In Vivo гіпохолестеринемічний ефект екстракту води з ферментованого червоного дріжджового рису MARDI у високій концентрації

1 Інститут біологічних наук, Університет Путра, Малайзія, 43400 Серданг, Селангор, Малайзія

екстракту

2 Кафедра технології біопроцесу, Факультет біотехнології та біомолекулярних наук, Університет Путра, Малайзія, 43400 Серданг, Селангор, Малайзія

3 Aning Biotech Corporation Sdn Bhd., 13G & 13-1, Jalan LJ3, Lembah Jaya Industrial Park, 68000 Ampang, Selangor, Malaysia

4 Школа біомедичних наук, Університет Ноттінгема, кампус Малайзії, Jalan Broga, 43500 Semenyih, Selangor, Малайзія

5 Відділ клітинної та молекулярної біології факультету біотехнології та біомолекулярних наук, Університет Путра Малайзія, 43400 Серданг, Селангор, Малайзія

6 Департамент біотехнології біопроцесу, Малайзійський інститут розвитку сільського господарства, 43400 Серданг, Селангор, Малайзія

7 Дослідницький центр біотехнологій, Малайзійський інститут розвитку сільського господарства, 43400 Серданг, Селангор, Малайзія

Анотація

Ферментований червоний дріжджовий рис традиційно вживають як ліки в азіатській кухні. Це дослідження мало на меті визначити в природних умовах гіпохолестеринемічний та антиоксидантний ефект ферментованого червоного дріжджового рисового водного екстракту, виготовленого за допомогою Малайзійського інституту досліджень та розвитку сільського господарства (MARDI) Монаск пурпуровий штами у мишей, які харчуються дієтою з високим рівнем холестерину. Відсутність монаколіну-k, нижчий рівень γ-аміномасляна кислота (ГАМК), підвищений вміст загальних амінокислот та антиоксидантна активність були виявлені у водному екстракті рисової рисової риси MARDI (MFRYR). В природних умовах Лікування MFRYR на мишах з гіперхолестеринемією зафіксувало подібний ефект зниження ліпідів, як екстракт комерційного червоного дріжджового рису (CRYR), оскільки це допомагає знизити підвищений рівень ферменту печінки в сироватці крові та підвищити рівень антиоксидантів у печінці. Цей ефект також був пов'язаний з регуляцією аполіпопротеїнів-Е та пригніченням експресії фактора фон Віллебранда. Підсумовуючи, збагачений антиоксидантом та амінокислотою MFRYR без монаколіну-k виявив подібний гіпохолестеринемічний ефект, як CRYR, багатий монаколіном-k та ГАМК.

1. Вступ

Червоний дріжджовий рис, продукт с Монаск бродіння, традиційно застосовується як ліки (для поліпшення травлення та кровообігу), консервант (сир з китайської квасолі/сир, м’ясо, риба тощо), а також барвник та інокулянт для алкогольних напоїв (Анчу, сомсу) в азіатських країнах з давніх часів [1]. Він може бути отриманий за допомогою зануреної або твердої системи бродіння. Рис є загальним ферментаційним середовищем [2] для отримання Монаск продукти бродіння [3], крім інших сільськогосподарських продуктів, включаючи діоскорею, маніоку, солодку картоплю, картоплю [4], ячмінь [5], суміш рису та часнику [6], сою [7], кукурудзяну муку, арахісове борошно, залишки кокосового горіха, і соєвий шрот. Монаколін-k (ідентичний ловастатину) був найбільш часто стандартизованою сполукою монаколіну у ферментованому червоному дріжджовому рисі завдяки його властивості знижувати ліпіди за рахунок інгібування 3-гідрокси-3-метилглутарил-коферменту А редуктази [8]. Інші вторинні метаболіти, включаючи

-Також повідомляється, що аміномасляна кислота (ГАМК), димерумова кислота та монасцин, які є потенційними гіпотензивними, антиоксидантними та протизапальними агентами, також містять ферментований червоний дріжджовий рис [4, 9, 10].

2. Матеріали та методи

2.1. Матеріали

Холестерин, 94%, був придбаний у Sigma Aldrich (США). Комерційний екстракт червоного дріжджового рису (CRYR) був придбаний в місцевій аптеці. Гіпоксантин, ксантиноксидаза, супероксиддисмутаза, реагент Фолін-Ціокальтеу, хлорид алюмінію, нітрат натрію, аскорбінова кислота та галова кислота були отримані від Sigma Aldrich (США). Реактив Гриса був від Invitrogen (США). Всі використовувані розчинники були аналітичного реагенту або ВЕРХ. Монаск пурпуровий Інокулюм штаму був отриманий із центру збору культур MARDI.

2.2. Приготування екстракту з водного рисового рисового червоного дріжджів MARDI (MFRYR) з використанням Монаск пурпуровий Штами

Поламаний рис (1000 г) промивали 6 разів і замочували в холодній воді при кімнатній температурі на 18 год. Замочений битий рис промивали, автоклавували при 121 ° С протягом 20 хв і охолоджували до кімнатної температури. Потім розбитий рис інокулювали MARDI Монаск пурпуровий штамів та інкубували аеробно при 32 ° C протягом 16 днів. Потім його збирали, сушили в печі, подрібнювали в порошок і екстрагували деіонізованою водою. МАРДІ Монаск пурпуровий штам ферментований червоний дріжджовий рисовий водний екстракт (MFRYR) ліофілізували за допомогою морозильної сушарки Virtis BenchTop (SP Industries, Inc., США) і зберігали в холодильній камері при температурі 4 ° C до аналізу. Неферментований рис, MFRYR та комерційний екстракт червоного дріжджового рису (CRYR) піддавали кількісному визначенню монаколіну-k та ГАМК за допомогою методу UPLC. Аналіз монаколіну-k проводили за допомогою системи Acquity UPLC (Waters Corp., США), оснащеної колоною RP-18 (1,7

м, 2,1 × 100 мм, Waters Acquity, США) та градієнтною рухомою фазою 100% ацетонітрилу (елюенти A) та 0,1% трифтороцтової кислоти (елюенти B). Режим лінійного градієнта проводили (швидкість потоку 0,2 мл/хв) від 35% до 75% елюенту А протягом 7,8 хв і підтримували на рівні 75% елюенту А ще 3,2 хв, перш ніж повернути його назад до 35% елюенту А протягом 0,8 хв. Загальний час аналізу встановлювали на 14 хв з об'ємом ін'єкції 1 л і температурою колонки 30 ° С. Монаколін-k було виявлено за допомогою детектора фотодіодної маси (PDA) при 237 нм з діапазоном виявлення від 210 до 350 нм. З іншого боку, концентрацію ГАМК та амінокислот визначали згідно з Алі та співавт. [16]. в пробірці антиоксидантну дію неферментованого рису, MFRYR та CRYR порівнювали, використовуючи загальний вміст фенолу та тести відновлення заліза (FRAP) [17].