Використання Lactobacillus crispatus для виробництва пробіотичного сиру як потенційної гендерної їжі для

Методологія ролей, написання - оригінальний проект

Афілійований відділ сільськогосподарських та харчових наук, Alma Mater Studiorum - Болонський університет, Чезена, Італія

Афілійований відділ фармації та біотехнологій, Alma Mater Studiorum - Болонський університет, Болонья, Італія

Ролі Формальний аналіз

Написання ролей - огляд та редагування

Афілійований відділ фармації та біотехнологій, Alma Mater Studiorum - Болонський університет, Болонья, Італія

Методологія ролей, написання - оригінальний проект

Франческа Патріньяні,
Лоренцо Сіролі,
Карола Паролін,
Діана І. Серразанетті,
Беатріче Віталі,
Розальба Ланціотті

Цифри

Анотація

Цитування: Patrignani F, Siroli L, Parolin C, Serrazanetti DI, Vitali B, Lanciotti R (2019) Використання Lactobacillus crispatus для виробництва пробіотичного сиру як потенційного гендерного продукту для профілактики гінекологічних інфекцій. PLoS ONE 14 (1): e0208906. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0208906

Редактор: Пратьюш Шукла, Університет Махарші Даянанд, ІНДІЯ

Отримано: 5 травня 2018 р .; Прийнято: 17 листопада 2018 р .; Опубліковано: 9 січня 2019 р

Наявність даних: Всі дані, що лежать в основі дослідження, містяться в роботі.

Фінансування: Ця робота фінансувалась ГРАНТОМ ALMAIDEA 2017, наданим Болонським університетом. Одержувач гранту: Франческа Патріньяні.

Конкуруючі інтереси: Автори заявили, що не існує конкуруючих інтересів.

Вступ

Дійсно, через багато фізіологічних гендерних відмінностей (включаючи фізіологічні реакції на багато патологій), дієта та пробіотична їжа, як очікується, по-різному впливатимуть на здоров’я чоловіків та жінок, хоча модуляція їх симбіотичних мікробів [18]. До останнього десятиліття дослідження щодо жінок ігнорувались, а результати, що надходили від чоловіків, були безпосередньо спрямовані на жінок у кількох галузях медицини [21]. Однак деякі дослідження та рандомізовані контрольовані дослідження, присвячені жіночій статі, продемонстрували здатність пробіотиків, що використовуються як пероральні або вагінальні добавки, відновлюватися від глікемічного розладу у здорових вагітних жінок, інфекційного маститу, бактеріальних та сечостатевих інфекцій Candida [7, 22– 24]. Більше того, деякі літературні дані свідчать про придатність функціональної їжі для профілактики серцевих захворювань у постменопаузальному віці, поліпшення здоров’я шкіри жінки та позитивного впливу на мікробіоти кишечника та піхви ВІЛ-позитивних жінок [25–28].

Жінки репродуктивного віку часто зазнають аномалій вагінальної мікробіоти, що призводить до гінекологічних інфекцій, таких як вульвовагінальний кандидоз, бактеріальний вагіноз, аеробний вагініт та венеричні захворювання [29]. Ці порушення заважають репродуктивному здоров’ю жінки, сприяючи перериванню вагітності, передчасним пологам, передчасному розриву оболонок та хоріоамніоніту. Дані літератури показали, що лікування, засноване на загальноприйнятих підходах, не було успішним у лікуванні цих розладів, і що використання пробіотиків може бути ефективним для відновлення нормальної вагінальної мікробіоти, в якій домінують лактобактерії [30].

Матеріали і методи

Умови закваски L. crispatus та сиру

L. crispatus BC4, вагінальний ізолят, здатний протиставити Candida spp. та інших збудників сечостатевих шляхів [31,33,36], був використаний у цьому дослідженні для виробництва тестового сиру. Культури L. crispatus (37 ° С протягом 16 год) протягом доби отримували в бульйоні de Man-Rogosa-Sharpe (MRS) (Oxoid, Бейсінгсток, Великобританія) в анаеробному стані, використовуючи газогенераторний набір Oxoid. Клітини збирали центрифугуванням при 8000 × g протягом 20 хв при 4 ° C. Отриману гранулу двічі промивали сольовим розчином (0,9% NaCl у дистильованій воді) і ресуспендували в товарному молоці для посівів в промислових умовах. Комерційну ліофілізовану культуру Streptococcus thermophilus St 0.20 (Sacco S.R.L., Комо, Італія) використовували як закваску для виробництва сиру Скваккерон. Культуру інокулювали в молоко в оптимальних умовах та пропорціях, зазначених виробником.

