Метод кількісної оцінки незаконного вживання наркотиків із метамфетаміну в сечі
Анотація
Якісний аналіз сечі може підтвердити утримання від зловживання наркотиками, але не може виявити змін у споживанні наркотиків. Для препаратів з повільним виведенням, таких як метамфетамін (МА), один епізод зловживання може призвести до 5 днів позитивного скринінгу наркотиків із сечею. Таким чином, втручання, які спричиняють значне зменшення споживання наркотиків, але не забезпечують майже повного утримання, класифікуються як неефективні. Використовуючи нефармакологічні дози міченого дейтерієм l-метамфетаміну (l-MA-d3), ми розробили простий, надійний метод, який надійно оцінює зміни у споживанні МА. Дванадцятьох суб'єктам дозували 5 мг l-MA-d3 щодня, а також отримували 15, 30 і 45 мг неміченого d-MA (d-MA-d0) після досягнення стабільного рівня l-MA-d3 у плазмі крові. Співвідношення концентрації d-MA-d0 у сечі до l-MA-d3 забезпечували чітке розділення введених доз із збільшенням дози до 15 мг. Введені дози неможливо вирішити лише за допомогою концентрацій d-MA-d0. На закінчення, сечовий [d-MA-d0]: [l-MA-d3] забезпечує кількісний, постійний показник незаконного впливу МА. Цей метод надійно виявляє незначні, клінічно значимі зміни в незаконному споживанні МА із випадкових зразків сечі, піддається застосуванню в клінічних випробуваннях і може бути використаний для кількісної оцінки зловживань МА.
Вступ
Епідемії зловживання метамфетаміном (МА) та звикання спостерігаються у всьому світі (Schifano et al., 2007; Degenhardt et al., 2008; McKetin et al., 2008), що підживлюється незаконним синтезом від 197 до 624 метричних тонн незаконних амфетаміноподібних препаратів на рік, достатньо для понад 10 мільярдів доз МА 30 мг (http://www.unodc.org/documents/wdr/WDR_2010/World_Drug_Report_2010_lo-res.pdf). Деякі з цих зловживань стають наркоманами, які створюють соціальні наслідки, наслідки для здоров'я та злочинності, які зачіпають усі рівні суспільства (Watanabe-Galloway et al., 2009). Таким чином, існує нагальна потреба у розробці методів лікування наркоманії. На жаль, незважаючи на великі зусилля протягом останніх 20 років, жоден препарат не був доведений ефективним для лікування наркоманії МА (Karila et al., 2010).
Результати якісних аналізів токсикології сечі є основними об'єктивними показниками результатів для більшості досліджень проти наркоманії, включаючи випробування на наркоманію. У цих випробуваннях зазвичай використовують імунологічні аналізи сечі, які є чутливими (але не специфічними) та недорогими та можуть застосовуватися в клініці. Для усунення хибнопозитивних результатів підтверджується ідентичність препарату та вимірюється концентрація препарату в сечі за допомогою чутливих та специфічних методів аналізу, які завжди включають мас-спектрометрію (МС). Незважаючи на те, що ці методи дають точні та точні концентрації сечі, кілька факторів, включаючи вік, стан гідратації, рН сечі та потік сечі, ускладнюють зворотну екстраполяцію від концентрації сечі до кількості зловживаного препарату, а то й неможливо. Як наслідок, результати тестів на наркотики з сечею оцінюються лише як часовий ряд двійкових результатів "позитивних" або "негативних".
Абстиненція є метою лікування наркоманії, а якісна токсикологія сечі надзвичайно чутлива для виявлення вживання наркотиків у людей, які зазвичай не страждають. Однак він не чутливий при виявленні у людей або зменшення, або коротких періодів (до 2-3 днів) утримання. Таким чином, необхідно надзвичайно велике зменшення рівня зловживання (можливо, до 90%), перш ніж буде помітним навіть помірне зниження результатів аналізу сечі та лікування буде визнано ефективним (Національний інститут зловживання наркотиками/Коледж з проблем наркозалежності), 1999). Ця ступінь суворості може бути причиною відмови від усіх методів лікування наркоманії, перевірених на сьогодні. Якщо нові способи лікування зловживання стимуляторами навряд чи дадуть раптову, повну абстиненцію, то якісні методи, які не можуть виміряти менше загальної абстиненції, навряд чи будуть корисними при виборі препаратів чи інших кандидатів на лікування, які можуть зменшитись, але не усунути незаконний прийом. Беручи до уваги зростаючий перелік невдалих випробувань на залежність від МА, розробка методів, що дозволяють небінарну постійну оцінку споживання наркотиків, стала важливою.
