Фосфоліпіди у складі ліпопротеїнів у складі відмінностей між ЛПНЩ, ЛПНЩ та ЛПВЩ у вагітних
Анотація
Об’єктивна
Метою цього дослідження було проаналізувати відмінності у складі фосфоліпідів моношарів дуже низької щільності (ЛПНЩ), низької щільності (ЛПНЩ) та ліпопротеїнів високої щільності (ЛПВЩ) у вагітних худорлявих та ожирілих жінок.
Методи
ЛПНЩ, ЛПВЩ і ЛПНЩ були виділені із зразків плазми 10 худих і 10 вагітних жінок із ожирінням, а їх видовий склад фосфатидилхолінів (ПК) та сфінгомієлінів (СМ) аналізували методом рідинно-хроматографічної тандемної мас-спектрометрії. Тест Уілкоксона-Манна-Уітні та аналіз основних компонентів (PCA) використовувались для дослідження того, чи відрізняються метаболітні профілі між худими/ожирілими групами та між видами ліпопротеїнів.
Результати
Істотних відмінностей у рівнях метаболітів у вагітних із ожирінням та без ожиріння не виявлено. Компоненти PCA 1 і 2 розділялися між ЛПНЩ, ЛПВЩ та ЛПНЩ, але не між нормальною вагою та жінками з ожирінням. Дванадцять SM та одна РПЖ мали більшу кількість ЛПНЩ, ніж ЛПНЩ. На відміну від них, чотири ацил-алкіл-ПК та два діацил-ПК були значно вищими в ЛПВЩ порівняно з ЛПНЩ. ЛПНЩ і ЛПВЩ відрізнялись у трьох СМ, семи ацил-алкіл-ПК та одному діацил-ПК (вищі значення у ЛПВЩ) та 13 СМ (вищі у ЛПОНЩ). Ми також виявили асоціації деяких видів фосфоліпідів з холестерином ЛПВЩ та ЛПНЩ.
Висновок
У вагітних жінок склад фосфоліпідів суттєво відрізняється по ЛПВЩ, ЛПНЩ та ЛПНЩ, як і попередні результати у чоловіків та невагітних жінок. Вагітні жінки з ожирінням та худорлявістю не виявили значних відмінностей у своєму профільному метаболітному профілі, пов’язаному з ліпопротеїнами.
Вступ
Ожиріння та супутні захворювання є основною проблемою охорони здоров’я [1]. Було показано, що вагітність і раннє життя вже можуть встановити шлях до несприятливого метаболічного стану, як при ожирінні. У зв’язку з цим ожиріння матері під час гестації є фактором ризику ожиріння потомства в подальшому житті [2]. У механічному відношенні ліпопротеїни є одним з основних джерел живлення плоду, оскільки вони містять триацилгліцерини (ТГ). Ожиріння пов'язане з порушеним профілем ліпопротеїнів [3]. Отже, більш високі рівні ліпопротеїнів та змінена структура моношару фосфоліпідів є важливим об'єктом дослідження, оскільки модифікації можуть мати наслідки для енергозабезпечення плода та раннього програмування пізніших несприятливих наслідків для здоров'я через надмірне або недостатнє споживання енергії.
У стані голодування функція ліпопротеїдів дуже низької щільності (ЛПНЩ) полягає у транспортуванні жирних кислот у формі ТГ з печінки до позапечінкових тканин, а під час вагітності - до плода для енергетичного обміну та підтримання структури [4]. Частинки ЛПНЩ перетворюються на ліпопротеїди низької щільності (ЛПНЩ), які містять менше ТГ і більше холестерину, ніж ЛПНЩ. Холестерин ЛПНЩ може поглинатися тканинами, опосередкованими рецепторами ЛПНЩ, або на високому рівні депонуватися в клітинах-поглиначах в інтимі-середовищах судин, що сприяє ризику серцево-судинних захворювань [5]. Навпаки, ЛПВЩ запам'ятовує холестерин із позапечінкових тканин і транспортує його назад до печінки для виведення з жовчю, сприяючи зменшенню серцево-судинного ризику [6].
