Жовтяниця грудного молока корелює з високим рівнем епідермального фактора росту Педіатричні дослідження
Анотація
Материнське молоко відіграє важливу роль у розвитку жовтяниці в грудному молоці (BMJ) і є основним джерелом епідермального фактора росту (EGF) для новонароджених. Метою цього дослідження було дослідити, чи існує взаємозв'язок між рівнем EGF у сироватці дитини та молоці годуючих матерів та BMJ. Були визначені дві групи: дослідна група ( = 30), новонароджені, які пройшли спостереження за ІМС без будь-якої патологічної причини, що ідентифікує; контрольна група, здорові новонароджені, у яких рівень загального білірубіну в сироватці крові становив
Метою цього дослідження було дослідити, чи існує взаємозв'язок між рівнем EGF у зрілому молоці годуючих матерів та BMJ, що має наслідки для розвитку гіпербілірубінемії новонароджених.
МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ
Пацієнти.
Це проспективне дослідження було проведено в період з січня 2007 року по червень 2008 року в відділеннях неонатології лікарні університету імені Докуза Ейлюля. Загалом до цього дослідження було прийнято 60 немовлят. Протокол дослідження був затверджений Комітетом клінічних розслідувань людини медичного факультету університету імені Докуза Ейлюля та отримана поінформована згода батьків усіх немовлят на взяття крові у їхньої дитини.
Зразки сироватки для немовлят.
Зразок крові для вимірювання EGF у досліджуваній групі отримували, коли у немовляти брали кров для проведення інших тестів, необхідних для оцінки причини жовтяниці. Контрольними групами були зручні вибірки немовлят подібного віку (від 3 до 4 тижнів), які потребували госпіталізації до нашого відділення неонатології з метою контролю стану здоров’я або з інших причин, таких як скринінг на фенілкетонурію. Зразки сироватки для немовлят збирали у стерильні пробірки, поміщали на лід і негайно відправляли до лабораторії. Після центрифугування крові при 3000 × g протягом 30 хв при 4 ° C супернатант плазми рідини відокремлювали і зберігали при −80 ° C до подальшого аналізу (25).
Зразки людського молока.
Зразки грудного молока збирали між третім і четвертим післяпологовим тижнем. Колекція була стандартизована для зменшення упередженості та потенційної добової мінливості у вимірах EGF. У той час як зразки крові для досліджень білірубіну в сироватці крові зазвичай отримували через 0700 та 1600 год, а зразки молока отримували з обох груп протягом 1 години після першого годування вранці, визначеного між 0800 та 0900 год відповідно. Усі матері могли забезпечити молоком кожну точку відбору проб. Аликвоту 5 мл брали за допомогою ручного молоковідсмоктувача (Avent, Suffolk, Великобританія). Зразки людського молока збирали у стерильні пробірки, поміщали на лід і негайно відправляли до лабораторії. Зразки центрифугували при 3,750 × g протягом 2 хв для видалення жиру та клітинного сміття. Аліквоти супернатанту 1,5 мл зберігали при -80 ° C для аналізу EGF (26).
Вимірювання EGF в жіночому молоці та крові.
Шістдесят зразків молока розбавляли до співвідношення 1: 400. Вимірювання EGF у людському молоці та дитячій сироватці були отримані за допомогою набору ELISA (Biosource International Inc., Бельгія). Розведені зразки молока та сироватки для немовлят (200 мкл) інкубували з моноклональним людським антитілом EGF, покритим на 96-лунковому планшеті при кімнатній температурі протягом 2 годин. Після декількох промивань на планшет додавали поліклональне антитіло до EGF, кон'юговане з пероксидазою хрону (200 мкл), і реагувало протягом 1 години. Потім зразки інкубували з 200 мкл субстратів (тетраметилбензидин: H2O2 = 1: 1) протягом 20 хв після декількох промивань. Реакцію закінчували 50 мкл сірчаної кислоти (1 моль/л). Концентрації EGF визначали при 450 нм та коригували при 540 нм за допомогою зчитувача ELISA (Multiskan RC; Labsystems, Гельсінкі, Фінляндія) (26).
Статистичний аналіз.
Середню вагу та термін вагітності груп порівнювали з одностороннім дисперсійним аналізом. Манн-Вітні U використовували тести, щоб визначити, чи є різниця у середньому рівні загального білірубіну в сироватці крові, рівні EGF у крові та рівні EGF у молоці. A стор значення
РЕЗУЛЬТАТИ
Немовлят у двох групах - контрольній та дослідній - порівнювали за їх антропометричними, клінічними та перипартальними характеристиками (табл. 1). Із 30 немовлят із жовтяницею у досліджуваній групі 13 (43,3%) були дівчатами та 17 (56,7%) хлопцями. Середній термін вагітності та вага новонароджених у досліджуваній групі становив 40 ± 0,9 тижнів та 3008 ± 325 г відповідно. Середній рівень білірубіну становив 15,01 ± 2 мг/дл. Після відновлення грудного вигодовування концентрація білірубіну в сироватці крові у деяких немовлят була підвищена, але концентрація знизилася до норми (8,55-12,2 мМ), або жовтяниця візуально зникла у всіх немовлят до 4 місяців життя. У контрольній групі 12 (40%) були хлопцями та 18 (60%) - дівчатами. Середній термін вагітності та вага новонароджених у контрольній групі становив 39 ± 1,6 тижнів та 3168 ± 298 г відповідно, а їх середній загальний рівень білірубіну в сироватці становив 5,9 ± 1,6 мг/дл. Немовлята в обох групах (дослідна група, = 30, і контрольна група, = 30) були подібними щодо статі, шляху розродження, середньої ваги при народженні, гестаційного віку та віку на момент дослідження (Таблиця 1).
Рівні EGF у сироватці та молоці у досліджуваній групі були вищими, ніж у контрольних груп (табл. 2). У досліджуваній групі спостерігався позитивний зв’язок між рівнем загального білірубіну в сироватці крові та рівнем EGF молока та крові (т = 4,08, стор = 0,001, рис. 1 і т = 3,39, стор = 0,002, рис. 2). Крім того, спостерігався позитивний зв’язок між рівнем EGF молока та сироватки новонароджених (т = 3,37, стор = 0,002, рис.3).
