Короткочасне споживання дієти, багатої фруктозою, жирами та холестерином, викликає у мишей стеатоз печінки

Аннет Брандт

1 Відділ харчових наук, Молекулярно-харчові науки, Віденський університет, A-1090, Відень, Австрія; [email protected] (A.B.); [email protected] (A.J.E.)

2 Інститут харчових наук, SD Модельні системи молекулярного харчування, Університет Фрідріха-Шиллера, Єна, D-07743, Єна, Німеччина; moc.liamtoh@2002-ijiat (C.J.J.); ten.xmg@etloNajtaK (K.N.); ed.xmg@nnamlleSnirhtaC (C.S.)

Чен Цзюнь Цзінь

Катя Нолте

Кетрін Зеллманн

Анна Яніна Енгстлер

Іна Бергхайм

Пов’язані дані

Анотація

1. Вступ

З поширеністю від

Від 2% до 44% серед загальноєвропейського населення та

24% серед дорослих людей у Північній Америці вважають, що безалкогольна жирова хвороба печінки (НАЖХП) на сьогодні є найпоширенішою хворобою печінки у світі [1,2]. НАЖХП включає широкий спектр захворювань, починаючи від простого стеатозу і закінчуючи стеатогепатитом, цирозом, а в деяких випадках навіть гепатоцелюлярною карциномою [3]. Однак, незважаючи на інтенсивні дослідницькі зусилля, молекулярні механізми, що лежать в основі розвитку НАЖХП, ще не з'ясовані. Відповідно, загальновизнані варіанти лікування також все ще обмежені, а терапія, що орієнтується на способи життя та дієти, що мають високий рівень рецидивів, все ще залишається обраною стратегією лікування [4].

Виходячи з цього передумови, метою цього дослідження було визначити, чи є короткочасна зміна режиму харчування, наприклад, споживання дієти, багатої жирами, фруктозою та холестерином (КФК) лише протягом чотирьох днів, достатньою, щоб порушення функції кишкового бар’єру та початок НАЖХП. Далі наше дослідження мало на меті визначити, чи лікування терапевтичними дозами нерассасывающихся антибіотиків паралельно індукції хвороби захищає мишей від змін кишкового бар'єру, наприклад, втрати білків з щільним з'єднанням, чи захист, пов'язаний з лікуванням антибіотиками, скоріше пов'язаний до виведення бактерій з кишечника.

2. Матеріали та методи

2.1. Тварини та лікування

90% порівняно з мишами, обробленими носієм. Споживання дієти оцінювали щодня та коригували між групами так, щоб усі групи отримували однакову кількість калорій. Після жертви мишей знеболювали сумішшю кетаміну (100 мг/кг маси тіла) та ксилазину (16 мг/кг маси тіла) внутрішньочеревно. Кров брали з ворітної вени. Частини печінки та тонкої кишки (дванадцятипалої кишки та тонкої кишки) або негайно заморожували, фіксували у формаліні з нейтральним буфером, заморожували у кріпильних середовищах з оптимальною температурою різання (OCT) (Medite, Бургдорф, Німеччина) або зберігали в РНК пізніше ® при −20 ° C (Sigma-Aldrich, Steinheim, Німеччина).

Короткий зміст дизайну дослідження. Після адаптації мишей протягом 7 днів до прийому рідкої дієти з наступною 4-денною попередньою обробкою нерассасывающимися антибіотиками (92 мг поліміксину В/кг маси тіла/добу та 216 мг неоміцину/кг маси тіла/добу) або транспортного засобу ( = вода), додана до дієти для контролю рідини, мишей (n = 6–8/група) годували або рідкою дієтою для контролю, або дієтою, багатою жирами, фруктозою та холестерином (FFC) ± антибіотиками ще протягом 4 днів.

2.2. Гістологічна оцінка ділянок печінки та накопичення печінкових ліпідів

Гістологію печінки оцінювали у врізаних парафіном зрізах (4 мкм), пофарбованих гематоксиліном та еозином (обидва Sigma-Aldrich, Steinheim, Німеччина), використовуючи оцінку активності NAFLD (NAS), як описано раніше [16]. Заморожені зрізи печінки, зафіксовані в ОСТ (10 мкм), фарбували Олійно-червоним O (Sigma-Aldrich, Steinheim, Німеччина), як описано раніше [17]. Репрезентативні фотографії обох фарбувань були зроблені зі збільшенням 200 × за допомогою системи, вбудованої в мікроскоп (LED Leica DM4000 B, Leica, Wetzlar, Німеччина). Щоб визначити кількість нейтрофільних гранулоцитів у тканині печінки, вкладені в парафін зрізи (4 мкм) фарбували за допомогою комерційно доступного набору естрази хлорацетату Naphthol AS-D (Sigma-Aldrich, Steinheim, Німеччина). Кількість нейтрофілів визначали кількісно, як було детально описано раніше [13]. Печінкові тригліцериди витягували із цілої тканини печінки та вимірювали, як описано раніше [13].