Рандомізоване, подвійне сліпе і плацебо-контрольоване дослідження кленбутеролу при денервованій атрофії м’язів
1 відділення хірургії кисті лікарні Хуашань Університету Фудань, Шанхай 200040, Китай
2 Clinical Development, Neurology & Pain, R&D, Allergan Inc., 2525 Dupont Dr., Irvine, CA 92612, USA
Анотація
-Показано, що адренергічні агоністи, такі як кленбутерол, сприяють гіпертрофії здорових скелетних м’язів та зменшують втрату м’язів у деяких патологічних станах як у тварин, так і у людей. Ми мали намір дослідити клінічну ефективність кленбутеролу щодо послаблення атрофії м’язів, спричиненої денервацією. Методи. Було використано подвійне сліпе, контрольоване плацебо, паралельне та рандомізоване дослідження. 71 пацієнту, який страждав від пошкоджень плечового сплетення, було призначено або кленбутерол (60 μг, заявка) або плацебо протягом 3 місяців. До і в кінці дослідження пацієнтам проводили фізичні обстеження, біопсію біцепса плеча, електроміограми (ЕМГ) та інші лабораторні дослідження. Результати. Порівняно з лікуванням плацебо, кленбутерол значно пом'якшив зменшення площ поперечного перерізу м'язових волокон I та II типів та полегшив зменшення амплітуд потенціалу фібриляції без будь-яких негативних наслідків. Висновки. Кленбутерол безпечно покращував денервовану атрофію м’язів у цій когорті; таким чином, рекомендується проводити більші клінічні дослідження для того чи іншого
агоністи щодо індукованої денервацією атрофії м’язів.
1. Вступ
Показано, що селективні бета-2-адренергічні агоністи збільшують масу скелетних м’язів і функціонують у фізіологічних умовах у різних видів. Це пояснюється їхньою роллю в контролі синтезу та деградації білка через
та Gβγ зв’язані сигналізації та Ca 2+/залежні від убиквітину шляхи відповідно [1]. β2 агоністи також покращують виснаження м’язів тварин при денервації, бічному аміотрофічному склерозі, м’язовій дистрофії, знежиренні, старінні та моделях розвантаження міокарда [2–8].
У пацієнтів з умовами іммобілізації або м’язовою дистрофією, β2 агоністи, такі як кленбутерол, збільшують м’язову масу тіла та покращують функції скелетних м’язів [9–11]. Крім того, кленбутерол (до 720 μг/добу) сприяє одужанню міокарда у пацієнтів з атрофією розвантажувального міокарда в результаті застосування допоміжних апаратів лівого шлуночка [12–14].
У порівнянні з іншими β2 агоністи, кленбутерол, засіб тривалої дії та функціонально селективний засіб, є найефективнішим препаратом для запобігання виснаження м’язів з найменшими побічними ефектами [13, 15–18]. Однак клінічна ефективність кленбутеролу при денервованій атрофії м'язів ще не повідомляється; денерваційна атрофія м’язів залишається незадоволеною медичною потребою. Також статус атрофії м’язів в кінцевому рахунку визначає функціональне відновлення відновлених пошкоджень периферичного нерва [19]. На основі β2 ролі агоністів у сприянні гіпертрофії неушкоджених скелетних та серцевих м’язів, а також у запобіганні втраті м’язів у доклінічних дослідженнях, ми висунули гіпотезу, що кленбутерол може пом’якшити денервовану атрофію м’язів у людей. Нинішнє пілотне випробування перевірило вплив кленбутеролу на уповільнення денерваційної індукованої атрофії м’язів у пацієнтів.
