Генна терапія AAV28-людиниFOXP3 демонструє стійку ефективність антиатеросклерозу у мишей LDLR-KO на високо
Анотація
Передумови
Зараз відомо, що запалення є ключовим регуляторним процесом, який є спільним знаменником серед кількох факторів ризику розвитку атеросклерозу, на додаток до супутньої та пов'язаної із цим зміненої артеріальної біології [1, 2]. Крім того, виявляється, що як вроджена, так і адаптивна частина імунної системи можуть також брати участь у цій загальній запальній тенденції, яка пов’язана з атеросклерозом [3–7]. Ми провели різні терапевтичні дослідження генотерапії на основі аденоасоційованого вірусу (AAV) на тваринній моделі атеросклерозу (миша-нокаутуючий рецептор ліпопротеїдів низької щільності на дієті з високим вмістом холестерину, LDLR-KO HCD) для досягнення конкретної мети статус інфільтрату артеріальних імунних клітин з імуносупресивними цитокінами та генами хемо-атрактантів/репелентів лейкоцитів/репелентів хемокінів і, таким чином, інгібуючи атеросклероз [8–15].
Нещодавно ми опублікували дослідження, яке продемонструвало, що системна доставка генів AAV/Netrin1 здатна інгібувати атеросклероз у мишей LDLR-KO на HCD [13]. Це було показано за допомогою ультразвукового вимірювання високої роздільної здатності (HRUS) площі поперечного перерізу аорти, товщини стінки та систолічної швидкості крові. Всі ці виміри вказували на те, що доставка гена Netrin1 призвела до значно нижчого атеросклерозу. Однак, проаналізувавши експресію різних генів за допомогою Q-PCR, ми виявили, що як експресія Forkhead Box P3 (FOXP3), так і експресія CD25 сильно регулюються у тварин, які отримували AAV/Netrin1 [13]. Звичайно, і FOXP3, і CD25 є відмітними маркерами регуляторних Т-клітин (Treg). Однак точний механізм регулювання FOXP3 та CD25 за допомогою Netrin1 в аортах, підданих HCD, ще залишається визначити.
З цих двох генів FOXP3, зокрема, головний фактор транскрипції регуляторних Т-клітин (Treg), інтригує як терапевтичний ген, оскільки фенотип Treg пов’язаний з експресією FOXP3, а Treg впливає як на вроджений, так і на адаптивний імунітет [3–7 ]. Саме індукція гена FOXP3 призводить до надання імуносупресивної функції клітинам-попередникам Treg, а видалення експресії цього самого гена у зрілих клітинах Treg призводить до втрати ідентичності лінії Treg та помітного зниження імунодепресивних властивостей [16 –19]. Тут ми характеризуємо ефект доставки гена FOXP3 людини (h) на основі AAV шляхом системного введення в хвостову вену для інгібування атеросклерозу на моделі тварин LDLR-KO/HCD. У цьому дослідженні ми використовуємо людський (h) трансген FOXP3, а не мишу (m) версію Foxp3, оскільки білки hFOXP3 та mFOXP3 є гомологічними на 86%, і використання людської версії наближає нас на крок до клінічних випробувань.
Методи
Заява про етику
Усі експериментальні процедури проводились відповідно до протоколів, затверджених Інституційним комітетом з догляду та використання тварин Центральної системи охорони здоров'я ветеранів штату Арканзас у Літл-Рок. Проект фінансувався грантом Управління ветеранів за оцінку заслуг ЛЖВ.