Вивчення Е
Петре Шотадзе, Тбіліська медична академія, Інститут бактеріофагів, мікробіології та вірусології ім. Г. Еліави, Грузія
* Автор-кореспондент: Тарас Габісонія
Петре Шотадзе Тбіліська медична академія
Інститут бактеріофагів імені Г. Еліави
Мікробіологія та вірусологія, Грузія
Тел .: +99577423225
Електронна пошта: [електронна пошта захищена]
Дата отримання: 03 грудня 2019 р .; Дата прийняття: 20 грудня 2019 р .; Дата публікації: 27 грудня 2019 р
Цитування: Gabisonia T, Loladze M, Zarnadze M, Kekenadze N, Lomidze M, et al. (2020) Дослідження збудників кишкової палички, що спричиняють інтенціональні інфекції, та використання препарату бактеріофагів-фагу. Arch Clin Microbiol Vol. 11 No 1:99
Анотація
За даними Всесвітньої організації охорони здоров’я (ВООЗ) близько 2 мільярдів людей щорічно хворіють на кишкові інфекції. Патогенні мікроорганізми, які поширюються через їжу та воду, є основними причинами захворюваності та смертності; вони призводять до смерті приблизно 1,8 мільйона щороку. Внаслідок згаданої проблеми особливе значення має проведення мікробіологічних та молекулярних досліджень бактеріальних збудників, що викликають кишкові інфекції. Одним з основних збудників, що поширюється через води, є сорт сальмонел, патогенно кишкова паличка та шигела. Моніторинг збудників харчових продуктів та води сприятиме процесу зменшення їх частоти в навколишньому середовищі, що саме по собі зменшить ризик поширення захворювань, спричинених згаданим збудником, серед людей. Рання ідентифікація цих збудників має життєво важливе значення для швидкого та ефективного лікування.
Ключові слова
Збудники хвороб; Кишкова паличка
Вступ
Альтернативою антибіотикам є комерційні фагові ліки, серед яких бактеріофаг Coli, який містить специфічні бактеріофаги, що мають специфічні бактеріофаги проти патогенної кишкової палички. Використання препаратів на основі фагів нешкідливо для організму людини, оскільки фаги мають лише лізисну активність щодо патогенних бактерій [11,12].
Представлена робота спрямована на виявлення патогенної кишкової палички, що викликає кишкові інфекції, у клінічних зразках, а також у продуктах харчування (яловичий фарш). Визначити чутливість антибіотиків до згаданих штамів також поряд із комерційним фаговим ліками-Coli Phage, структура яких містить бактеріофаги проти патогенної кишкової палички. Крім того, для визначення чутливості патогенних штамів до цього препарату.
Матеріали і методи
Виділення штамів кишкової палички
Для виділення штамів E. coli петлю з розведених зразків інокулювали в агар МакКонкі та інкубували при 37 ° C протягом 18-24 годин. Колонії бактерій були ідентифіковані на основі загальної морфології, ряду колоній та гемолітичної картини. Для виявлення збудників хвороб колонії проводили відповідні біохімічні та серологічні дослідження.
Серогрупування ізолятів кишкової палички
Серологічні групи кишкової палички були ідентифіковані серологічно за допомогою тесту на аглютинацію слайдів із використанням стандартних полівалентних та одновалентних антисивороток E.coli (O114, O86, O26, O55, O36, O111, O119, O125, O126, O142, O157) згідно з Edwards and Ewing (1972 ) [13].
Тестування на чутливість до антимікробних препаратів
Щоб проаналізувати антибіограмний профіль ізолятів, усі виділені штами Е. coli були протестовані на чутливість до 15 різних антимікробних засобів, які найбільш широко використовуються в клініках: пеніцилін (P), ампіцилін (A), карбеницилин (Cb), ампіокс (Ap) хлорамфенікол (C), стрептоміцин (S), тетрациклін (T), гентаміцин (G), канаміцин (K), еритроміцин (E), метицилін (M), фортум (F), цефамезин (Cf), кетотефен ( Kt), клафоран (Cl) Азитроміцин (Az), Ципрофлоксацин (Cip), Іміпенем (Im), Цефазолін (Cef), Полімоксин (Pm). Сприйнятливість цих ізолятів до антимікробних засобів проводили методом дискової дифузії відповідно до стандартів Національного комітету з клінічних лабораторних стандартів [14].
Система ідентифікації бактерій кишкової групи
Представляє стандартизовану систему, яка містить 21 міні біохімічний тест і застосовується для ідентифікації бактерій шлунково-кишкової групи та інших грамнегативних бактерій.
Принцип
Api 20 E складається з 20 мікропробірок, які містять зневоднені субстрати. Бактеріальна суспензія, введена в смужку, потрапляє у реакцію з даним субстратом. Під час інкубації колір змінюється, що може бути визначено безпосередньо або шляхом додавання реагентів.
Процес зчитування реакцій здійснюється за допомогою відповідної інтерпретаційної таблиці.
Під час кумуляції позитивних результатів виробляється цифровий профіль, і за допомогою відповідного аналітичного каталогу визначається назва та різновид причини.
Виділення бактеріофагів
Бактеріофаги виділяли зі стічних вод фільтруванням, після чого додавали до фільтрату бульйонний концентрат і 18 год культури різних штамів (досліджувані штами). Після 24-годинної інкубації в термостаті суміш фільтрували через фільтри з діаметром пор 0,45 мкм (Millipore, США), а фільтрати точково тестували на наявність фагів шляхом нанесення фільтрату (0,1 мл) на газон досліджуваного штаму на твердому живильному середовищі. Результат вважався позитивним, якщо на газоні була зона лізису через 18-24 год вирощування при 37 ° С [15]. Високоспецифічні штами бактеріофагів були відібрані та відібрані пластинчастим методом за Gracia [16].
Клонування бактеріофагів шляхом повторної ізоляції одиночного нальоту