Захисна дія тривалого пригнічення ангіотензину II Американський журнал фізіології-Серце і
Анотація
природний процес старіння пов'язаний з поступовою модифікацією і, зрештою, втратою функції органу. Ці зміни є загальними для всіх видів. Загалом існує взаємозв'язок між структурними та функціональними змінами, пов'язаними зі старінням. У ссавців такі дегенеративні процеси, як артеріосклероз, розвиток старечих бляшок у мозку та заміщення функціональної паренхіми фібросполучною тканиною в різних органах, вважаються проявами старіння (19, 41).
Ультраструктурно зменшення кількості клітинних органел, таких як мітохондрії, є загальним процесом старіння (13, 21, 36). Довічне виробництво вільних радикалів може зіграти головну роль у зменшенні кількості, як у структурних, так і в функціональних модифікаціях мітохондрій (6, 20, 38). Широко постулюється, що активні форми кисню (АФК) спричинені причинно-наслідковим процесом старіння (19, 20). У цьому сенсі попередні дані (4, 17) підтвердили, що активність синтази оксиду азоту (NOS) в аорті та оксиду азоту (NO) з віком зменшується, тоді як хронічне тривале введення інгібіторів ангіотензину II (ANG II) підтримує ендотеліальна активність NOS у старих тварин. Більше того, було виявлено, що мітохондрії із сердець вікових щурів, хронічно оброблених інгібіторами ANG II, мали підвищену активність NOS та зменшували утворення пероксиду водню порівняно з контролем (10).
Система ренін-ангіотензин (RAS) завдяки своєму активному агенту ANG II надає велику різноманітність фізіологічних дій, що включають регуляцію артеріального артеріального тиску, гомеостаз натрію та води та стимуляцію інших ендокринних систем. Деякі дії здійснюються як ендокринна система. За останні кілька десятиліть величезна кількість інформації розкрила безліч шкідливих серцево-судинних та ниркових ефектів, пов’язаних із надлишком АНГ II. Зараз відомо, що цей пептид діє як паракринний, аутокринний та внутрішньокринний фактор, механізми дії якого варіюються від збудження або пошкодження цілих органів до впливу на ріст та функцію клітин, зміни внутрішньоклітинних сигнальних шляхів та сприяння змінам позаклітинного матриксу. Нещодавно шкідливі ефекти ANG II у серці були пов’язані з активацією адаптерного білка p66 Shc (18).
Протягом останніх років ми досліджували шкідливі наслідки старіння на органи-мішені у звичайних самців щурів Wistar. Одночасно ми проаналізували захисний ефект хронічного пригнічення ANG II або за допомогою CEI (еналаприл), або AT1RB (лозартан), що вводиться після відлучення від цих змін. Наведені результати описують серцево-судинні зміни, спричинені старінням у нормальної щури, та захисний ефект, який спостерігається в цій системі внаслідок тривалого інгібування ANG II кожним із цих фармакологічних засобів. Більше того, ми також визначили вплив кожного лікування на тривалість життя у нормальних щурів.
Щури та експериментальний дизайн для лікування наркотиками
Самців щурів Wistar використовували та отримували догляд відповідно до та за ліцензією, наданою нашим Інституційним комітетом з догляду та використання тварин та відповідно до Посібник з догляду та використання лабораторних тварин (Національний інститут охорони здоров’я, переглянутий у 1996 р.). Тварини ( = 120) були випадково розділені на три рівні групи після відлучення: 1) контроль (водопровідна вода для пиття), 2) лозартан (30 мг · кг −1 · день -1 у питній воді), та 3) еналаприл (10 мг · кг -1 раз на добу -1) (обидва препарати від Merck, Rahway, NJ). Щурів утримували групами по п’ять осіб у клітці з 12: 12-годинним циклом світло-темрява та діапазоном температур 20–22 ° C. Чау-чау та питний матеріал були у вільному доступі.
Вимірювання систолічного артеріального тиску та ваги серця та аорти
Систолічний артеріальний тиск (SBP) вимірювали один раз на місяць протягом усього експериментального періоду у свідомих щурів при 30 ° C за допомогою плетизмографії хвостових манжет, використовуючи датчик тиску (Narco Biosystems, Houston, TX), підключений до осцилографа. Споживання води та масу тіла визначали двічі на тиждень для коригування прийому препарату. Після 6 місяців лікування 10 тварин з кожної групи вбивали під пентобарбітальною анестезією (40 мг/кг). Подібним чином, після 18 місяців, 10 щурів від кожної групи було вбито. Серце, аорту та брижову артерію вирізали, очистили та зважили. Після видалення передсердь правий шлуночок відокремлювали та зважували.
Довжина хвоста
Довжина хвоста як міра зростання (14) вимірювалась стандартною метричною лінійкою від заднього проходу тварини до кінчика хвоста тим самим експериментатором для забезпечення рівномірності.
Гістологічна оцінка
Для гістологічного визначення лівий шлуночок і та ж частина грудної аорти були виділені, вміщені в 10% формальдегід і вбудовані в парафін. Гістологічні зрізи фарбували гематоксилін-еозином та трихромом Массона. Колаген III типу також оцінювали за допомогою імуногістохімії (ІГХ) у лівому шлуночку. Його кількісно визначали за допомогою моноклональних антитіл типу III до колагену (Biogenex, San Ramon, CA), у розведенні 1: 100. Ширину аорти оцінювали за допомогою IHC, використовуючи моноклональні антитіла до α-актину (Sigma, Сент-Луїс, Міссурі).
Морфометричний аналіз проводили в обох тканинах; до них належали поперечний діаметр кардіоміоцитів і ширина судини. Було зроблено двадцять гістологічних зрізів кожного органу та проаналізовано 10 судинних структур на кожен гістологічний зріз.
Гістологічні зрізи аналізували за допомогою світлового мікроскопа Nikon E400 (Nikon Instrument Group, Мелвілл, Нью-Йорк). Для оцінки було використано програмне забезпечення Image-Pro Plus 4.5.1.29 (Media Cybernetics, Silver Spring, MD) 1) ширина аорти та площа аорти, 2) діаметр міокардіоцитів і площа поперечного перерізу, і 3) субендокардіальний та субперикардіальний фіброз.
Аналіз проводив один дослідник, засліплений експериментальними групами.
Морфометричні прийоми
Ширина аорти.
Поперечний переріз посудини вимірювали перпендикулярною лінією, що йде від зовнішнього до внутрішнього периметра. Отримані дані виражаються в мікрометрах.
Аортальна область.
Виміряно чотири протилежні ділянки аорти на посудину, за винятком адвентиції. Отримані дані виражаються в квадратних міліметрах.