Слюда, що входить до складу слюди, має хіміопрофілактичний потенціал через арешт G1 та інгібування проліферації

Сун-Юн Чо

1 Науково-дослідний центр з питань профілактики раку, Коледж корейської медицини, Університет Кюн Хі, 1 Hoegi-dong, Dongdaemun-gu, 130-701, Сеул, Південна Корея

Хе-Чонг Лі

1 Науково-дослідний центр з профілактики ракових захворювань, Коледж корейської медицини, Університет Кюн Хі, 1 Hoegi-dong, Dongdaemun-gu, 130-701, Сеул, Південна Корея

Сон-Мі Чо

Бонглі Кім

Йон Квон Юнг

2 SeoBong Biobestech Co, 831 Yeoksam-dong, Gangnam-gu, Ltd.Hye Cheon Bldg # 401, 135-080, Сеул, Республіка Корея

Сун Хун Кім

Анотація

Передумови

Незважаючи на те, що слюда, тонкий і схожий на мінерали, мінерал, використовувалася як мінеральне ліки для лікування кровотеч, дизентерії та запалення в традиційній медицині, включаючи Аюрведу, біологічні докази слюди дотепер чітко не з'ясовані. Таким чином, у цьому дослідженні протипухлинний механізм слюди, що має частки (STB-HO), вивчався при раку прямої кишки.

Методи

Голим мишам з атимічної залози інокулювали клітини раку товстої кишки HCT116 і перорально вводили STB-HO щодня протягом 41 дня, а клітини HCT116 та ендотеліальні клітини пуповинної вени (HUVEC) обробляли STB-HO протягом 0

24 години для проведення імуноблотингу, аналізу цитотоксичності, аналізу FAC та вимірювання секреції матриксної металопротеїнази 9 (MMP-9) та інших експериментів. Значущі відмінності всіх дат оцінювали за допомогою t-критерію Стьюдента та багаторазового тесту Туреччини-Крамера.

Результати

STB-HO суттєво пригнічував об'єм та вагу пухлини у мишей з голими тимами, інокульованих клітинами HCT116 у дозі 100 мг/кг. Таким чином, протипухлинний механізм STB-HO in vivo також повинен був з'ясуватись in vitro. STB-HO виявив цитотоксичність у клітинах раку прямої кишки HCT116, SW620 та HCT15. Крім того, STB-HO збільшував популяцію клітин G1 залежно від часу та концентрації, посилював експресію p21, p27, p53 як інгібіторів циклінозалежної кінази (CDK), послаблював експресію проліферуючих клітинних ядерних антигенів (PCNA) та циклін D1 та також зменшила продукцію судинного ендотеліального фактора росту (VEGF) та матричної металопротеїнази 9 (MMP-9) у клітинах HCT116. Послідовно STB-HO пригнічував фосфорилювання VEGFR2 у клітинах HCT116, SW620 та HCT15. Крім того, STB-HO інгібував опосередковану VEGF проліферацію, а також послаблював фосфорилювання VEGFR2 та Akt в ендотеліальних клітинах пуповинної вени людини (HUVEC).

Висновки

У сукупності ці висновки свідчать про те, що STB-HO має хіміопрофілактичний потенціал через зупинку G1 та інгібування проліферації та VEGFR2 у клітинах колоректального раку HCT116.

Передумови

Колоректальний рак (КРР) є однією з провідних причин смертності в західному світі. Хіміотерапія, що включає терапію 5-фторурацилом (5-FU) та хірургічну резекцію, є добре відомими методами лікування раку товстої кишки [1]. Однак побічні ефекти викликаються хіміотерапією, такою як мукозит порожнини рота, діарея, нейропатія, анемія та алопеція [2]. Так, нещодавно повідомлялося, що природні продукти [3] та сполуки [4-6] мають протипухлинний ефект при колоректальному раку як окремо, так і в поєднанні з протипухлинними засобами [7] з низькою токсичністю. Також Ху та співавт. припустили, що серед чоловіків та жінок, які приймали вітамінно-мінеральні добавки більше 5 років, значні зворотні асоціації з раком товстої кишки були найбільш вираженими серед жінок з дистальним раком товстої кишки [8]. Подібним чином є дані, що мінеральний селен має протипухлинну активність при раку товстої кишки [9-12].

Група слюди листових силікатних мінералів, як правило, класифікується як триоктаедрична слюда, включаючи біотіт, лепідоліт, московіт, флогопіт, цинвальвальд і дефіцит проміжних слюд [13]. Слюда використовується для прикраси та лікування кровотеч, дизентерії та запалення в традиційній медицині, включаючи Аюрведу, протягом століть. Насрін та ін. не виявив токсичності Хондрокола Рош, традиційного металевого аюрведичного препарату, що включає різні обсмажені метали (Hg та Cu), неметали (сірка та слюда) та лікарські трави [14]. Також було відомо, що слюда захищає слизову шлунка шляхом поліпшення кровотоку та запальної реакції [15], а також пригнічує рак шлунка за допомогою регулювання р16 та Bcl-2 у щурів [16], що вказує на те, що слюда може використовуватися як ліки [17]. Таким чином, у цьому дослідженні протипухлинний механізм слюди (STB-HO) досліджували in vitro при колоректальному раку HCT116 та ендотеліальних клітинах пуповинної вени людини (HUVEC) та атимічних оголених мишах, інокульованих клітинами HCT116.

Методи

Хімічні речовини та реактиви

Культура клітин

SW620 (ATCC CCL-227 ™), HCT116 (ATCC CCL-247 ™) та клітини HCT15 (ATCC CCL-225 ™) висівали на 100-міліметрові пластини Falcon при 2 × 10 6 клітин/мл у RPMI 1640, доповнену 10% FBS і 1% пеніциліну/стрептоміцину. Клітини культивували при температурі 37 ° С у зволоженій атмосфері, що містить 5% СО2 до 60–80% злиття, а потім використовували для вестерн-блот-аналізу. STB-HO обробляли різними клітинами раку товстої кишки людини протягом 24, 48, 72 та 96 годин. HUVEC підтримували в M199 плюс 20% інактивованої фетальної бичачої сироватки (FBS), 3 нг/мл bFGF, 5 одиниць/мл гепарину, 100 одиниць/мл антибіотико-антимікотичного розчину (повний M199) в 0,1% колбах, покритих желатином, та інкубували при 37 ° C у зволоженій атмосфері, що містить 5% CO2. Після злиття клітини відокремлювались розчином трипсину-ЕДТА і використовувались в експериментах з третього по шостий пасажі.