Для визначення незаконного споживання ми перевіряли корисність прийому малих фармакологічно неактивних пероральних доз мічених дейтерієм лікарських засобів або метаболітів, що мають фармакокінетичні профілі, подібні до зловживаного лікарським засобом, що цікавить. Потім ми визначаємо співвідношення концентрації немічених (заборонених та самостійно введених) у сечі до мічених дейтерієм лікарських засобів (або метаболітів), щоб отримати оцінку споживання та впливу наркотику, що викликає залежність. Метод аналогічний використанню внутрішнього стандарту в аналітичній хімії.
У цій статті ми представляємо лабораторне підтвердження методу кількісної оцінки впливу МА. При використанні в клінічному випробуванні цей метод змінює бінарний на постійний показник і дозволить оцінити часткову ефективність передбачуваного лікування. Для оцінки споживання МА ми використовували тридетерований l-МА з маркуванням дейтерієм на метильній групі. У попередній роботі ми показали, що такий рівень дейтерації не змінює фармакологію МА у людини (Harris et al., 2003). l-MA [також позначений R - (-) - MA] є менш фармакологічно активним ізомером порівняно з d-MA [також позначений S - (+) - MA]. У роботі, що вела до цього дослідження, ми встановили, що 5-мг пероральні дози l-МА повністю абсорбуються, не мають вимірюваних суб'єктивних чи серцево-судинних ефектів і легко виявляються в сечі (Li et al., 2010).
Матеріали і методи
Предмети.
У цьому дослідженні брали участь дванадцять здорових, незалежних суб'єктів, що використовують МА (вісім чоловіків, чотири жінки; середній вік 31 ± 10 років; середня вага 72 ± 13 кг; 83% білих). Для включення суб'єкти повинні були використовувати МА принаймні 1 рік з більш ніж 20 життєвими опроміненнями, але не залежати від МА за критеріями в Діагностичному та статистичному посібнику з психічних розладів, четверте видання. Учасники мали гарне самопочуття за оцінкою медичного обстеження, лабораторних досліджень (включаючи гематологічні, печінкові та ниркові хімічні сироватки), аналіз сечі та ЕКГ. Дослідження було схвалено Каліфорнійським тихоокеанським медичним центром та Каліфорнійським університетом, Сан-Франциско, оглядовими комісіями. Дослідження проводилось відповідно до Гельсінської декларації.
Вивчати дизайн.
Було використано відкриту конструкцію з фіксованою послідовністю з послідовними етапами амбулаторно-стаціонарного лікування. Пероральні дози 5 мг l-MA-d3 вводили протягом 14 днів. У дні з 1 по 7 обстежувані були амбулаторно. Протягом цього періоду щоранку під безпосереднім контролем вводили разову дозу 5 мг l-MA-d3. Випробовуваних приймали до дослідницького відділення на 7-й день. У дні дослідження 8, 10 та 12 проводили серію висхідних внутрішньовенних доз d-MA-d0 по 15, 30 та 45 мг. Кожну дозу d-MA-d0 вводили протягом 1 хв під контролем інфузійного насоса (Harvard Appair Inc., Holliston, MA). Дозу 15 мг вводили у вигляді одноразової інфузії. Дозу 30 мг вводили у вигляді двох інфузій по 15 мг з дозами, розділеними на 1 год. Дозу 45 мг вводили у вигляді п’яти 9-мг інфузій, кожна з яких розділялася на 1 год. Цей шаблон був розроблений для імітації запою d-MA.