осака, Японія), і ми дотримувались Рекомендацій з догляду за тваринами та використання Suntory Holdings Ltd. Сімдесят 4-тижневих самців щурів Lew було отримано з річки Чарльз Японія (Йокогама, Японія). Щурів утримували в стандартних умовах і мали вільний доступ до води та дієти.
Індукція та оцінка AIA
Експериментальна процедура для моделі артриту, викликаного ад’ювантом щурів, у цьому дослідженні.
Аналіз жирних кислот
Ліпіди у дієтах, лапах та плазмі витягували та очищали методом Folch et al. [26]. Ліпіди в лапі та плазмі поділяли на фосфоліпіди (PL) та інші ліпідні фракції методом тонкошарової хроматографії з використанням силікагелю 60 (Merck, Дармштадт, Німеччина). Система розчинників складалася з гексану/діетилового ефіру (7/3, об./Об.). Залишки жирних кислот в екстрагованих ліпідах або відокремлених фосфоліпідах аналізували методом Sakuradani et al. [27]. Коротко кажучи, кожну ліпідну фракцію інкубували з внутрішнім стандартом (пентадекановою кислотою) у метанольній HCl при 50 ° C протягом 3 год, щоб трансметилювати залишки жирних кислот у метилові ефіри жирних кислот, які екстрагували -гексану та аналізують за допомогою капілярної газорідинної хроматографії.