Склад поліфенолів Cistus incanus L, Trachystemon orientalis L
Ваня Дімчева *, Микола Калоянов та Марія Каршева
Інформація про автора та статтю
Цитуйте це як
Дімчева В., Калоянов Н., Каршева М. (2019) Поліфенольний склад інфузій Cistus incanus L., Trachystemon orientalis L. та Melissa officinalis L. методом ВЕРХ-DAD. Open J Anal Bioanal Chem 3 (1): 031-038. DOI: 10.17352/ojabc.000008
Анотація
Основний текст статті
Вступ
Дослідницький інтерес до активних сполук, особливо до поліфенолів, природного джерела значно зріс за останні роки [1]. Рослини, що містять природні антиоксиданти, використовуються як важливе джерело нових лікарських препаратів, а рослинні екстракти використовуються для лікування багатьох захворювань, і спосіб їх дії цілком може базуватися на вмісті фенольних сполук [2,3]. Фенольні сполуки є найбільш поширеними групами фітохімікатів і мають значне фізіологічне та морфологічне значення у рослин, а також мають сильні антиоксидантні властивості [4].
Trachystemon orientalis L. в Туреччині широко відомий як „Авраам-Ісаак-Яків” або „східний борщ”. Лікарська рослина є їстівною, і всі її частини вживають як овоч у Стамбулі та різних частинах Чорного моря [11,12]. Фітохімічні складові - це фенольні сполуки, дубильні речовини, ефірні олії, слизи, сапоніни, нітрати та смоли. Trachystemon orientalis зафіксовано фольклорні звички як діуретик, очищувач крові, пом’якшувальний, жарознижуючий засіб тощо [13]. У Болгарії „Східний Лопух” (місцева назва Странджа) не користується популярністю і використовується як їжа лише з мешканців населення, де він розповсюджений - Східні Центральні Балкани та вся Странджа.
Тому ідентифікація та кількісна оцінка фенолів з різних джерел стає все більш важливим завдяки їх потенційному застосуванню для лікування хвороб. Дуже поширеним методом якісного та кількісного аналізу поліфенолів є ВЕРХ у поєднанні з DAD. ВЕРХ - це потужна техніка для швидкого аналізу біоактивних компонентів, оскільки вона дозволяє систематично профілювати складні зразки рослин і, зокрема, фокусується на їх ідентифікації та послідовній оцінці виявлених сполук. Спектри УФ/Vis довго використовувались для структурного аналізу поліфенолів та флавоноїдів [19].
Метою цього дослідження було виявлення та кількісне визначення фенольних сполук водних екстрактів (настоїв) листя Cistus incanus, насіння твердого покриву Cistus incanus, листя та стебла Trachystemon orientalis та Melissa officinalis за допомогою раніше розробленого та затвердженого методу ВЕРХ-DAD.
Відомо, що діяльність неочищених екстрактів, отриманих з лікарських рослин, може зазнавати змін на основі змін хімічного складу. Також різниця в діяльності може бути обумовлена географічним походженням, місцевістю, кліматичними умовами та часом збирання зібраного рослинного матеріалу [20,21]. Тому цікаво відкрити поліфенольні профілі рослин, зібраних у різні сезони, та рослин з різним географічним походженням.
Метою цього дослідження також було порівняння поліфенольних профілів листя Cistus incanus, зібраних влітку та зібраних у сезони зимового збору врожаю, та листя Cistus incanus, зібраних з Болгарії та Греції. Хоча, цікавим аспектом є вивчення інфузійних поліфенольних складових нерозкритих ендемічних видів, що вирощуються в Болгарії - Cistus incanus та Trachystemon orientalis. Тим не менше, цікаво проводити невивчене до садової культивування меліси (Melissa officinalis) родом з Північно-Східної Болгарії.
В цілому та завдяки потенційним властивостям трав'яних настоїв, пов’язаних зі здоров’ям, метою цієї роботи було надати нові знання про вміст антиоксидантних речовин у вибраних травах.
Матеріали і методи
Матеріали
Аналіз ВЕРХ
Аналізи проводили за допомогою системи ВЕРХ Agilent 1100 (Agilent 1100 ВЕРХ, Agilent Technologies, Каліфорнія, США), оснащеної детектором DAD (G1315B, Agilent Technologies, Каліфорнія, США), та керованої HP Chemstation. Колоною була зірка Purospher, Hiber RT 125-4; RP18 (зірка Purospher, Merck, Болгарія). Температура колонки становила 25 ° С. Поділ проводили з використанням лінійного градієнта з використанням 0,1% ТСА (А) та 100% ацетонітрилу (В). Градієнт починався з 5% B, 15% B за 16,5 хв, 33% B за 22,5 хв, 100% B за 30,5 хв, 5% B за 35 хв до 40-го для повторного врівноваження. Швидкість потоку становила 1,6 мл/хв. Об'єм введення для зразків та стандартів становив 30 мкл. Придбання DAD було встановлено в діапазоні 200–400 нм. Ідентифікацію основних сполук проводили шляхом порівняння часу утримання та спектру УФ піків, отриманих як на зразку, так і на стандартній хроматограмі.
Приготування настоїв
Всі зразки витримували в сухому місці протягом двох років, перш ніж їх подрібнювали в подрібнювачі та просівали. Використовуване листя та насіння містили воду, не більше 10%. Для експериментів використовували частку розміру частинок 0,5-1,0 мм. Витяжки готували за допомогою інфузійної техніки. Відношення твердої речовини до розчинника було встановлено на рівні 1:30 (1 г листя/насіння у 30 мл розчинника) для всіх зразків. Інфузії проводили деіонізованою водою протягом 15 хвилин. Настої залишали при кімнатній температурі без додаткового курсу. Після кожної екстракції виснажений рослинний матеріал ретельно пресували, і екстракт фільтрували через бавовна, фільтрувальний папір, а після цього використовували нейлоновий мембранний шприцевий фільтр 0,45 мкм (Acrodisc, Sigma-Aldrich, Болгарія). Відфільтровані зразки вводили у флакони об’ємом 2 мл і зберігали в холодильнику перед дослідженням.