Ефект проти ожиріння у мишей із ожирінням C57BL6, викликаних дієтою з високим вмістом жиру. Дослідження нового витягу з

  • Журнал Головна
  • Поточне питання
  • Майбутній випуск
  • Найчитаніші
  • Найчастіше цитовані (розміри)
    • Останні два роки
    • Разом
  • Найчастіше цитовані (CrossRef)
    • Минулий рік 0
    • Разом
  • Соц.медіа
    • Минулий місяць
    • Минулий рік
    • Разом
  • Архів
  • Інформація
  • Онлайн подання
  • Інформація для авторів
  • Редагування мови
  • Інформація для рецензентів
  • Редакційна політика
  • Редакційна колегія
  • Цілі та сфера застосування
  • Абстрагування та індексування
  • Бібліографічна інформація
  • Інформація для бібліотекарів
  • Інформація для рекламодавців
  • Передруки та дозволи
  • Зверніться до редактора
  • Загальна інформація
  • Про Спандідос
  • Конференції
  • Вакансії
  • Зв'язок
  • Правила та умови
  • Автори:
    • Мі Рім Лі
    • Джи Ын Кім
    • Джун Янг Чой
    • Парк Джин Джу
    • Хе Рьонг Кім
    • Пісня Бо Рам
    • Молодий Ван Чой
    • Кюнг Мі Кім
    • Хункеунська пісня
    • Де Юн Хван

  • Ця стаття згадується в:

    Анотація

    Вступ

    На підставі попередніх звітів ми висунули гіпотезу, що EMfC викликає свої ефекти проти ожиріння шляхом регулювання ліпідного обміну. Тому ми використовували мишей, що страждають ожирінням, спричиненим дієтою, для оцінки змін накопичення жиру та ліпідних профілів, а також вивчали основні механізми адипогенезу, ліпогенезу та ліполізу.

    проти

    Матеріали і методи

    Підготовка ЕМЗ

    Один з авторів (професор Янг Уан Чой) охарактеризував зразки листя шовковиці, зібрані з плантацій в районі Санджу в Кореї в жовтні 2015 р. Зразки ваучерів (номер приєднання Mul-PDRL-1) були здані на зберігання в гербарій Пусанського національного Університет (Мірян, Корея). Професор Санг Монг Лі з кафедри біологічних наук та біохімії навколишнього середовища Національного університету Пусан люб'язно надав C. militaris, що використовується для бродіння. Сільськогосподарські федерації сільського господарства з шовкопрядів (Jeongeup, Корея) постачали порошок лялечок шовкопряда.

    Дизайн експерименту на тваринах

    Вісім тижнів мишей-самців C57BL/6 були придбані у Samtako Bio-Korea Inc. (Осан, Корея) та забезпечували вільний доступ до води та стандартну опромінену дієту чау (Samtako Bio-Korea Inc.). Під час експерименту мишей підтримували у вільному від патогенів стані під суворим світловим циклом (включення світла о 08:00 год. Та вимкнення о 20:00 год.) При 23 ± 2 ° C та відносній вологості 50 ± 10%. З усіма мишами C57BL/6 працювали в Пусанському національному університеті-лабораторії Центру тваринних ресурсів, акредитованому Корейською адміністрацією з питань харчових продуктів і медикаментів (FDA; Акредитована одиниця № 000231) та AAALAC International (Акредитована одиниця № 001525).

    Комітет з питань етики тварин Пусанського національного університету (PNU-2017-1519) затвердив протокол дослідження на тваринах. Усі тварини були акліматизовані на нормальній дієті (D12450K; Research Diets, Нью-Брансвік, Нью-Джерсі, США) протягом 1 тижня. Потім мишей C57BL/6 розподілили на 4 досліджувані групи (7 мишей/групу): (1) контрольна група, яка годувалась нормальним раціоном (без групи лікування), (2) група, яка годувала HFD (дієта з високим вмістом жиру) плюс носій (оливкова олія) + 1% DMSO) (HFD + група, оброблена транспортним засобом), (3) група, яка отримує HFD плюс 10 мг/кг орлістат (Sigma-Aldrich Co.) (група, що отримує HFD + OT), і (4) група, що отримує HFD плюс 50 мг/кг EMfC (група, оброблена HFD + EMfC). Протягом 12 тижнів миші всіх груп лікування HFD споживали HFD, що містить 60% ккал жиру, придбаного у Research Diets (кат. № D12492; Research Diets, Inc., Нью-Брансвік, США). Через 24 години остаточної обробки EMfC всіх мишей евтаназували за допомогою газу CO 2, після чого зразки тканин відбирали і зберігали в пробірках Еппендорфа при -70 ° C до аналізу.

