DPPX-асоційований енцефаліт
Пов’язані дані
Анотація
Завдання:
Повідомлення про основний синдром асоційованого з антитілами до дипептидил-пептидаза-білка 6 (DPPX) енцефаліту, підкласу імуноглобуліну G (IgG) та впливу антитіл на калієві канали DPPX/Kv4.2.
Методи:
Проведено ретроспективний аналіз нових пацієнтів та випадків, про які повідомлялося з 2013 року. Підклас IgG та вплив антитіл на культивовані нейрони визначали за описаними методиками.
Результати:
Було виявлено дев’ять нових пацієнтів (середній вік 57 років, діапазон 36–69 років). У всіх розвинулася важка продромальна втрата ваги або діарея, що супроводжується когнітивною дисфункцією (9), дефіцитом пам’яті (5), підвищеною збудливістю ЦНС (8; гіперекплексія, міоклонія, тремор або судоми) або дисфункцією стовбура мозку або мозочка (7). Пік захворювання досягався через 8 місяців (діапазон 1–54 місяці) після початку. Всі пацієнти мали антитіла як до IgG4, так і до IgG1 DPPX. У культивованих нейронах антитіла спричиняли зменшення кластерів DPPX та білка Kv4.2, що було оборотним при видаленні антитіл. Беручи до уваги нинішні серії та раніше зареєстровані випадки (всього 39), 67% розвинули тріаду: втрата ваги (медіана 20 кг; діапазон 8–53 кг)/шлунково-кишкові симптоми, когнітивно-психічна дисфункція та підвищена збудливість ЦНС. Результат був отриманий від 35 пацієнтів (8 з яких не отримували імунотерапію): 60% мали суттєве або помірне покращення, 23% не мали покращення (більшість з них не отримували лікування), а 17% померли. Рецидиви траплялись у 8 із 35 пацієнтів (23%) та сприймали імунотерапію.
Висновки:
Антитіла DPPX - це переважно IgG1 та IgG4 і асоціюються з когнітивно-психічним дефіцитом та симптомами гіперзбудливості ЦНС, яким зазвичай передує діарея, інші шлунково-кишкові симптоми та втрата ваги. Порушення реагує на імунотерапію, і це підтверджується оборотністю ефектів антитіл у культивованих нейронах.
Тут ми повідомляємо про 9 додаткових пацієнтів та розглядаємо всі раніше повідомлені випадки, щоб визначити, чи можна клінічно розпізнати анти-DPPX-синдром та розпізнати з PERM. Крім того, ми визначили основний підклас імуноглобуліну G (IgG), вплив антитіл на кластери нейрональних клітин DPPX та рівні білків каналів Kv4.2, а також чи є оборотний ефект антитіл оборотним.
МЕТОДИ
Стандартні схвалення протоколів, реєстрації та згоди пацієнтів.
Дослідження було схвалено інституційною комісією з огляду лікарняної клініки (Барселона, Іспанія). Усі пацієнти дали письмову інформовану згоду на використання сироватки, ліквору та клінічну інформацію для дослідницьких цілей.
Пацієнти та серологічне тестування.
У дослідження були включені пацієнти, досліджені в лабораторії клінічної та експериментальної нейроімунології (лікарняна клініка, Університет Барселони) та Університеті Пенсільванії (Філадельфія), чиї сироватка крові та лікворна жилка були визнані позитивними на антитіла DPPX. Період дослідження включає всіх нових пацієнтів, виявлених після первинного звіту 2013 року до 30 травня 2016 р. За цей час було вивчено 9 798 пацієнтів на наявність енцефаліту та різноманітних розладів ЦНС, які, як підозрюється, були аутоімунними, у тому числі серед інших 121 пацієнт із розлади спектра синдрому людини. 5 Критеріями присутності антитіл DPPX були імунофарбування тканин головного мозку, подібне до того, що повідомлялося для людських антитіл DPPX 1, та аналіз на клітинній основі з клітинами 293 ембріональної нирки людини, трансфікованими DPPX, як повідомлялося. 1 Наявність інших антитіл визначали за допомогою аналізу на основі власних клітин, специфічного для рецептора NMDA (NMDAR), 6 α-аміно-3-гідрокси-5-метил-4-ізоксазолпропіонового рецептора (AMPAR), 7 рецептора GABAA, 8 GABAB рецептор, 9 LGI1, 10 CASPR2, 10 рецептор гліцину, 5 mGluR1, 11 mGluR5, 11 IgLON5, 12 і неурексин-3α. 13
Клінічну інформацію отримували у авторів або лікарів, що направляли людей, за допомогою структурованої письмової анкети. Неврологічну інвалідність вимірювали за модифікованою шкалою Ренкіна (mRS), а ефект лікування оцінювали за шкалою mRS. 14
Культури нейронів, вплив антитіл на DPPX та Kv4.2 та конфокальна мікроскопія.
Детальна інформація про методи, що використовуються для визначення способу дії антитіл на культивовані нейрони, наведена у додатку е-1 на Neurology.org. Коротко кажучи, антитіла IgG пацієнтів (включаючи IgG1 та IgG4) очищали із сироватки з колонками білка A/G сефарози. Нейрони гіпокампа готували з ізольованих гіпокампів щурів ембріонів Е18, а культивовані нейрони обробляли очищеним пацієнтом або контрольним IgG (кінцева концентрація 50 мкг/мл середовища) протягом 3 днів для оцінки впливу антитіл на кластери DPPX клітинної поверхні та концентрації Kv4 .2 канали. В паралельних експериментах нейрони, оброблені подібним чином, промивали і давали можливість відновитись із використанням середовища без антитіл DPPX протягом 4 або 7 днів. Зміни поверхневих DPPX та Kv4.2 кількісно аналізували за допомогою конфокальної мікроскопії та імуноблоту біотинільованих поверхневих білків відповідно.
Огляд раніше повідомлених пацієнтів з антитілами DPPX.
Для оцінки спектру симптомів, реакції на лікування, наявності асоційованих пухлин та результату у пацієнтів з антитілами DPPX ми розглянули поточні дані разом із усіма раніше повідомленими випадками цих антитіл. 1, - 4, 15, 16