Виділення, характеристика та гіполіпідемічна активність ферулової кислоти в індукованій дієтою з високим вмістом жиру
Панкадж Г. Джейн
1 Інститут фармацевтичної освіти та досліджень імені Р. С. Пателя, Ширпур, Діст-Дуле-425405, Махараштра, Індія
Санджай Дж. Сурана
1 Інститут фармацевтичної освіти та досліджень імені Р. С. Пателя, Ширпур, Діст-Дуле-425405, Махараштра, Індія
Анотація
Вступ
Хвороби серцево-судинної системи є видатною загрозою для здоров'я, яка часто призводить до смерті. Малорухливий спосіб життя та помилкові харчові звички, що охоплюють споживання жирів та рафінованого цукру, призводять до зниження активності ниток міозину та актину (Brai et al., 2007 [7]), підсилюють ризик гіперліпідемії, вагомого фактора ризику для добре відомих серцево-судинні розлади, атеросклероз та супутні серцево-судинні складності. Близько 17,5 мільйонів людей померли через серцево-судинні захворювання (ССЗ), що становить 31% всіх смертей у світі, і очікується, що до 2030 року це зросте до понад 23,6 мільйона (Mozaffarian et al., 2016 [37]). Очікується, що частка осіб з гіпертонічною хворобою в Індії зросте у 2 рази до 2025 року (Brai et al., 2007 [7]). Ішемічна ішемічна хвороба є вагомим фактором ризику в патогенезі передопераційних несприятливих серцево-судинних подій, які підвищують ризик смертності у підгрупі пацієнтів з високим ризиком хірургічного лікування (Howard-Alpe et al., 2006 [15]).
Профіль холестерину пацієнта відіграє вирішальну роль у лікуванні гіперліпідемії. Численні антигіперліпідемічні компоненти, включаючи статини, фібрати, ніацин, жовчні кислоти, езитиміб тощо, знижують рівень холестерину, хоча і за іншим механізмом (Durrington, 2003 [12]). В даний час доступні гіполіпідемічні препарати полегшують частину пацієнтів і асоціюються з низкою побічних ефектів, включаючи гіперурикемію, діарею, нудоту, міозит, загострення шлунку, гіперемію, сухість шкіри та зміну функції печінки (Santharam et al., 2015 [43]).
Останнім часом було розроблено декілька експериментальних моделей гіперліпідемії на тваринах для характеристики характерних сегментів патофізіологічних форм, що зображують це захворювання. У цьому дослідженні гіперліпідемія у щурів була індукована введенням HFD протягом 60 днів. Доведено, що ВЧС спричиняв значне підвищення рівня ЛПВЩ як у клінічних, так і в доклінічних дослідженнях (Katan et al., 1994 [27]; Nevin and Rajamohan, 2009 [38]). Попереднє дослідження, проведене в нашій лабораторії, виявило, що етаноловий екстракт Prosopis cineraria (L.) Druce (Leguminosae) (син. Prosopis spicigera L.) має потужну антигіперліпідемічну дію проти гіперліпідемії, спричиненої дієтою, у лабораторних щурів (Jain and Surana, 2016 [17]). Однак, про очищення, стандартизацію та оцінку антигіперліпідемічної активності етанолового екстракту P. cineraria (ET-PCF) поки не повідомляється. Отже, дане дослідження було проведено з метою виділення та характеристики ET-PCF та оцінки антигіперліпідемічного ефекту на експериментальних лабораторних щурах.
Матеріали і методи
Наркотики та хімікати
Різні ліки та хімічні речовини були отримані від комерційно доступного виробника, такого як HFD (60 ккал% жиру, # D12492, 5,24 ккал/г, Research Diet Inc., Нью-Брансвік, Нью-Джерсі, США). Набори для холестерину, тригліцеридів, HDL-C та LDL-C (Accurex Biomedical Pvt. Ltd., Мумбаї, Індія), петролейний ефір (60:80) та діетиловий ефір (Merck, Індія).
Збір рослинного матеріалу
Свіжі плоди рослини P. cineraria були зібрані з району Сатпуда штату Махараштра, Індія. Професор Л. К. Кширсагар (таксономіст, кафедра ботаніки, Науковий коледж доктора hoоґре Л. К. Доктора С.Г.П.С., Дуле, Університет Північної Махараштри, Джалгаон) проводив автентифікацію заводу.
