Давньокитайський трав’яний відвар, що містить Angelicae Sinensis Radix, Astragali Radix, Jujuba

1 кафедра біоінженерії, медичний університет Zunyi, кампус Чжухай, Чжухай, Гуандун, 519041, Китай

2 Інститут контролю за наркотиками Ганьсу, Ланьчжоу, Ганьсу, 730070, Китай

3 Шеньчженьська ключова лабораторія їстівних та лікарських біоресурсів, НДІ, Гонконгський університет науки і техніки, Шеньчжень, 518057, Китай

4 Відділ наук про життя, Центр китайської медицини, Гонконгський університет науки і техніки, Затока Клір Вотер, Гонконг

5 Департамент біології, Університет Ханьшань, Чаочжоу, Гуандун 521041, Китай

Анотація

1. Вступ

Ожиріння характеризується як аномальна або надмірно накопичена жирова тканина, яка, як вважають, зумовлена різними факторами, включаючи генетичні та екологічні. Частота ожиріння зростає і стає звичайним явищем як у країнах, що розвиваються, так і в розвинених країнах, що створює великі труднощі для медичних працівників. Люди, що страждають ожирінням, можуть зазнати високого ризику порушення метаболізму, діабету та ряду видів ракових захворювань [1, 2]. Терапевтичні методи лікування ожиріння пропонуються протягом десятиліть. Обмеження споживання вуглеводів раніше вважали найбільш ефективною стратегією проти ожиріння; однак, як повідомляється, це лікування негативно впливає на психічний розвиток [3, 4]. З іншого боку, побічні ефекти популярних синтетичних ліків для схуднення, наприклад, фентермін-топірамат та лоркасерин, зазвичай зменшують ризик гепаторенального синдрому та призводять до зниження якості життя пацієнта [5].

В організмі людини є два типи жирових тканин, тобто біла жирова тканина (WAT) і коричнева жирова тканина (BAT). Основними функціями ВАТ є нагрівальна ізоляція, буферна механічна подушка і, нарешті, накопичення енергії. ВАТ діє як паливо для енергетичного дисбалансу, коли споживана енергія менша, ніж енергія, що надходить; тому WAT розглядається як вирішальний компонент, що сприяє ожирінню [6]. BAT, з іншого боку, прискорює витрату енергії і, нарешті, бореться з ожирінням [7, 8]. Фізичні вправи - це одна із типових процедур схуднення та переформування тіла за рахунок пришвидшення забарвлення ВАТ та стимулювання окислення жирних кислот [9]. Високий рівень експресії білка 1, що роз’єднує мітохондрії (UCP1), є ознакою побуріння ВАТ [9]. Крім того, активований проліфератором пероксисом рецептор (PPARγ) та активований рецептором-гамма-коактиватором 1 проліфератора пероксисоми (PGC1α) - це два фактори транскрипції в модулюванні експресії генів, пов’язаних з адипогенним шляхом, які високо виражені в BAT [10]. З іншого боку, гени карнітинпальмітоїлтрансферази I A (CPT1A) та гормоночутливої ліпази (HSL) можуть посилювати мітохондріальну активність та стимулювати окислення жирних кислот, і тому вони класифікуються як ознака окислення жирних кислот [11].

Стародавня трав'яна суміш, написана Чень Суан династії Сун (1155 р. н. е.) у “Ченсуань Фуке Буджі”, Відомо, що покращує “Ци” та “Кров”, іменовані як Данггі Буксу Тан (DBT1155). DBT1155 складається із чотирьох трав: Angelicae Sinensis Radix (ASR), Astragali Radix (AR), Jujuba Fructus (JF) і Zingiberis Rhizoma Recens (ZRR) у ваговому співвідношенні 36: 30: 15: 20. Функції проти ожиріння куркумін- про збагачені ZRR широко повідомлялося, і ця рослинна формула показала накопичення антиліпідів у нашому попередньому дослідженні. Таким чином, тут перевіряли функції проти ожиріння DBT1155 у культивованих адипоцитах 3T3-L1.

2. Матеріали та методи

2.1. Приготування рослинного екстракту

Сира трава кореня Astragali membranaceus змінний. mongholicus (AR), корінь Angelica sinensis (Олів) Diels. (ASR), плід Ziziphus jujuba Резюме. Jinsixiaozao (JF) і кореневище Zingiber officinale Роско (ZRR; імбир) було зібрано та ідентифіковано в 2013 році. Зразок ваучера AR, ASR, JF та ZRR зберігався в Центрі китайської медицини HKUST. Для приготування відвару DBT1155 використовували AR, ASR, JF та ZRR у ваговому співвідношенні 36: 30: 15: 20. Суміш двічі кип'ятили у 8 обсягах води. П'ятдесят грамів ZRR також двічі варили у воді, кожен з 8 обсягами води. Цей препарат був перевірений у попередніх дослідженнях [20, 21]. Всі зразки сушили ліофілізацією і ресуспендували у воді з кінцевою концентрацією 100 мг/мл, які витримували при -80 ° C.

2.2. Аналіз ВЕРХ та хімічні кількісні оцінки

2.3. Клітинні культури

Клітини фібробластів миші 3T3-L1 (CL-173) отримували з ATCC (Манассас, штат Вірджинія) і підтримували при 37 ° С у насиченому водою інкубаторі, що містить 5% СО2 та в DMEM, доповненому 4,5 г/л глюкози, 10% FBS, 100 ОД/мл пеніциліну та 100 μг/мл стрептоміцину. Індукція ліпогенної диференціації була детально описана в попередньому дослідженні [24]. Коротко, культивовані клітини обробляли дексаметазоном (1 μM, Sigma-Aldrich, St Louis, MO), інсулін (1.8 μM, Sigma-Aldrich) та дибутрил-цАМФ (300 μM, Sigma-Aldrich) протягом 72 годин для індукції ліпогенезу. Культури встановлювали як день 0 і замінювали живильним середовищем, що містить інсулін (1.8 μМ) кожні два дні. На 10 день близько 80% культур індукували до вмісту тригліцеридів. Процедури, включаючи негативний контроль (лише 0,02% ДМСО), коктейлі (1,8 μМ розиглітазону та трийодтироніну), низьку концентрацію DBT (DBT-L, 0,125 мг/мл) та високу концентрацію DBT (DBT-H, 1,0 мг/мл) давали диференційованим культурам (на 10 день) протягом 72 годин . Якщо не описано інше, всі культуральні реагенти були придбані в Invitrogen Technologies (Waltham, MA).

2.4. Життєздатність клітин

Життєздатність клітин вимірювали методом МТТ. Коротше кажучи, клітини культивували в 96-лунковому планшеті. Після медикаментозного лікування протягом зазначеної тривалості розчин МТТ додавали в культури в кінцевій концентрації 0,5 мг/мл; після інкубації протягом 2 годин продукція фіолетового кристалу розчинялася розчинником ДМСО. Вимірювали поглинання при 570 нм.

2.5. Олійно-червоний O фарбування

Масляно-червоний O при 0,2% у ізопропанолі фільтрували. Експериментально культивовані клітини промивали PBS, фіксували параформальдегідом (4% у PBS, Sigma-Aldrich) протягом 5 хв, інкубували з фарбуванням Oil Red O протягом 30 хв і двічі промивали PBS. Забарвлений тригліцерид (ТГ) розчиняли в ізопропанолі та вимірювали при поглинанні 490 нм [24].