Гепатопротекторні ефекти екстракту ортосифона стамінеуса на індукований тіоацетамідом цироз печінки
1 кафедра молекулярної медицини медичного факультету Малайського університету, Куала-Лумпур 50603, Малайзія
Анотація
1. Вступ
2. Матеріали та методи
2.1. Рослинні матеріали та хімікати
О. stamineus листя рослин було отримано від Ethno Resource Sdn Bhd. Завод було ідентифіковано, а зразок ваучера зберігався в нашій лабораторії для подальшого використання. Висушені та подрібнені в порошок листя (100 г) екстрагували 900 мл 95% -ного етанолу протягом 48 годин, а етаноловий екстракт фільтрували і випаровували під низьким тиском за допомогою роторного випарника типу Бучі з отриманням неочищеного висушеного екстракту. Встановлено, що процентний вихід етанолових екстрактів становить 8,1% (мас./Мас.). Потім сухий екстракт розчиняли в Твін 20 (10% мас./Об.) І вводили перорально щурам у концентраціях 100 і 200 мг/кг маси тіла.
Тіоацетамід фірми (Sigma-Aldrich, Швейцарія) та всі інші використовувані хімічні речовини були аналітичного класу та купувались переважно у Sigma-Aldrich та Fisher. Хімічну речовину розчиняли у стерильній дистильованій воді та вводили щурам внутрішньочеревно в концентрації 200 мг/кг маси тіла [18]. Силімарин (Міжнародна лабораторія, США) як стандартний препарат і розчинявся в Твін 20 (10% мас./Об.) І перорально вводився щурам у концентрації 50 мг/кг маси тіла [19].
2.2. Визначення загальної кількості фенольних та флавоноїдів
O. stamineus екстракту оцінювали їх загальний вміст фенолу за допомогою реагенту Фолін-Ціокальтеу та розраховували як еквіваленти галової кислоти в мг (GAE)/г екстракту згідно з колориметричним методом Фоліна-Дениса [20]. Однак загальні флавоноїди визначали за допомогою колориметричного методу хлориду алюмінію і виражали як еквіваленти кверцетину в мг (QE)/г екстракту, як описано Dowd [21]. Обидва аналізи проводили у трьох примірниках.
2.3. Тварини
Дорослий чоловік здоровий Спрег Долі (SD) щури вагою 200–250 г були отримані з підрозділу Animal House, Медичний факультет, Малайський університет, Малайзія. Їх утримували в клітках із дротовим дном при температурі 25 ± 3 ° C, вологості 50–60% та циклі 12 годин світло-темно принаймні тиждень до експерименту. Під час експерименту вони підтримувались у стандартних умовах утримання та вільному доступі до стандартної дієти та води ad libitum. Експериментальний протокол був затверджений Комітетом з етики тварин; з етичним № (PM 28/08/2009/MAA (R). Протягом експериментів застосовувались усі критерії догляду за тваринами, підготовлені Національною академією наук і викладені в «Посібнику з догляду та використання лабораторних тварин».
2.4. Експериментальний дизайн
Тварин випадковим чином розподіляли на п’ять груп по вісім щурів у кожній і обробляли наступним чином.
Група 1
10% Твін 20 (5 мл/кг, перорально) щодня протягом 2 місяців + стерильна дистильована вода (1 мл/кг, в/в) тричі на тиждень протягом 2 місяців (нормальна контрольна група).
Група 2
10% Твін 20 (5 мл/кг, перорально) щодня протягом 2 місяців + TAA (200 мг/кг, в/в) тричі на тиждень протягом 2 місяців (гепатотоксична група позитивного контролю).
3 група
Силімарин (50 мг/кг, перорально) щодня протягом 2 місяців + TAA (200 мг/кг, в/в) тричі на тиждень протягом 2 місяців (добре відомий стандартний препарат гепатопротекторної групи).
4 групаO. stamineus (200 мг/кг, перорально) щодня протягом 2 місяців + TAA (200 мг/кг, в/в) тричі на тиждень протягом 2 місяців (група лікування, висока доза).