Вплив активованого як-білка на гемопоез та пов’язані з ним цитокіни при радіаційно-індукованій травмі

Ябін Дуан

1 кафедра клінічної фармації, дочірня лікарня університету Цинхай, Сінін, Цинхай 810001, Китай

Сінчен Яо

2 Відділення радіотерапії онкології, Народна лікарня Цинхай, Сінін, Цинхай 810007, Китай

Джунбо Чжу

3 Фармацевтичний факультет, медичний коледж, Університет Цинхай, Сінін, Цинхай 810001, П.Р. Китай

Юнпін Лі

4 Кафедра традиційної китайської медицини, Медичний коледж, Університет Цинхай, Сінін, Цинхай 810001, Китай

Жуанлінг Чжан

5 Департамент біологічних ресурсів, Коледж інженерії екологічного середовища, Університет Цинхай, Сінін, Цінхай 810016, Китай

Сюецзяо Чжоу

Іцзе Цяо

3 Фармацевтичний факультет, медичний коледж, Університет Цинхай, Сінін, Цинхай 810001, П.Р. Китай

Мен Ян

5 Департамент біологічних ресурсів, Коледж інженерії екологічного середовища, Університет Цінхай, Сінін, Цинхай 810016, Китай

Сяньян Лі

6 Медичний коледж, Університет Цинхай, Сінін, Цинхай 810016, Китай, Китай

7 Державна ключова лабораторія екології та сільського господарства плато, Університет Цинхай, Сінін, Цинхай 810016, Китай

Анотація

Вступ

Іонізуюче випромінювання позитивно застосовується у сільськогосподарському виробництві, медицині та охороні здоров’я, наукових дослідженнях та національній обороні (1). Однак це також пошкоджує багато аспектів людської фізіології, включаючи клітини периферичної крові, ДНК кісткового мозку (2), імунно-пов'язані органи (3) та антиоксидантні ферменти (4,5). Науково-дослідний інститут армії США розробив перший протирадіаційний препарат - аміфостин, який був затверджений Управлінням з контролю за продуктами та ліками США (6). Аміфостин здатний значно зменшити загибель нормальних клітин після променевої терапії; однак побічні ефекти, включаючи гіпотонію, нудоту, блювоту та інші побічні реакції, обмежили його застосування (7). Тому проведення досліджень є обов’язковим для виявлення ефективного, природного нетоксичного ліки, що захищає від радіації та зменшує радіаційний збиток. Попередні дослідження зафіксували, що рослинні білки (8,9) і негемозв’язуючі залізо білки (10–12) чинять захисний ефект від радіації. Крім того, аргінін, глутамін, гліцин, мікоспориноподібні амінокислоти та незамінні амінокислоти можуть сприяти відновленню ваги, покращувати харчові умови білка та надавати антиоксидантну дію у щурів, які зазнали рентгенівського опромінення (13–15).

Попереднє дослідження, проведене авторами, показало, що активовані як білки витягуються із здорової тканини яків з Цінгай-Тибетського плато і містять велику кількість дрібних пептидів (не опубліковано). Як-активований білок спочатку був ідентифікований після обробки ізольованих тканин як-комбінації комбінацією променевої терапії та хіміотерапії, в результаті чого виявлено, що кількість зрілих білих кров’яних клітин є нормальною, тоді як активність Т-клітин, природних клітин-кілерів, моноцитів та нейтрофілів була незвично високий. Ізольована тканина як зазвичай готується з використанням методів екстракції, сепарації та очищення із застосуванням сучасних біотехнологій та технологій біологічної інженерії, що дозволяє їй всмоктуватися безпосередньо без травлення в кишковому тракті. На Цінхайсько-Тибетському плато є багато джерел активованого як-білка. Як-активований білок забезпечує насичене харчування без токсичності, не накопичується в організмі і діє як багатофункціональний фактор (16). Крім того, він здатний пригнічувати ріст пухлини, збільшувати кількість лейкоцитів і регулювати імунну систему (17).

Метою цього дослідження було оцінити вплив активованого як-білка на клітини периферичної крові, імунну функцію, вміст ДНК кісткового мозку, активність антиоксидантних ферментів та експресію білків, пов’язаних з апоптозом, при індукованій радіацією травмі у мишей. Також були досліджені основні механізми щодо потенційних захисних ефектів активованого як-білка. Результати поточного дослідження можуть свідчити про нові методи вивчення радіаційно-захисних речовин та клінічне застосування як-активованого білка.

Матеріали і методи

Матеріали та реактиви

Гідроліз зразка

Як-активований білок (33,5 мг) поміщали в ампер-флакон на 10 мл і додавали 6 мл HCl (6 моль/л). Флакон герметично закривали та інкубували протягом 24 годин при 110 ° C для гідролізу зразка. Потім зразок охолоджували при кімнатній температурі протягом 40 хв, фільтрували (розмір пор, 0,5 мкм) і фільтрувальний розчин додавали в 15-мл пробірку. Пробірку висушували у вакуумі при 90 ° С у багатовипарному випарнику. Після висушування залишок розчиняли у воді і вищезгаданий етап повторювали. Нарешті, упарюваний залишок розчиняли в 5 мл HCl (20 ммоль). Зразок мав гідроліз ундегону, коли флакон герметично закривали та інкубували протягом 24 годин при 110 ° С. Після фільтрації для видалення домішок зразок містився у фільтрувальному розчині, а потім додавали HCl (20 ммоль) для розчинення зразка.