Ларвіцидний потенціал п’яти відібраних бабок-німф у Шрі-Ланці над Aedes aegypti (Linnaeus)

1 Департамент природних ресурсів факультету прикладних наук Університету Сабарагамуви Шрі-Ланки, Шрі-Ланка

потенціал

2 Кафедра інженерії біосистем, факультет сільського господарства та управління насадженнями, Університет Шей-Ланки, Шрі-Ланка

3 Кафедра біосистем, факультет сільського господарства та управління насадженнями, Університет Шей-Ланки, Шрі-Ланка

4 HELPO Eco Green Ltd., місто Талбот, Галле, Шрі-Ланка

Анотація

1. Передумови

Комарі становлять одну з основних небезпек для здоров’я людини, оскільки вони відіграють важливу роль у передачі переносних хвороб [1]. Серед них денге - це швидко зростаюча вірусна хвороба, що передається комарами, яка широко поширюється по всьому світу. Щороку трапляється близько 50 мільйонів вірусних інфекцій денге, і практично 2,5 мільярда людей проживають в ендемічних країнах денге [2]. Приблизно 1,8 мільярда людей (понад 70%) перебувають під загрозою вірусної інфекції денге в країнах-членах Західної частини Тихого океану та Південно-Східної Азії Всесвітньої організації охорони здоров’я, що становить приблизно 75% недавнього глобального тягаря захворювань через Лихоманка денге [3].

Шрі-Ланка вже більше двох десятиліть уражається епідеміями лихоманки денге (DF) та геморагічної лихоманки денге (DHF). На Шрі-Ланці, Aedes aegypti залишаються основним вектором, підтримуваним Ae. albopictus як вторинний вектор. Вірусні інфекції денге повідомляються із Шрі-Ланки з середини 1960-х років. DF був серологічно підтверджений в 1962 р., І існування DF у всіх великих містах, розташованих нижче висоти 1200 м, було підтверджено протягом періоду 1976–1978 рр. [4]. Зі зміною серотипу (ів) на Шрі-Ланці спостерігається тривожне зростання захворюваності на денгу, що спричиняє найбільшу кількість випадків денге, як колись, 186, 101 із понад 440 смертельними випадками у 2017 році [5].

Методи біологічного контролю намагаються використовувати природних ворогів комарів на різних стадіях життєвого циклу як хижаків, так і паразитів. Великим різноманіттям живих організмів, включаючи мікроби, гриби, найпростіші, нематоди, інші безхребетні та хребетні хижаки, визнано потенційними агентами боротьби з комарами [10, 11]. Серед різних біологічних засобів боротьби з хижими комахами, такими як самозакохані та бабки, німфи отримали велике значення як значущі хижаки багатьох мікробезхребетних, включаючи личинки Едіс комарі [11–13]. І самці, і бабки належать до ордена Одоната, зокрема до підрядів Zygoptera та Anisoptera, відповідно. В даний час із Шрі-Ланки зареєстровано загалом 124 види, що складаються з 66 видів, що належать до підряду Anisoptera та 58 видів до підряду Zygoptera [14].

І нимфа, і доросла особа цих двох підрядів передують комарам [1]. Висока здатність до розмноження, пристосованість до навколишнього середовища, перевага цільової популяції шкідників у існуванні замісної природної здобичі та загальна взаємодія з природними організмами визнані ключовими характеристиками будь-якого біологічного контролюючого агента [9]. Серед різних харчових уподобань бабок німф, такі малі личиночні форми, як Едіс личинки залишаються улюбленими ними навіть у природних середовищах існування, тоді як дорослі бабки також випереджають дорослих комарів [15, 16]. Крім того, одонати не мають шкідливого впливу на людину [17, 18]. Багато країн світу, особливо південно-азіатського регіону, оцінили практичну ефективність використання німфальних одонатів як засобів боротьби з комарами. М’янма [19] та Індія [12, 20] успішно використовують різноманітні бабки як потенційний біологічний ресурс для регулювання личиночних популяцій комарів-переносників та шкідників [18].

