Дефіцит холіну у харчуванні матері змінює ангіогенез у гіпокампу плода миші PNAS

Відредаговано Робертом Дж. Казінсом, Університет Флориди, Гейнсвілль, Флорида, та затверджено 7 червня 2010 р. (Отримано на огляд 11 грудня 2009 р.)

дефіцит

Анотація

Імуногістохімічні дослідження в мозку плода. A і B: репрезентативні флуоресцентні зображення 200X області 1 КОРНУСУ АММОНІ (CA1) гіпокампу E17. Було проведено мультиплексне імуномічення для BrdU (золотисте фарбування - ALEXA 555, біла стрілка A), ізолектину IB4 (зелена флуоресценція - ALEXA 488, червона стрілка A) та DAPI (синя флуоресценція при зв’язку з геномною ДНК, біла стрілка B). Індекс проліферації ЕС розраховували як співвідношення між кількістю позитивних ядер BrdU, колокалізованих ізолектином (A), і DAPI позитивних ядер, колокалізованих ізолектином (B). Невеликі вставки - це зображення всієї площі гіпокампу, захоплені зі збільшенням 50X (A — ізолектин-BrdU та B — DAPI-ізолектин). C і D: фарбування RA фактором VIII гіпокампа миші плода E17. Репрезентативні 200X флуоресцентні зображення кровоносних судин, що експресують фактор VIII RA у 5 мкм ділянках гіпокампа; отримання зображень проводили за допомогою родамінового фільтра - клітини крові флуоресцирують червоним (барвник ALEXA 546 нм; білі наконечники стріл) і ядра флуоресцирують синім (фарбування DAPI). С показує дрібні кровоносні судини з різними траєкторіями та рівнями фактора VIII, а також DAPI-позитивні ядра ЕС. D представляє більш інтенсивну, позитивну до фактора VIII, кровоносну судину більшого калібру, розташовану в безпосередній близькості від зубчастої звивини.

Дефіцит холіну у матері зменшує проліферацію ендотеліальних клітин у гіпокампі плоду E17: Вагітним мишам годували CD, CT або CS дієту з 12 по 17 день гестації, а мозок плода збирали на E17. При Е15 всі дамби отримували внутрішньоочеревинну (i.p.) дозу BrdU. Зрізи мозку досліджували ізолектином IB4 та анти-BrdU антитілами. Індекс проліферації ЕС розраховували як відношення мічених BrdU-ізолектину позитивних клітин до DAPI-ізолектину позитивних клітин в обох гіпокампах (або обох зубчастих звивинах) кожного мозку в шести послідовних ділянках по 5 мкм. Площу поверхні цілого гіпокампу (H) та зубчастої звивини (DG) вимірювали для кожної проби та виявляли постійною між обробками (невелика вставка). Дані представлені як середнє значення ± SE. n = 6 дитинчат з 6 дамб/група. Групи порівнювали за допомогою одного способу ANOVA з подальшим тестом Тукі-Крамера. ** = p 25% у CD порівняно з CT або CS (p Переглянути цю таблицю:

  • Переглянути вбудований
  • Переглянути спливаюче вікно

Нестача холіну у харчуванні матері зменшує кількість кровоносних судин у гіпокампі плода

Незважаючи на те, що ми спостерігали зміни в області гіпокампу, відмінностей не спостерігалося в поперечному та середньому задньому відділах неокортексу (таблиця S1). Ми припускаємо, що холін діє, змінюючи епігенетичні мітки, і що це може відбуватися в клітинах-попередниках лише у певний період, коли вони діляться та диференціюються. Нейрогенез та ангіогенез у кортикальних зонах починаються до 12-го ембріонального дня, початку наших дієтичних маніпуляцій. Регіональна специфіка, ймовірно, відображає ці відмінності.