Загальні жирні кислоти в плазмі сильно пов'язані з метаболізмом ліпопротеїнів, а різні особливості ліпопротеїнів, такі як холестерин та вміст насичених видів, пов'язані зі здоров'ям серцево-судинної системи [7,8,9]. Незважаючи на існуючі докази важливості складу ліпопротеїнових жирних кислот для метаболізму та функціональності деяких з цих частинок [10], відмінності в молекулярних видах, виявлені в різних ліпопротеїнах, навряд чи вивчені.
Поверхня всіх ліпопротеїдів складається з фосфоліпідів, переважно фосфатидилхоліну (ПК) та сфінгомієліну (СМ) [11]. Ці дві групи фосфоліпідів позитивно асоціювались із вищим ІМТ у клінічних цілеспрямованих дослідженнях метаболоміки [12,13,14,15]. Більшість сучасних досліджень метаболоміки використовують цілу плазму для аналізу жирних кислот та фосфоліпідів крові [16], і зазвичай різні ліпопротеїни не аналізуються далі перед аналізом. Таким чином, відмінності складу ліпопротеїнів не враховуються.
Різниця у складі фосфоліпідів ліпопротеїнів раніше була показана у чоловіків та невагітних жінок [17].
Ми прагнули охарактеризувати фосфоліпідний склад ЛПНЩ, ЛПВЩ та ЛПНЩ у ожирілих та худорлявих вагітних, який, крім видів ліпопротеїнів під час вагітності в цілому [18], досі не був детально описаний. Циркулюючі ліпіди значно змінюються під час вагітності, і рівень ліпідів пов'язаний з антропометрією потомства [19]. Висока плацентарна експресія ендотеліальної ліпази (EL), яка переважно розщеплює фосфоліпіди, свідчить про участь фосфоліпідів у плацентарному переносі жирних кислот [20]. Таким чином, порівняння фосфоліпідів між ліпопротеїнами у вагітних може поліпшити розуміння ліпідного обміну під час вагітності та підтримує планування подальших досліджень метаболоміки щодо включення ліпопротеїнових аналізів.
Матеріали і методи
Предмети
Двадцять вагітних жінок були досліджені під час пологів (між 37 і 41 тижнем вагітності) в акушерсько-гінекологічній службі клінічної лікарні Вірген де ла Арріксака, Мурсія (Іспанія), у тому числі 10 жінок із ожирінням (ІМТ до вагітності> 30 кг/м 2) та 10 жінок із нормальною вагою (ІМТ до вагітності 20-25 кг/м 2). Усі жінки задовольняли наступним критеріям включення: одноплідна вагітність, термін пологів, вік 18–40 років, всеїдна дієта, не вживання добавок ДГК протягом останнього триместру, некуріння, нормальне допплерографічне дослідження плоду та проведення планового кесаревого розтину. Суб'єкти, які повідомляли про проблеми зі здоров'ям або ускладнення вагітності, були виключені. Письмова інформована згода була отримана від усіх суб’єктів. Це дослідження було схвалено Комітетом з питань етики лікарні.
Відбір проб
На момент пологів зразки крові у матерів, що постили, відбирали за допомогою пробірок, що містять ЕДТА. Зразки центрифугували протягом 3 хв при 1200 г для отримання плазми.
Біохімічні аналізи
Інсулін аналізували за допомогою хемілюмінесценції (DIAsource INSIRMA, Nivelles, Бельгія), а глюкозу, загальний холестерин, TG, холестерин LDL та холестерин HDL визначали кількісно за допомогою автоматичного аналізатора (Roche-Hitachi Modular PyD Autoanalyzer, Мангейм, Німеччина).
Виділення ліпопротеїдів
Ліпопротеїни материнської плазми виділяли з 1,5 мл свіжої плазми шляхом ультрацентрифугування з використанням розривного градієнта щільності NaCl/KBr [21] в ультрацентрифузі Optima L-100 XP, оснащеному ротором 100Ti (Бекман Коултер, Каліфорнія, США). Решту плазми заморожували в рідкому азоті і зберігали при - 80 ° C до аналізу.