T4 РНК-лігаза 2, усічена KQ NEB
Не знаєте, яку лігазу вибрати? Зверніться до нашої діаграми властивостей лігази ДНК та РНК.
T4 РНК Лігаза 2, усічена KQ лігує попередньо аденільований 5´ кінець ДНК або РНК до 3´ кінця РНК.
- Знижена активність лізил-аденилирования
- Ізольовано з рекомбінантного джерела
- Поставляється з буфером реакцій 10X
- Потрібна 5 'попередньо аденільована РНК або ДНК для лігування
- Випробувано на відсутність ендонуклеаз, екзонуклеаз, РНКаз та фосфатаз
- Не знаєте, яку лігазу вибрати? Зверніться до нашої діаграми властивостей лігази ДНК та РНК
Вибране відео
Уникнення забруднення РНКазою
T4 РНК-лігаза 2, усічена KQ (T4 Rnl2tr R55K, K227Q) специфічно лігує попереднільований 5´ кінець ДНК або РНК до 3´ OH кінця РНК. Фермент не використовує АТФ для лігування, але вимагає попередньо аденільованих лінкерів.
T4 Rnl2tr R55K, K227Q - подвійний точковий мутант T4 РНК-лігази 2, усічений (NEB # M0242). Мутація K227 в Т4-РНК-лігазі 2 зменшує фермент лізил-аденілювання (1). K227Q зменшує утворення небажаних продуктів лігування (конкатемери та кола) за допомогою T4 Rnl2tr (2,3), зменшуючи активність слідів T4 Rnl2tr при перенесенні аденилільних груп від лінкерів до 5´-фосфатів вхідних РНК (3). Мутація R55K в T4 Rnl2tr K227Q збільшує лігатурну активність ферменту до рівнів, подібних до T4 Rnl2tr (3).
Виключення АТФ, використання попередньо аденільованих лінкерів та знижена активність ферменту лізил-аденилирования забезпечують найнижчий можливий фон у реакціях лігування. Цей фермент був використаний для оптимізованого лігування лінкера для високопродуктивної побудови бібліотеки послідовностей малих РНК (4).