Зразок того самого був поданий до гербарію відділу.
Приготування етанолового екстракту та виділення
Хімічна характеристика виділеної молекули
Для визначення хімічної структури виділеної сполуки використовували такі методи, як УФ, ІЧ, ЯМР 1 Н, ЯМР 13 С та РХ-МС. ІЧ-спектр реєстрували за допомогою гранул KBr на ІЧ-спектрометрі Перкіна-Елмера (Perkin-Elmer, Waltham, MA). Спектри ЯМР 1 Н та ЯМР 13 C реєстрували з використанням CDCl3 як розчинника на Bruker Advance II. 400 ЯМР та LC-MS спектри реєстрували з високою роздільною здатністю на мас-спектрометрі (система Perkin Elmer Auto) на спектрометрі SAIF Panjab University, Chandigarh, дані наведені у значеннях m/z.
Дослідні тварини
Самці щурів Sprague-Dawley (180-220 г) були отримані з коледжу тваринництва Інституту фармацевтичної освіти та досліджень імені Р. С. Пателя, Шірпур, Індія. Вони були розміщені в добре провітрюваних клітках та підтримували контрольовану температуру 22 ± 2 ° C з 12-годинним циклом світло/темрява та стандартним лабораторним контролем. Тварини мали вільний доступ до стандартного чау-чау (Pranav Agro-Industries Ltd., Санглі, Індія) та фільтрували воду за бажанням протягом експериментального протоколу. Інституційний комітет з питань етики тварин коледжу RCPIPER, Ширпур затвердив протокол дослідження (IAEC/RCPIPER/2012-13/09).
Розробка раціону, що годується щурами
Два дієтичні режими, такі як нормальна дієта на гранулах (NPD) та дієта з високим вмістом жиру (HFD, 58% жиру, 25% білка та 17% вуглеводів, у відсотках від загальної кількості ккал, ad libitum) годували щурів на початковій стадії. термін 60 днів. Склад і підготовка HFD, як було описано в інших місцях (Jain and Surana, 2016 [17]).
Експериментальний дизайн
Дослідження проводились на наступних групах тварин
Група I: Нормальні щури: щури отримували нормальну гранульовану дієту, і їх обробляли носієм (10 мг/кг дистильованої води)
Група II: Контроль HFD: щури отримували дієту з високим вмістом жиру і обробляли носієм (10 мг/кг дистильованої води)
ІІІ група: AT (1.2): щури отримували дієту з високим вмістом жиру, і їх лікували аторвастатином (1.2 мг/кг)
IV група: FA (10): щури отримували дієту з високим вмістом жиру і лікували феруловою кислотою (10 мг/кг)
Група V: FA (20): щури отримували дієту з високим вмістом жиру і лікували феруловою кислотою (20 мг/кг)
VI група: FA (40): щури отримували дієту з високим вмістом жиру, і їх лікували феруловою кислотою (40 мг/кг).
Дозу FA (10, 20 та 40 мг/кг, перорально) було обрано на основі раніше повідомленого методу (Balasubashini et al., 2004 [3]). Транспортний засіб або аторвастатин або FA вводили перорально протягом 60 днів поспіль. Після закінчення лікування щури голодували протягом ночі, і через 24 години їх послідовно знеболювали ефіром анестетика протягом приблизно 30-40 с. Кров відбирали шляхом ретроорбітальної пункції. Кожен зразок крові збирали в окремі флакони для визначення параметрів сироватки крові.
Підготовка зразків сироватки та біохімічні оцінки
Сироватку відокремлювали центрифугуванням за допомогою кріоцентрифуги Еппендорфа (модель № 5810, Еппендорф, Гамбург, Німеччина), витримували при 4 ° C і працювали зі швидкістю 7000 об/хв протягом 15 хв. Рівні ліпопротеїдів високої щільності (ЛПВЩ), ліпопротеїдів низької щільності (ЛПНЩ), тригліцеридів (ТГ) і загального холестерину (ТК) вимірювали спектрофотометром (УФ-видимий спектрофотометр, Jasco V-530, Токіо, Японія) комерційні набори реактивів згідно з процедурою, наданою виробником (Accurex Biomedical Pvt. Ltd., Мумбаї, Індія) (Adil et al., 2015 [1]; Honmore et al., 2015 [14]).