Введення відвару багатого сахарозою та полісахаридами Radix Astragali (Хуанг Ці)

І-Чень Хуан

1 Інститут фармакології, Університет Ян Мін, Тайбей 112, Тайвань

2 Відділ рослинних препаратів та натуральних продуктів, Національний науково-дослідний інститут китайської медицини, Тайбей 112, Тайвань

Яо-Хаур Куо

Чіа-Чуань Чанг

3 Відділ лікарської хімії, Національний науково-дослідний інститут китайської медицини, Тайбей 112, Тайвань

Лі-Цзе Чжан

Ян-Ю Лінь

Чіа-Юн Хсу

Хуей-Кан Лю

Анотація

Нинішнє розслідування намагалось підтвердити корисні дії хімічно охарактеризованого відвару Radix Astragali (AM-W) проти діабетиків 2 типу (T2D) Спрег-Доулі (SD) щурів. За допомогою дизайну випадок/контроль, після 2 місяців лікування AM-W (500 мг/кг, щоденно внутрішньовенно в/в) у щурів T2D порівнювали терапевтичні результати. Було показано, що полісахариди сахарози та астрагалу (ASP) існують майже в однаковій пропорції в AM-W. Втрата ваги тіла, поліпшення чутливості до інсуліну та ослаблення жирової печінки після введення AM-W у щурів T2D були очевидними. Дивно, але рівень цукру в крові, функція бета-клітин та толерантність до глюкози у щурів T2D не покращились при лікуванні AM-W. Подальше дослідження показало шкідливі ефекти додавання сахарози (100 та 500 мкг/мл) та APS (500 мкг/мл) на стимульовану глюкозою секрецію та життєздатність інсуліну відповідно. На закінчення, правильне введення дози та зменшення вмісту сахарози є ключем до максимізації переваг цієї трави.

1. Вступ

Для лікування діабету 2 типу (T2D) як резистентність до інсуліну, так і дисфункція бета-клітин є двома основними патологічними факторами, які необхідно контролювати [1]. Крім того, неалкогольна жирова хвороба печінки (НАЖХП) тісно пов’язана з тим, що при T2D часто ігнорується. Неконтрольована НАЖХП може згодом проявлятися запаленням печінки, стеатозом (НАСГ), цирозом і навіть канцерогенезом [2].

Традиційна китайська медицина (ТКМ) часто прописує корінь астрагалі мембранацеус (Radix Astragali (RA); Хуанг Ці) у формулах протидіабетних ТКМ для “добавок ци” [3]. Згідно з сучасними знаннями, полісахариди астрагалу (АФС) та сапоніни є двома біоактивними складовими РА, які виявляються корисними для втручання при діабеті. Введення очищених АФС може зменшити діабетичну гіперглікемію та призвести до непрямого збереження функції та маси бета-клітин за допомогою імуномодулюючого впливу на мишей з діабетом 1 типу [4, 5]. Недавні дослідження також показали, що очищені АФС частково відновлюють гомеостаз глюкози за допомогою інсуліносенсибілізуючого ефекту у мишей та щурів T2D [6, 7] та покращують діабетну кардіоміопатію та нефропатію [8, 9]. Більше того, APS можуть також полегшити алкогольну жирову хворобу печінки та стрес печінкової ендоплазматичної сітки (ER) [10, 11]. Отже, також можна очікувати можливого поліпшення НАЖХП з використанням АФС. З іншого боку, сапоніни астрагалу також мають потужну антиглікаційну, антиоксидантну та гепатопротекторну активність, корисну для терапії діабету [12, 13].

Як уже згадувалося, існує тісний зв'язок між традиційними показаннями та сучасними фармакологічними доказами терапевтичної цінності цієї трави проти діабету. Однак, враховуючи, що водний екстракт РА (AM-W) є традиційним способом введення, на два питання, на які залишається відповісти, є визначення основного біоактивного принципу у відварі РА та чи корисні ефекти, що спостерігаються при очищених АФС або сапонінах проти T2D і NAFLD можна застосовувати безпосередньо для відвару РА.

Тому, використовуючи щурів T2D, поточне дослідження використовувало хімічно визначений водний екстракт RA для оцінки можливих впливів на резистентність до інсуліну, функцію бета-клітин та пов'язаний з ними НАФЛД у щурів з T2D.

2. Предмети та методи

2.1. Матеріали

Стрептозотоцин (STZ) та інші хімічні речовини були придбані у Sigma (Сент-Луїс, Міссурі, США). Інсулін був придбаний у Novo Nordisk (Принстон, Нью-Джерсі, США). Реагент TRI був придбаний у Invitrogen (Тайбей, Тайвань). Ацетонітрил та метанол (марка LC) були придбані у компанії Merck (Дармштадт, Німеччина). Клітини H4IIE були придбані в Центрі збору та досліджень біоресурсів (BCRC, Тайчжун, Тайвань). Клітини BRIN-BD11 були отримані від професора Пітера Р. Флатта (Університет Ольстера, Колерейн, Великобританія).

2.2. Рослинний матеріал та приготування екстрактів РА

Сушені коріння Astragali membranaceus були придбані як рослинний матеріал з Китаю та засвідчені професором Куо. Зразок ваучера був зданий на зберігання в Національний науково-дослідний інститут китайської медицини (Тайбей, Тайвань). RA (600 г) розрізали і подрібнювали на шматки приблизно 0,5 см, потім дистилювали та кип'ятили із зворотним холодильником 5 л дистильованої води протягом 8 годин (год). Водний екстракт (приблизно 2,8 л) фільтрували через 6 шарів марлі, а потім поміщали в ліофілізацію з отриманням висушеного порошку (AM-W; 198 г). На відміну від цього, етаноловий екстракт готували із 100 г RA з 0,5 л 95% етанолу, звареного при 50 ° C протягом 3 годин тричі. Кінцевий концентрований сирий екстракт (AM-E) дав 15,2 г. Для характеристики полісахаридів AM-W (7 г/дл) подавали в осад з рівним об'ємом етанолу. Були отримані дві фракції, і верхній шар був зібраний і концентрований як перша фракція, AM-W-F1. Осад збирали центрифугуванням і ставали AM-W-F2 (2 г осаду) після промивання етанолом та ацетоном перед сушінням у вакуумній печі.