Харчова добавка до мембрани яєчної шкаралупи інкубаторів покращує продуктивність птиці та забезпечує

Підрозділ Підприємство з виробництва продукції птиці та досліджень безпеки продукції, Служба сільськогосподарських досліджень, USDA, Файєтвілль, Арканзас, Сполучені Штати Америки, Департамент птахівництва, Університет Арканзасу, Файєтвілль, Арканзас, Сполучені Штати Америки

Підрозділ досліджень птахівництва та досліджень безпеки продукції, Служба сільськогосподарських досліджень, USDA, Файєттвілль, Арканзас, Сполучені Штати Америки

Афілійований відділ птахівництва, Університет Арканзасу, Файєттвілль, Арканзас, Сполучені Штати Америки

Афілійований відділ ветеринарної медицини, кампус Рончан Південно-Західного університету, округ Рунчанг, Китай

С. К. Маккар,
N. C. Rath,
Б. Паккялакшмі,
З. Ю. Чжоу,
Г. Р. Хафф,
А. М. Доногху

Цифри

Анотація

Цитування: Makkar SK, Rath NC, Packialakshmi B, Zhou ZY, Huff GR, Donoghue AM (2016) Харчова добавка до мембрани яєчної шкаралупи інкубаторів покращує продуктивність птиці та забезпечує стійкість проти стресу ендотоксинів. PLoS ONE 11 (7): e0159433. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0159433

Редактор: Крістофоро Скавоне, Університет Сан-Паулу, БРАЗИЛІЯ

Отримано: 1 квітня 2016 р .; Прийнято: 1 липня 2016 р .; Опубліковано: 27 липня 2016 р

Це стаття з відкритим доступом, вільна від авторських прав, і може бути вільно відтворена, розповсюджена, передана, модифікована, побудована або використана будь-ким в будь-яких законних цілях. Робота доступна під присвятою Creative Commons CC0 у відкритому доступі.

Наявність даних: Усі відповідні дані знаходяться в газеті та в допоміжних файлах.

Фінансування: Це дослідження було проведено в рамках внутрішньошкільного дослідження USDA. Додаткове фінансування для цього дослідження не отримано.

Конкуруючі інтереси: Автори заявили, що не існує конкуруючих інтересів.

Вступ

Матеріали та метод

Приготування ГЕСМ та його стерилізація

Графік експериментів

Протоколи досліджень на тваринах були схвалені Інституційним комітетом з догляду та використання тварин (IACUC) Університету Арканзасу. Щойно вилуплені пташенята чоловічої статі Cobb 500 вирощували на підлогових загонах з приблизною щільністю 0,8 квадратних футів на птицю з графіком 23: 1 світло: темно та забезпечували кормом, сформульованим відповідно до специфікації Національної дослідницької ради [21] та води за бажанням. HESM додавали на рівні 0,5% до початкової дієти для бройлерів на основі попередніх експериментів. У дослідженні 1 впливали сирий HESM та порівнянний рівень порошку сироваткового білка на ефективність росту та інші фізіологічні параметри 5-тижневих курей, як описано далі. У дослідженнях 2 і 3 порошок HESM стерилізували етанолом і використовували як кормову добавку, де оцінювали вплив ліпополісахариду Salmonella typhimurium (LPS) через 4 та 24 години його введення. У всіх експериментах курчат спочатку годували дієтами, що містять добавки, протягом 14 днів після вилуплення, а потім переводили на звичайні раціони протягом усього часу до розтину. Щодня спостерігали за птахами на предмет смертності, добробуту та щотижня оцінювали масу тіла (ВТ) та споживання корму. BW птахів вимірювали перед ін’єкцією LPS та перед вскрыттям у дослідженнях 2 та 3.