2. Матеріали та методи
2.1. Пацієнти
2.2. Дизайн
Пацієнтів набирали з 5 терапевтичних бригад під керівництвом незалежних слідчих у відділенні. Їх позначали номерами випадків і випадковим чином розподіляли по групам кленбутеролу або плацебо. Коди зберігалися окремо. На це посилався організатор лише в кінці дослідження або коли сталася важка несприятлива подія. Ні члени терапевтичної групи, ні пацієнти не знали, до якої групи був призначений пацієнт. Співробітники обстеження ЕМГ та обробник/оцінювач зразків біопсії були замасковані від розподілу лікування. Кленбутерол був сформульований як 60 μг/10 мл у закупорених скляних пробірках фармацевтами. Всього було виготовлено 20 000 пробірок кленбутеролу або плацебо відповідно. Стабільність полиці при 4 ° C тестували, щоб гарантувати сталість активного фармакологічного інгредієнта протягом усього періоду дослідження. Кожному пацієнтові виписували 200 пробірок кленбутеролу або плацебо і просили приймати ліки всередину 60 μг двічі на день протягом 3 місяців (
2.3. Загальні лабораторні оцінки
Перед випробуванням кожного пацієнта приймали та проводили набір лабораторних обстежень, включаючи електрокардіограму з 12 відведеннями, рентген грудної клітки, тест легеневої функції та кілька досліджень функції печінки. Також реєстрували азот сечовини крові, креатинін, час кровотечі, протромбіновий час, глюкозу, кальцій, фосфор, електроліти та загальний аналіз крові з диференціалами. До кінця випробування всі пацієнти повторили вищезазначені обстеження незалежно від їх груп.
2.4. ЕМГ-обстеження
2.5. М'язова біопсія
Всім 71 пацієнтам під час операцій з відновлення нервів безпосередньо перед початком дослідження проводили біопсію м’язів у середині біцепса плечової кістки. Зразки біопсії покривали тальком і заморожували в замороженому ізопентані, попередньо охолодженому в рідкому азоті. 10 μСвіжі зрізи кріостату товщиною м виготовляли на мікротомі кріостата при −20 ° C і встановлювали на предметних стеклах. На кожній пробі проводили фарбування міофібрилярної аденозинтрифосфатази при рН 4,6 або 9,4, щоб показати типи клітковини [22]. Площі перерізу волокна вимірювали приблизно на 300 волокнах з трьох різних полів огляду за допомогою обчислюваної системи аналізу зображень; середнє значення було розраховано для кожного типу волокна в кожній пробі. До кінця випробування, якщо ЕМГ та фізичні обстеження не виявили ознак реіннервації плечового м’яза біцепса, пацієнтів з обох груп просили повторно проводити біопсію біцепса плечового суглоба, якщо пацієнти повністю відповідали інструкціям щодо дослідження. Зразки м’язів обробляли, як і раніше.
2.6. Статистичний аналіз
Вся інформація про пацієнта та обстеження були введені в програмне забезпечення SPSS. Зміни амплітуд потенціалу фібриляції та площ поперечного перерізу протягом дослідного періоду у кожного пацієнта використовували для статистичного аналізу.
було прийнято як статистичне значення.
3. Результати
3.1. Характеристика досліджуваних
35 пацієнтів було рандомізовано у групу кленбутеролу, а 36 пацієнтів було розподілено у групу плацебо. Погана відповідність (відсутність прийому ліків за призначенням та затримка подальшого візиту) та втрата до подальшого спостереження становили 19 випадків у групі, яка отримувала кленбутерал або плацебо, відповідно. У одного пацієнта групи кленбутеролу спостерігалися ознаки реіннервації плечового м’яза біцепса (М2) через 3 місяці після перенесення діафрагмального нерва. Це було визначено за допомогою фізичних та ЕМГ-обстежень. 15 пацієнтів у кленбутеральній групі та 17 пацієнтів у групі плацебо повністю підпорядковувались рекомендаціям 3-місячного дослідження, не маючи ознак реіннервації плечового м’яза біцепса (рис. 1). Серед них 12 пацієнтів у групі кленбутеролу та 13 пацієнтів у групі плацебо приймали повторні біопсії м’язів. Пацієнтами були переважно молоді люди, які страждали від мотоциклетних аварій чи інших травм. Істотних відмінностей у віці між двома групами лікування не було. Час денервації до зарахування до пробного періоду становив близько 5 місяців - період не суттєво відрізнявся між групами (табл. 1). Усі пацієнти приймали подібні хірургічні процедури та звичайні додаткові методи лікування. Ці ключові характеристики зробили порівнянними пацієнтів обох груп.