Докази лікування вбудовуванням кетогута акупунктурою та видалення гена TRPV1, що збільшує контроль ваги

  • Журнал Головна
  • Поточне питання
  • Ранній Інтернет
  • Найчитаніші
  • Найчастіше цитовані (розміри)
    • Останні два роки
    • Разом
  • Найчастіше цитовані (CrossRef)
    • Минулий рік 0
    • Разом
  • Соц.медіа
    • Минулий місяць
    • Минулий рік
    • Разом
  • Архів
  • Інформація
  • Онлайн подання
  • Інформація для авторів
  • Редагування мови
  • Інформація для рецензентів
  • Редакційна політика
  • Редакційна академія
  • Цілі та сфера застосування
  • Абстрагування та індексування
  • Бібліографічна інформація
  • Інформація для бібліотекарів
  • Інформація для рекламодавців
  • Передруки та дозволи
  • Зверніться до редактора
  • Загальна інформація
  • Про Спандідос
  • Конференції
  • Вакансії
  • Зв'язок
  • Правила та умови
  • Автори:
    • Чаня Інпразіт
    • Ю-Чуен Хуан
    • І-Вень Лінь

  • Ця стаття згадується в:

    Анотація

    Вступ

    Перехідний потенціал рецептора ванілоїд 1 (TRPV1) є одним із 6 членів підродини катіонного каналу. TRPV1 є першою одиницею в цій послідовності, яка була зазначена і найбільш чітко охарактеризована завдяки своїй здатності діяти як гомотетрамерний, неселективний, проникний кальцію катіонний канал (10,11). TRPV1 добре відомий своєю роллю в ноцицепції та запаленні, яке може виникати при зниженому рівні рН (pH 6,0) та високих температурах (43 ° C) (12). Окрім уже згаданих факторів, існують і інші фактори, пов'язані з функцією TRPV1, такі як патологічне збільшення ваги та певні психосоматичні розлади (13,14). Ця реакція викликає сигнальний каскад у нейронах через активацію протеїнкіназ, включаючи активовану мітогеном протеїнкіназу (MAPK) та циклічний білок, що зв'язує AMP-відповідь (CREB) (15). Ці сімейства протеїнкіназ є вторинними вісниками, які опосередковують внутрішньоклітинну передачу сигналів. Ці кінази включають протеїнкіназу А (РКА) та протеїнкіназу С (РКС). Ці сигнальні каскади важливі для підтримання гомеостазу і можуть стимулюватися та/або гальмуватися різними факторами, такими як акупунктура. Ряд патологічних механізмів пов'язаний з порушенням регуляції одного, багатьох або всіх факторів, пов'язаних з цими сигнальними шляхами (16,17).

    лікування

    Матеріали і методи

    Дослідні тварини
    Лікування вбудовуванням кетогута Acupoint
    Збір зразків

    У процесі збору зразків після того, як суб'єкти голодувались протягом 12 годин, 38 суб'єктів евтаназували 5% ізофлураном шляхом інгаляції. Зразки крові відбирали з орбітальної пазухи у 3 мл скляні пробірки BD Vacutainer з 5,4 мг K2 EDTA та 2 мл скляні пробірки BD Vacutainer з 3 мг фториду натрію та 6 мг Na 2 EDTA. Зразки центрифугували при 1500 × g протягом 15 хв при 25 ° C, після чого відокремлену плазму збирали в пробірки для мікроцентрифуги об'ємом 1,5 мл і зберігали при -80 ° C. Після забору зразків крові тваринам обезголовили, а мозок вирізали для вестерн-блот-аналізу. Потім жирові тканини збирали з різних областей тіла; BAT з міжлопаткової області, підшкірний WAT (sWAT) з обох боків області флангу та вісцеральний WAT (vWAT) з перигонадальної області (26). Нарешті, печінку та обидві нирки негайно видалили та зважили.

    Вестерн-блот-аналіз

    Вестерн-блот-аналіз - це аналітична методика, яка широко використовується для вивчення білків. Цей метод, вперше описаний Towbin та співавт. (27), використовує антитіло, яке розпізнає і зв'язується з епітопом, унікальним для цікавого білка. У цьому дослідженні після жертвоприношення гіпоталамус, префронтальна кора (ПФК) та НТС негайно розтинали та заморожували у льоду перед зберіганням при -80 ° C. Загальні білки готували шляхом стирання та лізису в розчині 50 мМ Трис-HCl рН 7,4, 250 мМ NaCl, 1% NP-40, 5 мМ ЕДТА, 50 мМ NaF, 1 мМ Na 3 VO 4, 0,02% NaN 3 і 1X коктейль інгібітора протеази (Amresco, LLC) перед центрифугуванням при 10000 × g протягом 10 хв при 4 ° C. Білки з кожного зразка завантажували в 8% гелі для електрофорезу в гліциновому гелі SDS-Tris і переносили на мембрани PVDF, які потім блокували 5% нежирного молока в буфері TBS-T (10 мМ Tris pH 7,5, 100 мМ NaCl, 0,1 % Твін-20) та інкубували протягом 1 години при кімнатній температурі з наступними первинними антитілами: Анти-TRPV1 (