Оптимізація методу мембранного живлення для зараження плазмодієм vivax у Anopheles albimanus

Афілійований центр вакцин та боротьби з малярією (MVDC), Калі, Валле-де-Каука, Колумбія

Науково-дослідний центр "Каукаскоко", Калі, Калі, Валле-де-Каука, Колумбія

Філія Кентського державного університету, коледж громадського здоров'я, Кент, Огайо, Сполучені Штати Америки

Науково-дослідний центр "Каукаскоко", Калі, Калі, Валле-де-Каука, Колумбія

Андрес Ф. Вальєхо,
Келлі Рубіано,
Андрес Амадо,
Емі Р. Кристосік,
Сократ Еррера,
Міріам Аревало-Еррера

Цифри

Анотація

Вступ

У осіб, які тривалий час перебувають під впливом малярійних інфекцій, розвивається імунна реакція, здатна блокувати передачу плазмодію переносникам комарів, потенційно обмежуючи поширення паразитів в природі. Розробка вакцини проти туберкульозу проти малярії вимагає кращого розуміння механізмів та основних ефекторів, що відповідають за реакції блокування передачі (ТБ). Відсутність системи культивування in vitro для плазмодію вівакс стала важливим недоліком для розробки стандартизованого методу оцінки реакцій на туберкульоз на цього паразита. У цьому дослідженні оцінювали фактори господаря, переносника та паразитів, які можуть впливати на інфекцію комарів Anopheles, з метою розробки ефективного та надійного аналізу для оцінки імунітету проти туберкульозу.

Методи/Основні висновки

Загалом 94 пацієнти, інфіковані P. vivax, були зараховані як донори паразитів або суб’єкти прямого годування комарів у двох ендемічних районах малярії Колумбії (Тієральта та Буенавентура). Інфекційність паразитів оцінювали за допомогою аналізу мембранного живлення або прямого вигодовування з використанням лабораторно вирощених комарів Anopheles. Інфекцію вимірювали за допомогою qPCR та мікроскопічно досліджуючи середні кишки комарів на 7 день на наявність ооцист.

Найкращої зараженості вдалося досягти у чотириденних комарів, яких годували щільністю 100 комарів/клітка. Мембранні аналізи годування давали статистично значущі кращі інфекції, ніж аналізи прямого годування у донорів паразитів; цитокінові профілі показали підвищений рівень IFN-γ, TNF та IL-1 у неінфекційних осіб. Інфекції комарів та дозрівання паразитів були більш надійно оцінені методом ПЛР порівняно з мікроскопією.

Висновки

Ми оцінили фактори комарів, паразитів та господарів, які можуть вплинути на результат передачі паразитів, виміряні за допомогою аналізів штучного мембранного харчування. Результати привели нас до висновку, що: 1) оптимальна зараженість комарів відбувається у комарів через чотири дні після появи при щільності клітини 100; 2) зараженість комарів найкраще оцінити за допомогою ПЛР, оскільки вона може бути недооцінена мікроскопією; 3) клітинна імунна відповідь хазяїна не суттєво впливала на зараженість комарів; та 4) не спостерігалося статистично значущої різниці у передачі між комарами, які безпосередньо харчуються людьми, та аналізами штучного мембранного годування.

Підсумок автора

Тут ми оцінили фактори хазяїна, переносника та паразитів для аналізу мембранного живлення за допомогою комарів Plasmodium vivax та Anopheles albimanus та зразків з ендемічних регіонів Колумбії. Цей метод дослідження мембранного годування дозволив більш ефективно оцінити наявність активності туберкульозу в сироватках людей з ендемічних регіонів малярії, а також у сироватках імунізованих тварин та людей. Цей метод може сприяти кращій оцінці імунних реакцій на туберкульоз, спричинених природною інфекцією, а також подальшій оцінці захисної ефективності вакцин проти туберкульозу проти малярії.

Цитування: Vallejo AF, Rubiano K, Amado A, Krystosik AR, Herrera S, Arévalo-Herrera M (2016) Оптимізація аналізу мембранного живлення для зараження плазмодієм vivax у Anopheles albimanus. PLoS Negl Trop Dis 10 (6): e0004807. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0004807

Редактор: Паулу Філемон Пімента, Фундасао Освальдо Крус, БРАЗИЛІЯ