    Вимірювання маси тіла, дієтичного споживання та маси органів

    Протягом експериментального періоду масу тіла мишей, оброблених Vehicle, OT або EMfC, вимірювали щодня о 10:00 за допомогою електронних ваг (кат. № AD-2.5; Mettler Toledo, Greifensee, Швейцарія) згідно з керівництвом KFDA . Крім того, ваги печінки та органів черевної порожнини, зібрані від померлих мишей C57BL/6, визначали, використовуючи той самий метод, який застосовували для вимірювання маси тіла. Споживання корму вимірювали одночасно раз на тиждень протягом досліджуваного періоду, використовуючи хімічний баланс (Mettler Toledo, Швейцарія).

    Біохімічний аналіз сироватки крові

    Після 12 тижнів годування експериментальними дієтами кров відбирали з черевних вен всіх мишей C57BL/6 після голодування протягом 18 год. Зразки крові інкубували протягом 30 хв при кімнатній температурі в пробірках для відділення сироватки (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, США). Сироватку отримували центрифугуванням при 1500 × g протягом 15 хв. Рівні глюкози в сироватці крові, TC (загальний холестерин), TG (тригліцериди), ліпопротеїни високої щільності (HDL) -холестерин та ліпопротеїни низької щільності (LDL) -холестерин аналізували за допомогою автоматичного хімічного аналізатора (BS-120 Chemistry Analyzer; Mindray, Шеньчжень Китай). Крім того, сироватку аналізували на вміст лужної фосфатази (ALP), аланінамінотрансферази (ALT), аспартатамінотрансферази (AST), азоту сечовини крові (BUN) та креатиніну (Crea) за допомогою автоматичного біохімічного аналізатора (BS-120; Mindray). Всі аналізи проводились у двох примірниках із використанням свіжої сироватки.

    Гістопатологічний аналіз

    Печінкові та жирові тканини, розсічені від мишей усіх підгруп, фіксували протягом ночі у 10% нейтральному забуференному формальдегіді (pH 6,8). Потім зневоднену тканину печінки вкладали у парафін. Потім із вкритих парафіном тканин із мікротомом Leica вирізали низку ділянок печінки та жиру (4 мкм) (кат. DM500; Leica Microsystems, Bannockburn, IL, США). Потім ці зрізи депарафінізували ксилолом (кат. № 8587-4410; Daejung, Gyeonggi-do, Корея), регідратували градуйованим етанолом (зниження концентрацій 100-70%) і, нарешті, промили дистильованою водою. Слайди з ділянками печінки фарбували гематоксиліном (кат. № MHS16) та еозином (кат. № HT110332; обидва Sigma-Aldrich Co.), промивали dH 2 O, а патологічні зміни оцінювали за допомогою програми Leica Application Suite ( Leica Microsystems).

    Аналіз зворотної транскрипції-кількісної полімеразної ланцюгової реакції (RT-qPCR)
    Вестерн-блот-аналіз
    Статистичний аналіз значимості

    Фігура 1.

    Малюнок 2.

    Малюнок 3.

    Малюнок 4.

    Малюнок 5.

    Експресія білків, пов’язаних з ліполізом, у тканинах печінки. (A) Вестерн-блот-аналіз вимірював фосфорилювання або експресію декількох асоційованих з ліполізом білків, включаючи (B) периліпін, p-периліпін, HSL, p-HSL та ATGL. Інтенсивність кожної смуги визначали за допомогою візуалізаційного денситометра, а відносні рівні чотирьох білків розраховували на основі інтенсивності актину. П’ять-шість щурів на групу аналізували в трьох примірниках методом вестерн-блот. Дані представлені як середнє значення ± стандартне відхилення трьох повторень. * Р 1

    Хаслам Д.В. та Джеймс В.П .: Ожиріння. Ланцет. 366: 1197–1209. 2005. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI