Протипухлинний ефект смоли смоли Ferula assa foetida oleo проти раку молочної залози, індукованого клітинами 4T1
Сейєд Маджід Багері
a деп. фізіології, Університет медичних наук Шахіда Садоуі, Язд, Іран
b Нейробиомедичний дослідницький центр, Університет медичних наук Шахіда Садохі, Язд, Іран
Амір Абдіан-Асл
c Відд. імунології, Університет медичних наук Шахіда Садоуі, Язд, Іран
Махін Тахері Могадам
d Відд. Анатомічні науки, Університет медичних наук ім. Ахваза Джундішапура, Ахваз, Іран
Мар’ям Ядегарі
e Відд. Анатомічні науки, Університет медичних наук Шахіда Садоуі, Язд, Іран
Агдас Мірджалілі
e Відд. Анатомічні науки, Університет медичних наук Шахіда Садоуі, Язд, Іран
Фатеме Заре-Мохазабіє
f Школа медицини, Університет медичних наук Шахіда Садоуі, Язд, Іран
Ханьє Момені
f Школа медицини, Університет медичних наук Шахіда Садохі, Язд, Іран
Анотація
Передумови
Показано, що Ferula assa foetida, яку зазвичай вживають як здоровий напій, має різну біологічну активність, включаючи антиоксидацію, проти ожиріння та протиракові захворювання.
Об’єктивна
Наше дослідження має на меті дослідити протипухлинний ефект асафетиди in vivo з використанням клітин 4T1 раку молочної залози миші.
Матеріали і методи
У дослідженні самок мишей BALB/c було розділено на дві групи (n = 6), які були контрольними (необробленими) та іншу групу мишей з раком молочної залози, які отримували 100 мг/кг асафетиди відповідно пероральним втручанням. Всім мишам вводили в жирову прокладку молочної залози клітини 4T1 (1 × 10 5 клітини 4T1/0,1 мл розчину фосфатного буфера). Асафетиду вводили на 15 день після розвитку пухлини протягом 3 тижнів. В кінці експерименту вимірювали вагу пухлини, об'єм пухлини та навантаження на пухлину, збирали легені, печінку, нирки та пухлину та готували зрізи для гістопатологічного аналізу. Також визначали інгібуючу та антиоксидантну активність асапоетитиди ліпоксигенази.
Результати
Наші результати показали, що лікування асафетидою ефективно зменшило вагу пухлини та обсяг пухлини у оброблених мишей. Вага тіла значно зросла у самок мишей BALB/c проти контролю. Окрім протипухлинного ефекту, асафетида зменшила метастази в легенях, печінці та нирках, а також збільшила ділянки некрозу в тканині пухлини відповідно.
Висновки
Це дослідження продемонструвало, що асафетида має потужний протипухлинний та антиметастазний вплив на рак молочної залози і є потенційним джерелом природних протипухлинних продуктів.
1. Вступ
2. Матеріали та методи
2.1. Рослинна олео-камедь смола
Олео-камедь-смола F. assa foetida була зібрана влітку з регіону Табас (провінція Язд, Іран) влітку, і вид рослин був ботанічно ідентифікований доктором Аббасом Зарезаде в Центрі досліджень сільського господарства Язд. Висушений порошок асафетиди замочували в дистильованій воді на ніч при кімнатній температурі, а отриману суспензію застосовували перорально. Концентрації та дози екстракту виражали у вигляді сирої кількості висушеної олео-смоли-смоли, використаної для приготування вихідного розчину [20].
2.2. Тварини та лікування
Були відібрані 8-тижневі самки мишей BALB/c, виведені в будинку для тварин в медичній школі Університету медичних наук Шахіда Садогі. Мишей утримували протягом 12 годин циклу світла та темряви та годували стандартними гранулами та водою ad libitum. 10 мишам інокулювали 1 × 105 клітин 4T1/мишей на лівій жировій подушці молочної залози підшкірно. Через 2 тижні після імплантації ракових клітин мишей випадковим чином розподілили на дві групи: контрольну групу (нормальний фізіологічний розчин) та групу асафетиди (100 мг/кг ТБ, щодня годували перорально). Лікування асафетидою продовжували до 21-го дня після щеплення. В кінці експерименту мишей забивали, а пухлини, легені, печінку та нирки видаляли для гістопатологічних досліджень [21].
2.3. Вимірювання маси тіла та розмірів пухлини
Вагу тіла вимірювали кожні п’ять днів. Розміри пухлини (маса пухлини, обсяг пухлини та тягар пухлини) розраховували в кінці експерименту за такою формулою: об’єм пухлини (мм 3) = [(ширина) 2 × довжина]/2 та навантаження пухлини (%) = об’єм пухлини (мм 3)/вага тіла (г) × 100 [21].
2.4. Гістопатологічні дослідження
Легкі, печінку, нирки та пухлину збирали, фіксували у 10% формальдегіді (Sigma – Aldrich, США) та вносили у парафін, розрізали на ділянки 5 мкм та фарбували гематоксиліном та еозином (H&E). Зрізи оцінювали на предмет цитології пухлинних клітин, швидкості мітозу, структури росту, некрозу та метастатичних пухлинних вузликів, наявних у цих тканинах.
2.5. Активність інгібування ліпоксигенази асафетиди
Соєву 15-ліпоксигеназу використовували для перевірки 15-LOX-інгібуючої активності асафетиди. Для цього до досліджуваного розчину додавали 50 мл розчину екстракту, що містив: 3 мл фосфатного буфера (0,1 М, pH = 8), 50 мл розчину ферменту (кінцева концентрація: 167 ОД/мл) для досягнення інгібування ферменту між 20 і 80%. Після інкубації досліджуваного розчину протягом 4 хв додавали субстрат (лінолева кислота, кінцева концентрація: 134 мМ) і вимірювали зміну поглинання протягом 60 с при 234 нм. Значення IC50 розраховували графічно, використовуючи нахили кривих поглинання. Розчин ферменту витримували в льоду і випробовували з інтервалом, щоб переконатися, що активність ферменту була постійною. Усі експерименти проводились за допомогою ультрафіолетового/вісового спектрофотометра Unico при 25 ° C у трьох примірниках [22].
2.6. Аналіз антиоксидантної активності асафетиди
Для визначення здатності асафетиди поглинати радикали DPPH, свіжоприготований етанольний розчин DPPH (0,1 мМ; 1 мл) додавали до різних концентрацій асафетиди (20–200 мкг/мл). Через півгодини поглинання реєстрували при 517 нм. Результати виражали як відсоток інгібування як: