Троксерутин захищає від DHT-індукованого синдрому полікістозу яєчників у щурів SpringerLink
Виправлення до цієї статті доступне
Ця стаття оновлена
Анотація
Вступ
Синдром полікістозних яєчників (СПКЯ) - це репродуктивна ендокринопатія, поширеність якої, за оцінками, становить 6%
20% (залежно від різних використовуваних діагностичних критеріїв), що робить це найпоширенішим ендокринним станом у жінок репродуктивного віку [1]. Діагностичні особливості СПКЯ включають надлишок андрогену, дисфункцію овуляції та полікістоз яєчників [1]. Ожиріння присутнє у 30–60% хворих на СПКЯ, залежно від країни походження [2, 3]. Найбільш послідовною біохімічною патологією у жінок із СПКЯ є гіперсекреція андрогену, підвищений рівень лютеїнізуючого гормону в сироватці крові та низький до нормального рівня фолікулостимулюючого гормону (ФСГ) у сироватці крові [4, 5]. Моделі тварин, що відображають особливості СПКЯ, є важливими ресурсами для дослідження цього синдрому. Хронічно оброблена 5α-дигідротестостероном (DHT) модель щурів імітує людський фенотип СПКЯ і є придатною моделлю для досліджень щодо СПКЯ.
Вісь гіпоталамус-гіпофіз-гонада (HPG) відіграє центральну роль у вишуканій нейроендокринній регуляції розмноження. Гіпоталамічна секреція гонадотропін-вивільняючого гормону (GnRH) була надійно встановлена як ключовий шлях, який контролює репродуктивну функцію [6]. Аксони нейронів GnRH виступають у серединну височину і вивільняють GnRH, який через гіпофізарну портальну систему потрапляє в передню частину гіпофіза. Передня частка гіпофіза, основна мішень GnRH, реагує на стимуляцію збільшенням секреції ЛГ та ФСГ, що в свою чергу призводить до вироблення стероїдів з яєчників та стимулює генезу та овуляцію фолікулів [7]. Таким чином, GnRH відомий як головний гормон і забезпечує остаточний загальний вихід мережі, що регулює репродуктивну функцію.
На GnRH впливають зовнішні фактори, такі як нейромедіатори та нейропептиди, будь-які зміни регуляторних нейромедіаторів GnRH, такі як гальмівна гамма-аміномасляна кислота (GABA) та стимулюючий глутамат (Glu), можуть призвести до репродуктивної ендокринної дисфункції [8]. Насправді, хронічна ановуляція, характерна для СПКЯ, пояснюється посиленням центрального драйву GnRH та наслідками аберацій гонадотропіну, які, ймовірно, є результатом кумулятивного ефекту зміненого стимулюючого та гальмівного нейромедіатора GnRH в гіпоталамусі та гіпофізі [9]. Кісспептин, а згодом і відкритий нейрінін В (NKB), два нові нейропептиди, що регулюють GnRH, виявилися важливими для нормальної секреції GnRH у людей, потрапили під інтенсивне увагу в останнє десятиліття [10, 11]. Відкрите пов'язане з цим відкриття шляху кспеспетин-/нейрокініну В-/динорфін- (KNDy) ще більше посилило розуміння модуляції секреції GnRH [12]. Нейрони KNDy, що мешкають в області дугоподібного ядра гризунів, коекспресують кісспептин, NKB та DYN [12, 13]. NKB та кісспептин, отримані з KNDy, стимулюють вивільнення GnRH, зв'язуючи рецептор Kisspeptin 1 (Kiss1r) та рецептор нейрокініну 3 (NK3r), експресований на нейронах GnRH [14, 15].
Матеріали і методи
Тваринам і введення троксерутину
Забір крові та тканин
У терміналі дослідження щурів обезголовили, кров стовбура збирали і центрифугували при 3000 об/хв протягом 15 хв. Плазму відокремлювали і зберігали при - 80 ° C до аналізу для біохімічного та гормонального аналізу. Яєчники очищали у фізіологічному розчині та обробляли знежирене. Яєчники фіксували в 10% забуференному формаліні протягом 48 год і вкладали парафін. Зрізи тканини, вкладені в парафін, депарафініровали, розділили на ділянки (6 мкм) і забарвили гематоксиліном та еозином (H&E). Кількість фолікулів класифікували та підраховували у кожному 40-му відділі яєчників по 10 яєчників на групу. Фолікули підраховували згідно з наступним визначенням. Первинний фолікул був оточений одним шаром плоских клітин гранульози. Первинний фолікул містив один шар кубоїдних гранульозних клітин. Вторинний фолікул містив два або більше шарів клітин гранусоли, але антрального простору в шарі гранульози немає. Антральний фолікул демонструє багатошарові клітини гранусоли з наявністю фолікулярного антрального відділу.
Мазки з піхви та естральні цикли
Вагінальні мазки брали щодня о 09:00 з 18-го по 28-й день після першого дня лікування ДГТ, які були кінцевими 10 днів дослідження. Мікроскопічний аналіз (BX41, Olympus) проводили для визначення стадії еструального циклу за переважаючими типами клітин у вагінальних мазках після фарбування метиленовим синім (Solarbio, Пекін). Проеструс складається із збільшених, круглих, ядерних клітин епітелію; еструс складається з великої кількості ороговелих плоскоклітинних клітин; метеструс складається з двох видів клітин: епітеліальних клітин та лейкоцитів із приблизно однаковим вмістом; і діеструс характеризується невеликою кількістю клітин з переважанням лейкоцитів.
Вага тіла, біохімічний та вестерн-блот-аналіз
Вагу тіла вимірювали щотижня після імплантації протягом 4 тижнів.