Дефіцит Af17 збільшує екскрецію натрію та знижує артеріальний тиск Американське товариство

Цифри та дані статті

Цифри

Миші Af17 -/-, які харчувались нормальним харчуванням Na +, мали порушення функції нирок та зниження АТ, незважаючи на незначно підвищений альдо в плазмі. Мишей Af17 +/+ (n = 34) та Af17 -/- (n = 37), які харчувались нормальним харчуванням Na + у метаболічних клітинах, аналізували на параметри, як зазначено. Для вимірювання АТ n = 57 мишей для Af17 +/+ та n = 65 мишей для Af17 -/-. Для всіх інших параметрів n = 6 - 37 мишей/група. Додаткові параметри див. На додатковому малюнку S1. У всіх випадках * P + /+ .

дефіцит

Погіршення та відновлення активності ENaC у мишей Af17 -/-. (A) Репрезентативні сліди струму від прикріплених до клітини пластирів, що контролюють активність ENaC за умов, як зазначено. Пунктирними лініями позначено відповідний поточний стан, а c позначає замкнутий стан. (B – D) Короткий графік ENaC Po (B), активних каналів у патчі (C) та ефективної активності ENaC (D). У всіх випадках * P + /+ .

Af17 регулює експресію мРНК та білка ENaC. (A) RT-qPCR у реальному часі для експресії генів ENaC у нирках мишей, які харчуються звичайною Na + дієтою, з β-актином як внутрішнім контролем. n = 3 миші/група. (B) Вестерн-блот для експресії білків, як зазначено, з β-актином як внутрішнім контролем. Для αENaC при аналізі даних була виключена смуга приблизно 30 кД. me2K79 та me2K9: гістон H3 диметильований K79 та K9 відповідно. n = 4 миші/група. У всіх випадках * P + /+ .

Af17 експресується в альдочутливому дистальному нефроні. (A та B) Зрізи нирок Af17 -/- фарбували X-gal та антитілом проти головного клітинного маркера Aqp2. Області в коробках в А та В посилювались у С та D відповідно. Кінці стрілок вказують на клітини, які очевидно експресують Aqp2 та β-георепортер, керовані промотором Af17.

Делеція Af17 викликає гіперметилювання H3 K79 на промоторі αENaC в нирках. (А) Діаграма промотору αENaC. 12–14 (B і C) ChIP-аналіз, що показує підвищений H3me2K79, асоційований з R0-R3, але не з субрегіоном Ra промотору αENaC. Нирковий хроматин готували з чотирьох WT та чотирьох мутантних мишей, об'єднували у дві групи відповідно до генотипу та аналізували за допомогою ChIP із зазначеними антитілами та з подальшим qPCR у реальному часі з праймерами, що ампліфікували субрегіони промотору αENaC, як показано у A. Relative Рівень H3me2K79 був встановлений на 1 в R0 з нирок WT і розрахований відповідно для всіх інших зразків. * P +/+. n = 4 миші/група (B). Репрезентативні аналізи агарозного гелю кінцевих продуктів qPCR були показані для перевірки специфічності qPCR для кожного зразка (C).