Прикордонний метанольний екстракт озимої вишні викликає морфо-гістологічні та імунологічні захворювання
Фізіологія безхребетних
Редаговано
Сентіл-Натан, Сенготтаян
Університет Манонманіяма Сундаранар, Індія
Переглянуто
Сенгодан Карті
Університет Манонманіяма Сундаранар, Індія
Умеш К. Гаутам
Центр біології Академії наук Чеської Республіки (ASCR), Чехія
Приналежності редактора та рецензентів є останніми, наданими в їхніх дослідницьких профілях Loop, і вони не можуть відображати їх ситуацію на момент огляду.
- Завантажити статтю
- Завантажте PDF
- ReadCube
- EPUB
- XML (NLM)
- Додаткові
Матеріал
- Експортне посилання
- EndNote
- Довідковий менеджер
- Простий текстовий файл
- BibTex
ПОДІЛИТИСЯ НА
СТАТТЯ Оригінального дослідження
- 1 Кафедра захисту рослин факультету сільськогосподарських наук Університету Гілан, Рашт, Іран
- 2 Відділ досліджень шовку, факультет сільськогосподарських наук, Університет Гілана, Рашт, Іран
Вплив екстракту насіння лікарської рослини Withania somnifera тестували на менший піралід шовковиці, потенційного шкідника шовковиці. Листя шовковиці використовували для виробництва шовку в сільських районах північного Ірану. Екстракт вводили перорально методом занурення листя у двох нижчих (5% мас./Об.) І вищих (15% мас./Об.) Дозування личинкам третього віку (2+, 0,4 кО/л гліцерокінази, 2 кО/л пероксидази, 2 кУ/л ліпопротеїнової ліпази, 0,5 мМ 4-аміноантипірину та 0,5 кО/л гліцерол-3-фосфат-оксидази. Десять мікролітрів зразка інкубували з 10 мкл дистильованої води та 70 мкл реагенту протягом 20 хв при 25 ° C Формули, наведені нижче, використовувались для оцінки кількості тригліцеридів:
мг/дл = оптична щільність зразка/оптична щільність за стандартом × 0,01126.
Зчитування проводили при 545 нм (Fossati and Prencipe, 1982) у зчитувачі ELISA (Awareness, США). Для вимірювання глікогену всі личинки заливали 1 мл 30% КОН. Пробірки для зразків покривають алюмінієвою фольгою і кип'ятять 30 хв. Спочатку трубки вихрово викручували, а потім клали на кубики льоду. Для відділення глікогену від розчину використовували 2 мл 95% етанолу. Зразки знову закручували і залишали на мішку з льодом на 30 хв. Центрифугування проводили при 13000 g протягом 30 хв. Гранули глікогену, що утворилися таким чином, збирали і змішували в дистильованій воді (1 мл), а потім перемішували на вихрі. Зразки стандарту для глікогену готували за зростанням (0, 25, 50, 75 та 100 мг/мл), а потім змішували з фенолом (5%). Зразки інкубували на крижаній бані протягом 30 хв. Нарешті, поглинання було зчитано при 490 нм (Chun and Yin, 1998).
Активність α-амілази оцінювали на основі методу Бернфельда (1955). Крохмаль (1%) використовували як субстрат. Фермент (10 мкл) інкубували з трис-HCl-буфером (50 мкл 20 мМ при рН 7,1) та 20 мкл крохмалю (1%) при 30 ° С протягом 30 хв. Після додавання 100 мкл динітросаліцилової кислоти (ДНС) її нагрівали у водяній вкладці з температурою кипіння протягом 1 хвилини, а потім зчитували при 540 нм.
Метод Garcia-Carreno and Haard (1993) був використаний для визначення загальних протеаз із використанням 1% азоказеїну як субстрату для їх активності. Для цього супернатант (10 мкл) та буфер (15 мкл) та 50 мкл субстрату інкубували протягом 3 год при 37 ° С у печі. Для зупинки реакції додавали 150 мкл 10% трихлороцтової кислоти. Заготовки готували додаванням до основи трихлороцтової кислоти. Потім рідини витримували в холодильнику (4 ° C) протягом 30 хв, а потім центрифугували при 13000 g. Пізніше суміш супернатанту та NaOH, по 100 мкл кожного, переносили на планшети для ІФА і зчитували при 440 нм.