Починаючи з 60-х років влади, що працюють над боротьбою з денге, в Шрі-Ланці більше зосереджувались на боротьбі з переносниками хімічних речовин, а зусилля на біологічному контролі над Едіс обмежується лише оцінкою доцільності використання личинок кількох видів копепод та риб [21]. Незважаючи на надзвичайне різноманіття та широке поширення бабок у країні, Шрі-Ланка не звертала жодної уваги на бабок як потенційного агента біоконтролю Едіс комарів. З реалізацією обмежень у поточній діяльності з боротьби з векторами країна повинна перейти до простих, ефективних та екологічно чистих методів управління векторами. Тому поточне дослідження було розроблено для оцінки потенціалу використання бабок як біоконтрольного агента для придушення векторної популяції Ae. aegypti з метою управління епідеміями денге в межах країни.

2. Методи

2.1. Створення Aedes aegypti Колонія

Збір дорослих комарів проводився в районі медичного працівника Нарангодапалуви (МОЗ) м. Рагама, а захоплених комарів транспортували до лабораторії для масового вирощування у відділі молекулярної медицини медичного факультету університету Келанія, Шрі-Ланка. У лабораторії лише Ae. aegypti комарі були відокремлені шляхом морфологічної ідентифікації добре підготовленими ентомологами. Яйця, відкладені одинаком Ae. aegypti кровопролиті самки були використані для створення москітної колонії в Росії Ae. aegypti. Кожну колонію утримували в клітках розміром 24 х 24 х 24 см із сітчастим екраном зверху, при циклі 12:12 (світло: темно) при стандартних умовах (при 27 ± 2 ° C та вологості 75 ± 5%), дотримуючись стандартні протоколи, запропоновані Гунатілакою та ін. [22, 23]. Кров великої рогатої худоби використовували для годування комарів за допомогою техніки годування металевими пластинами [23].

Відкладені ними яйця дозволялося висиджувати протягом 2-3 днів після яйцекладки. Личинок першої інстанції (L1) переносили щодня з чашок для яйцекладки на пластикові лотки (40 × 25 × 6 см) з 1000 мл води, зберігаючи при цьому щільність личинок 750-800 особин на лоток. Приблизно 1 мл стандартної дієти для личинок, що містить шрот тунця (50%), порошок бичачої печінки (36%) і дріжджі (14%), додавали в лотки для личинок двічі на день, поки личинки не вирощувались до 4-го етапу. етап (L4) [23]. Звідти утворені личинки 4-ї категорії були використані для випробувань хижацтва, як описано нижче.

2.2. Створення колоній нірф бабок

3. Експерименти з хижацтвом

3.1. Оцінка хижацької ефективності різних видів бабок

Бабки різних видів виховували до останньої стадії, а довжину їх тіла вимірювали з точністю до міліметра за допомогою лінійки. Добре вирощена особина кожного виду була введена в окремі резервуари для зберігання (підтримувались, як описано вище) і голодувала протягом 12 годин [13]. Сто личинок 4-ї категорії Aedes aegypti Вирощені в лабораторних умовах спочатку вводили в кожен скляний резервуар, тоді як аналогічний скляний резервуар без будь-яких бабок-німф використовувався як контроль. У випадку, коли більше 75% від Едіс личинки були видобуті, нові партії личинок 4-го віку були введені в скляні резервуари, щоб підтримувати 100 особин на щільність личинок резервуару протягом доби. Після закінчення 24 годин, ще 100 Ae. aegypti личинки були введені в кожен резервуар. Кількість вижилих личинок комарів у кожному резервуарі підраховували з інтервалом у 1 годину до 48 годин з незначними змінами в методології, описаній Сінгхом та ін. [25] та Шад та Ендрю [1]. Весь експеримент повторювали п’ять разів, щоб зберегти точність висновків.