Виробництво сиру Скваккерон

Виробництво сирів "Скваккерон" (тестовий сир, доповнений L. crispatus BC4 та контрольним сиром) здійснювалося на пілотному заводі місцевої молочної ферми (Мамбеллі, Бертиноро, Італія). Для кожного виду сиру було вироблено 100 літрів молока. нагрівають і підтримують при температурі 42 ° C і інокулюють комерційною початковою культурою S. thermophilus (кінцева концентрація: 6 log КУО/мл). Для отримання тестового сиру Скваккерон додавали L. crispatus BC4 (кінцева концентрація: 6,8 log КУО/мл). Через 40 хвилин до двох партій додавали NaCl (0,7%) та 37 мл сичугу (12000 ОД, 80% хімозину та 20% пепсину, Bellucci Modena, Італія). Через двадцять хвилин після згортання сир розрізали і переносили у традиційні форми. Сири давали відпочити до досягнення рН 5,15 і зберігали при 4 ° C. Через 1 день сири упаковували в модифіковану атмосферу і зберігали при 4 ° C протягом 18 днів.

Мікробіологічний аналіз, рН та активність води

рН та активність води вимірювали шляхом розведення 10 г сиру 10 мл дистильованої води. рН реєстрували за допомогою рН-метра Hanna Instruments 8519 (Incofar, Модена, Італія). Активність води (Aw) вимірювали за допомогою Aqualab Series 4TE (Decagon Device, Inc. Pullman, WA, США).

Протеоліз, ліполіз, летючі профілі

Досліджуваний сир, доповнений L. crispatus BC4, та контрольний сир (без L. crispatus BC4) піддавали протеолізу, ліполізу та леткому профілю. Протеоліз двох типів сиру контролювали за допомогою SDS-PAGE. Розчинні білки при рН 4,6 екстрагували з супернатантів двох типів сиру згідно з методом, запропонованим Kuchroo та Fox [44], тоді як прийняті робочі умови відповідали Tofalo та ін. [45]. Екстракцію ліпідів сиру та визначення концентрації вільних жирних кислот (FFA) проводили, як описано Ванніні та співавт. [46]. Основні леткі сполуки контролювали за допомогою методики GC/MS/SPME відповідно до методу, запропонованого Burns et al. [47]. З'єднання були ідентифіковані за допомогою доступних баз даних мас-спектрів (версія NIST 2005).

Аналіз текстурного профілю

Випробуваний сир, доповнений L. crispatus BC4, та контрольний сир (без L. crispatus BC4) піддавали текстурному аналізу в холодильному сховищі. Аналіз текстури проводили через 1, 4, 6, 8 і 13 днів зберігання в холодильнику з використанням аналізатора текстур TA DHI (Stable MicroSystem, Godalming, Великобританія) і згідно з методом, запропонованим Patrignani et al. [2].

Органолептична оцінка

Випробуваний сир, доповнений L. crispatus BC4, та контрольний сир (без L. crispatus BC4) піддавали сенсорній оцінці протягом зберігання в холодильнику. Сенсорну оцінку проводили протягом панельного тесту через 4 і 13 днів зберігання при 4 ° C. Двадцять п’ять підготовлених учасників дискусій були залучені до складу працівників місцевої молочної ферми Мамбеллі (Бертіноро, Італія) (5 учасників) та Департаменту сільськогосподарських та харчових наук Університету Болоньї, Кампус харчових наук, Чезена, Італія (20 учасників). Кампус харчової науки, де було організовано тестування, забезпечується сенсорними лабораторіями, сертифікованими відповідно до регіональних вимог. Комітет, який організував випробування, усно висловив учасників дискусій про виробництво сирних продуктів та штами, використані в дослідженні. Комітет був сформований д-ром Патріньяні, д-ром Сіролі та професором Ланціотті. Після усної згоди на проведення тесту учасники дискусії пробували по 20 г кожного зразка, поданого при 15 ° C, у контрольованих умовах згідно зі стандартом 8589 (ISO, 1988), як пропонували Gallardo-Escamilla et al. [48]. Оцінювачі оцінювали колір сиру, смак, вершковість, несмаки, гіркість та загальну прийнятність, призначаючи оцінку в діапазоні від 0 (низька або погана) до 5 (висока або дуже відмінна).