Тести на фекальну приховану кров - Клінічні методи - Книжкова полиця NCBI
Книжкова полиця NCBI. Служба Національної медичної бібліотеки, Національних інститутів охорони здоров’я.
Walker HK, Hall WD, Hurst JW, редактори. Клінічні методи: історія, фізикальні та лабораторні обстеження. 3-е видання. Бостон: Батервортс; 1990 рік.
Клінічні методи: історія, фізикальні та лабораторні обстеження. 3-е видання.
Дж. Дональд Остроу .
Визначення
Аналізи на приховану кров у фекаліях виявляють кров у стільці, яку не видно при грубому огляді, зазвичай менше 50 мг гемоглобіну на грам стільця. Звичайні дорослі зазвичай демонструють менше 2-3 мг/г. Збільшення кількості пов’язане з різноманітними доброякісними та злоякісними захворюваннями шлунково-кишкового тракту, особливо новоутвореннями товстої кишки, і тести найчастіше використовуються при скринінгу пацієнтів на такі ураження.
Техніка
Тести на основі бензидину (наприклад, Hematest) були практично виключені з використання через їх надмірну чутливість, що призводить до високої частоти хибнопозитивних реакцій, а також канцерогенності реагенту.
Сучасним світовим стандартом є тест гемокультизму (Diagnostics Smith-Kline), тест на основі гваяку, при якому одна сторона просоченого гваяком паперу змащується стільцем і перевіряється додаванням декількох крапель розчину проявника (стабілізована пероксид реагент) на протилежну сторону паперу. У скринінгових програмах пацієнт за допомогою дерев'яного аплікатора виймає стілець з унітазу, намазує невелику порцію на два вікна картки і закриває кришку. Це робиться протягом трьох послідовних днів, і картки надсилаються на тестування, оскільки протягом 1 тижня спостерігається незначна деградація реактивних гемів у сухих, змазаних зразках (менше 15% зразків).
Поява однозначного синього кольору будь-якої інтенсивності протягом 30 секунд вважається позитивним тестом; зеленуваті кольори, спричинені окисленням білірубіну калу до білівердину, не слід сприймати як позитивні. Позитивні та негативні контрольні плями містяться в картці, щоб переконатися, що реагенти реагують із субстратом, а не реагують за відсутності субстрату. Було виявлено, що дифузія гематину із змащеного стільця у папір є важливою, щоб реакцію можна було посилити, змочивши змащений бік паперу кількома краплями води за кілька хвилин до додавання проявника. Однак така регідратація зразків також збільшує частоту хибнопозитивних реакцій рослинних пероксидаз та м'ясних гемів у раціоні, і не рекомендується, якщо немає жорсткого дотримання обмеженого раціону, зазначеного в таблиці 98.1.
Таблиця 98.1
Сувора дієта з низьким вмістом пероксидази для скринінгу на приховану кров.
На продаж було випущено модифікацію гемокультного тесту (ColoScreen, Helena Laboratories), в якому був доданий селективний інгібітор негемових рослинних пероксидаз в надії зменшити хибнопозитивні реакції цього джерела. Інша група тестів заснована на імунологічному виявленні людського гемоглобіну або глобіну в калі, але розроблені до цього часу тести були ненадійними через надмірну чи недостатню чутливість та погану відтворюваність. Обидва підходи можуть покращити специфічність, але жоден з них не вирішує проблему великої та змінної деградації гематину або глобіну в просвіті кишечника, проблема якої поділяється Гемокультом.
Новим, багатообіцяючим і майже кількісним підходом (HemoQuant, Bioscience Labs) є вимірювання фекальних гемів за специфічною флуоресценцією їх похідних порфірину після вилучення порфіринів із зразка для видалення заважаючих речовин. Змінна (від 1 до 98%) частка неабсорбованого гемоглобіну/гематину перетворюється в порфірини кишковими бактеріями (так звана кишково-перетворена фракція, або ІЧФ); цю фракцію можна екстрагувати в органічний розчинник у присутності лимонної кислоти. Залишилися цілі геми можуть бути хімічно перетворені в порфірини, нагріваючи в пробірці в присутності щавлевої кислоти та сульфату заліза, а потім екстрагувати разом з ICF, отримуючи загальний обсяг перетворених порфіринів як міру загальних неасорбованих гемів.