Ресвератрол потенціює рапаміцин для запобігання гіперінсулінемії та ожиріння у мишей-самців із високим вмістом жиру

О В Леонтьєва

1 Відділ біології стрес-клітин, Інститут раку в Розуеллі, BLSC, L3-312, Вулиці Елма та Карлтона, Буффало 14263, Нью-Йорк, США

Г Пашкевич

Z N Демиденко

М V Благосклонний

Анотація

Результати

Низькі дози рапаміцину не перешкоджають збільшенню ваги у мишей-самців на HFD

Рівень інсуліну в крові (a), IGF-1 (), глюкоза (c) і тригліцериди (d) в кінці лікування. Мишей на RD або HFD обробляли ресвератролом, рапаміцином або комбінацією ресвератролу і рапаміцину протягом 13 тижнів, як це описано в легенді на малюнку 1. 1: RD; 2: HFD; 3: HFD + resv (ресвератрол); 4: HFD + рапа (рапаміцин); 5: HFD + Re + Ra (+ ресвератрол + рапаміцин у комбінації). В кінці лікування визначали рівень інсуліну, глюкози, тригліцеридів та IGF-1 натще у крові. Наявні дані означають ± S.E.M для кожної групи мишей. Статистично значущі відмінності оцінювали за допомогою t-критерію Стьюдента

Співвідношення між метаболічними змінами

Існувала сильна кореляція між вагою та рівнем інсуліну, коли дві групи мишей на двох різних дієтах поєднувались (звичайна дієта (RD) та HFD) (рис. 4а). Лікування рапаміцином та ресвератролом знижувало кореляцію, яка все ще залишалася значною. (Малюнок 3b). Кореляції між рівнем інсуліну та глюкози не було (рис. 4в). У трьох супергіперинсулінемічних («хворих») мишей був середній рівень глюкози (рис. 4в). Не було статистично значущої кореляції між вагою та тригліцеридами, а також між глюкозою та тригліцеридами.

Співвідношення між інсуліном та вагою ((a) необроблені групи та () всі групи) та інсуліну та глюкози (c) у окремих мишей в кінці лікування. 1: RD; 2: HFD; 3: HFD + resv (ресвератрол); 4: HFD + рапа (рапаміцин); 5: HFD + Re + Ra (+ ресвератрол + рапаміцин у комбінації). Кореляційний аналіз коефіцієнта р Пірсона та значення P (двосторонній) проводили за допомогою GraphPad Prism версії 5.00 для Windows

Ресвератрол пригнічує індуковану інсуліном HIF-1-залежну відповідь, не інгібуючи mTOR

Вплив ресвератролу на MTOR-залежну індукцію транскрипції, що реагує на HIF-1, у клітинах RPE. (a), (c): імуноблот-аналіз. Клітини RPE висівали в 10% MEM сироватки крові, а наступного дня середовище замінювали на MEM без сироватки протягом одного дня перед лікуванням. У безсироваткових клітинах MEM клітини обробляли зазначеними концентраціями ресвератролу, а потім інсуліном (a) або сироватка (c). Потім клітини лізували та проводили імуноблот для pS6 та S6. (), (d): Індукція люциферази, що реагує на HIF-1. Клітини трансфікували HRE -Luc (конструкція, що реагує на HIF-люциферазу), як описано раніше. На наступний день клітини обробляли, обробляли зазначеними концентраціями ресвератролу, а потім інсуліном () або сироватка (d). Через 16 год клітини лізували і вимірювали активність люциферази