У дослідженні 1 72 одноденних курчат було розділено на 3 групи, у кожній з 24 птахів у двох копіях. Три групи отримували дієти таким чином: 1) контрольний корм без добавки, 2) корм, що містить 0,5% порошку сироваткового білка як вторинний контроль, щоб визначити, чи був ефект обумовлений лише білковою добавкою, і 3) корм, що містить 0,5% HESM. До розтину у 6 птахів з кожної ручки (12/група) кровоточили серцевою пункцією, кров, зібрану в ЕДТА, що містить пробірки Vacutainer для гематології та пробірки для швидкої сироватки (BD Falcon), для аналізів клінічної хімії відповідно [14]. Птахів вбили при вивиху шийки матки.

У дослідженнях 2 та 3 ефективність росту птахів вимірювали разом з іншими фізіологічними змінами, включаючи вплив Salmonella typhimurium LPS (кішка # HC4060 Sigma-Aldrich, Сент-Луїс, Міссурі). У дослідженні 2 п’ятдесят денних курчат розподіляли у 2 групи і годували кормом з і без 0,5% стерильної добавки HESM протягом 2 тижнів після вилуплення, як описано вище, а потім переходили на звичайні корми для решти випадків у віці до 5 тижнів. На 34 день 12 птахам у кожній групі вводили ЛПС у концентрації 1 мг/кг ТБ у фізіологічному розчині внутрішньом’язово в стегно, тоді як решта отримували рівні обсяги введення сольового розчину. Ефект LPS контролювали візуально протягом 5 годин після ін’єкцій BW, виміряних через 24 години ін’єкції. До вскрыття у всіх курчат (n = 12/лікування) брали кров для гематологічних та клінічних хімічних аналізів. При розтині реєстрували ваги селективних органів у всіх птахів.

У дослідженні 3 визначали вплив ЛПС на експресію селезінки селективних генів з відомою зв'язком з різною імунною функцією. Кури як контрольної, так і HESM-групи отримували або фізіологічний розчин, або ін’єкцію LPS, як описано раніше. Через чотири години після ін'єкції по 6 курчат від кожної групи було вбито, а селезінки поміщені в рідкий азот для екстракції РНК, а решта вбиті через 24 год для фіксації ваги BW та ваги органів відповідно.

Розтин

Для розрахунку відсотка відносно BW використовували ваги печінки, серця, селезінки та бурси від усіх птахів. У дослідженні 2 довжину клубової кишки під петлею підшлункової залози висікали з кожного з 6 контрольних і годували птахів HESM і фіксували в рідині Карноя для

5 год, переносили на 70% спирт, потім обробляли для гістології. Шість мікронних парафінових зрізів фарбували періодичним кислотним фарбуванням гематоксиліном Шиффа (PAS) та досліджували на предмет візуального здоров’я, слизової секреції та грубих відхилень за допомогою візуального спостереження. Зрізи були сфотографовані в мікроскопі BX Olympus.

Гематологія

Кількість клітин крові разом із вмістом гемоглобіну, середнім корпускулярним об'ємом (MCV), гематокритом, мікрогематокритом (MCH), шириною розподілу еритроцитів (RDW), значення вимірювали за допомогою антикоагульованої крові EDTA за допомогою системи аналізу крові Cell-Dyn 3500 Abbott Park, IL), стандартизований для крові птахів.

Аналізи сироватки

Метаболічні параметри сироватки визначали за допомогою аналізатора клінічної хімії (Ciba Corning Diagnostics Corp, Medfield, MA). Концентрації кортикостерону вимірювали за допомогою набору імуноферментних аналізів Detect X (Arbor Assays, Ann Arbor, MI) та заздалегідь визначених розведень сироватки [14]. Концентрації IgM, IgG та IgA аналогічно визначали за допомогою відповідних аналітичних наборів від лабораторії Bethyl (Монтгомері, штат Техас) із сироваткою, розведеною до 1: 1000 з буфером для IgA, 1: 50000 для IgG та 1: 20000 для IgM відповідно. Концентрації антитіл у сироватках розраховували за відповідними стандартними кривими.